白血病疫分型5.11课件

白血病免疫分型北京大学血液病研究所一、急性白血病FAB分型：1976年提出,以形态为基础。

ALLL1以小细胞为主，大小一致L2以大细胞为主，大小不一L3以大细胞为主，大小一致AMLM0 微小分化型急性髓细胞白血病,原始细胞>30%M1 急性髓细胞白血病未分化型,原始细胞》90%M2 急性髓细胞白血病部分分化型，原始细胞30-89%M3 急性早幼粒细胞白血病，异常早幼粒细胞>30%M4 急性粒单核细胞白血病，原始细胞>30%，单核20-80%M5 急性单核细胞白血病，原单+幼单>30%M5a 未分化型，原单细胞》80%M5b 部分分化型，原单细胞<80%M6 急性红白血病，原始细胞>30%，有核红细胞>50%M7 急性巨核细胞白血病，原巨核细胞>30%二、急性白血病的MIC分型：1985-1986提出MIC：MorphologyImmunologyCytogenitics80年代免疫学研究的进展，单克隆抗体的大量涌现，利用特异的单抗可以明确区分ALL、AML及进一步鉴定亚型，对研究白血病的生物学特性，指导临床治疗及判断预后起着重要的作用三、免疫分型的作用：区分ALL、AML：形态、组化难以诊断的病例（不典型、治疗后）将ALL分为B、T细胞及根据细胞发育阶段分为几种亚型对M0、M6、M7具有诊断意义：M0：形态似ALL、组化（-),MPO(+),髓标志+,T,B-M6：GlyA+，CD71+M7：CD41+，CD61+（Iib/IIIa）泛B标志:CD19，HLA-DR，cCD79a/cCD22幼稚B标志:CD34，TdT，CD10，成熟B标志:CD22，CD23，FMC7四、正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点及白血病细胞免疫标志特点(一).正常B细胞标志：CD19TdTCD34CD10CD20FMC7CD22CD23I期：+ + + -II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+II期:+III期:+B-ALL的分型普通型B细胞白血病++/-++Common

B-ALL急性前B细胞白血病+-/+++亚型 CD19

CD34

TdT

CD10

CyIg

SmIg急性早期B前体细胞白血病

+

+

+

-

-

-early

B-precursor

ALL-

-+

-+-

-

- -/+

+Pre

B-ALL急性B细胞白血病B-ALL意义:CommonB-ALL预后相对较好，CD34+B-ALL比CD34-预后好，但CD34+患者伴Ph1+预后差。B-ALL预后相对差，但随化疗方案改进，预后有所改善。

CD7

CD2

CD5

CD34

CD1a

CD3c/m

CD4

CD8I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:I期:泛T:CD2，CD5，CD7，cCD3幼稚T:CD34，TdT，CD1a,CD4/8，成熟T:CD3，CD4，CD8(二).正常T细胞标志：根据在胸腺内发育阶段分4期T-ALL的分型TdT

CD3c/m++-

+分型

CD7

CD2急性早期T前体细胞白血病

+

-early

T

precursor

ALL急性T细胞白血病

+

+T-ALLLL特点:幼稚T细胞数量增多:CD34+，TdT+泛T标志丢失CD4/8双+或CD4/CD8单阳意义：儿童：ALL发病率占肿瘤的25%，B-ALL预后比T-ALL相对好成人：ALL发病率20%T-ALL预后比B-ALL好。

(三).正常粒细胞标志全粒细胞标志:CD13，cMPO幼稚粒细胞:CD34，CD117，HLA-DR，CD33成熟粒细胞:CD15，CD11b，CD10，CD64cMPO

CD13

CD34

CD117

HLA-DR

CD33

CD11b

CD15

CD64

CD10-幼稚粒

+

+

+

+

+

+

-

-

-成熟粒

+

+

-

-

-

-

+

+

++(四).正常单核细胞标志:HLA-DR

CD33

CD13

CD34

CD117

CD14

CD64幼稚单+++++

-

-成熟单+++--

+

+全单核细胞标志:CD33，CD13，HLA-DR幼稚单核细胞标志:CD34，CD117，成熟单核细胞标志:CD14，CD64(五).成熟粒、单核细胞主要区别:成熟粒细胞:CD33-HLA-DR-CD14-CD64+dim成熟单核细胞:CD33+HLA-DR+CD14+CD64+st正常BM各系细胞比率：淋巴：20-30%：T：70%，B：20%，NK：10%；

单核：2-6%±；粒细胞：40-60%；有核红：<50%FCM的主要测定指标：FSC，SSC，FL1，FL2，FL3（FL4）FSC：反应细胞的大小。SSC：反应细胞内颗粒的多少。FCM设门法：FSC/SSC：

缺点：

不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开CD45/SSC：CD45是WBC抗原，RBC.Plt为阴性。CD45在成熟细胞表达强，幼稚细胞表达弱，在淋巴、单核及粒细胞表达强度不同。优点：能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开。特异分析白血病细胞免疫表型FCM标记方法：单标：一种单抗/tube:FL1,FSC,SSC(三参数）双标：(两种单抗/tube/)：FL1,FL1,FSC.SSC（四参数）三/四标：(三种单抗/tube)(四种单抗/tube)：FL1-FL3/4,FSCD45CD5CD19CD64CD34CD11bCD117SidescatterCD64CD11bide

scatterCD45CD7CD117CD34CD5CD19HLA-DRCD11bCD117CD45CD7CD19CD117CD34CD11bCD7SidescatterCD117CD11bCD10-,CD34-CD45CD7CD8CD117CD3CD34CD38HLA-DRCD7SidescatterCD45CD7CD8CD117CD3CD34CD38HLA-DRCD7cCD3SidescatterSide

scatterCD45cCD22CD117CD34cCD13CD10HLA-DRcCDMPOCD13IGg1CD45CD5CD19CD64CD34HLlA-DRCD117SSiiddee

ssccaatttttteerrCD64CD11bcMPOCD45CD117

7CD34CD34CCDD6644CD34CD34CD117de

scatterCCDD6644CD11bCD11bCD79aCD45CD5CD19CD64CD34HLlA-DRCD117SidescatterSide

scatterCD64CD11bCD45CDCDC5D5D5CD19CD64CD34CD7ide

scatterSide

scatterCD64CD11bCD117CD117CD13CD45CDCDC5D5D5CD19CD64CD34CD117SSiiddeessccatattetrerCD64CD11bCD11bGlyAGlyACD45CD5CD19CD64CD34CD11bCD64CD11bCD117CD41干祖细胞标志:T祖细胞B祖细胞 髓祖细胞+

++--CD34TdTCD117HLA-DRCD38++-/++/-+++/-+++诊断白血病主要标志：B-ALL：CD34