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2026年病理切片制作培训试题(附答案)一、单项选择题(共20题,每题1分,共计20分。每题只有1个正确答案,多选、错选、不选均不得分)1.常规病理组织活检最常用的固定液是()A.95%乙醇B.10%中性缓冲福尔马林C.4%多聚甲醛-戊二醛混合液D.Bouin液2.病理组织固定时,固定液的体积至少应为组织块体积的()A.1-5倍B.5-10倍C.10-20倍D.20-30倍3.常规石蜡制片的乙醇脱水梯度顺序正确的是()A.70%乙醇→80%乙醇→90%乙醇→95%乙醇→100%乙醇→100%乙醇B.70%乙醇→80%乙醇→90%乙醇→95%乙醇Ⅰ→95%乙醇Ⅱ→100%乙醇Ⅰ→100%乙醇ⅡC.80%乙醇→70%乙醇→90%乙醇→95%乙醇→100%乙醇D.70%乙醇→90%乙醇→95%乙醇→100%乙醇→100%乙醇4.临床病理实验室最常用的透明剂是二甲苯,其最主要的缺点是()A.透明速度慢B.长时间浸泡易使组织变硬变脆C.不能与乙醇互溶D.不能溶解石蜡5.常规使用熔点为56-58℃的石蜡时,浸蜡的适宜温度范围是()A.54-56℃B.58-60℃C.62-64℃D.66-68℃6.胃肠道活检组织石蜡包埋时,正确的组织摆放方向是()A.黏膜面朝上,平铺于包埋盒底部B.浆膜面朝上,平铺于包埋盒底部C.侧立放置,使黏膜层与浆膜层垂直于包埋盒底面D.随意摆放,不影响后续切片7.常规HE染色病理切片的标准厚度为()A.1-2μmB.2-3μmC.4-5μmD.8-10μm8.切片时出现规律性颤痕(振纹)的原因不包括()A.切片机固定螺丝松动B.刀片刃口存在缺口C.组织块钙化或过硬D.组织脱水不充分9.常规HE染色前,烤片的适宜条件是()A.37℃2hB.45℃1hC.60℃30minD.80℃10min10.HE染色中用于分色(分化)的常用试剂是()A.1%盐酸乙醇溶液B.5%冰醋酸溶液C.0.5%氨水溶液D.1%伊红乙醇溶液11.HE染色中“返蓝”环节的主要作用是()A.增强细胞质的染色强度B.使酸性环境下呈棕红色的细胞核恢复为蓝色C.去除多余的伊红染色D.增加组织的通透性,利于染液渗透12.以下哪种组织制片前必须进行脱钙处理()A.肝脏组织B.淋巴结组织C.骨及钙化组织D.脑组织13.判断骨组织脱钙终点的金标准方法是()A.针刺法B.称重法C.X线影像学检测法D.脱钙液颜色观察法14.以下哪种临床场景首选冷冻切片制作()A.常规门诊活检标本诊断B.术中快速病理诊断C.免疫组化染色D.特殊染色15.常规术中冷冻切片的标准厚度范围是()A.1-2μmB.3-4μmC.5-6μmD.8-10μm16.免疫组化染色前的抗原修复中,目前临床应用最广泛、效果最稳定的方法是()A.胃蛋白酶消化法B.高压热修复法C.微波修复法D.室温Tris缓冲液浸泡法17.HE切片出现云雾状背景、局部染色浅淡,最可能的原因是()A.脱蜡不彻底B.分化过度C.苏木素染液失效D.烤片时间过长18.以下关于中性树胶封片的操作要求,说法错误的是()A.树胶用量以完全覆盖组织且不外溢为宜B.盖玻片从一侧缓慢放下,避免产生气泡C.封片前组织需完全脱水透明,避免残留水分D.树胶浓度越高,封片后的保存效果越好19.病理切片质量分级中,以下属于丙级(不合格)切片判定标准的是()A.切片完整,厚度4-5μm,无皱褶B.核质染色对比清晰,无染色不均C.存在明显脱片、刀痕或颤痕,影响病理诊断D.封片无气泡,标签信息完整清晰20.以下不符合数字病理全切片扫描制片要求的是()A.切片无皱褶、无刀痕,厚度均匀B.组织位于玻片中心扫描区域内C.封片树胶可少量溢出盖玻片边缘,不影响组织观察D.盖玻片完全覆盖组织,无气泡残留二、多项选择题(共10题,每题2分,共计20分。每题有2个及以上正确答案,多选、少选、错选、不选均不得分)1.病理组织良好固定的标准包括()A.组织保持原有形态结构,无自溶、腐败B.组织硬度适中,利于后续脱水、包埋操作C.细胞内蛋白质、核酸等成分凝固,防止弥散D.固定后组织体积越大,固定效果越好2.脱水过程中导致组织变硬变脆的原因有()A.高浓度乙醇(100%乙醇)停留时间过长B.脱水温度过高,乙醇挥发过快C.脱水梯度跳跃过大,直接从低浓度乙醇进入高浓度乙醇D.组织块过大,内部脱水不充分3.以下属于石蜡包埋操作核心要点的有()A.包埋前严格核对组织块编号与包埋盒编号,避免错号B.组织切面朝向包埋盒底部,压平确保切面与盒底平行C.不同大小、不同患者的组织块可混合包埋以提高效率D.包埋后快速冷却,保证石蜡结晶细腻、硬度均匀4.石蜡切片出现厚薄不均的常见原因有()A.切片机刀座或组织夹螺丝松动B.石蜡块硬度不均(部分区域蜡质软)C.刀片刃口存在缺口D.组织块与组织夹固定不牢,切片时晃动5.HE染色中细胞核染色过浅的常见原因有()A.苏木素染液氧化失效,染色能力下降B.盐酸乙醇分化时间过长,苏木素被过度洗脱C.脱蜡不彻底,石蜡残留阻挡染液渗透D.伊红染色时间过长,掩盖细胞核颜色6.以下关于冷冻切片的说法正确的有()A.制作周期短,适用于术中快速病理诊断B.可保存组织内的酶活性与脂质成分,适用于特殊染色C.切片形态结构清晰度优于常规石蜡切片D.脂肪组织、脑组织等软组织适合冷冻制片7.导致HE切片脱片的常见因素有()A.载玻片清洁度差,未涂布防脱片剂B.烤片温度过低、时间不足,组织未充分贴附C.脱蜡不彻底,组织与玻片间残留石蜡D.染色过程中冲洗水流过猛,冲击组织8.Masson三色染色是临床常用的特殊染色方法,以下说法正确的有()A.用于区分胶原纤维与肌纤维B.胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色C.细胞核呈棕黄色D.常用于诊断器官纤维化、心肌梗死等病变9.病理切片制作过程中的生物安全要求包括()A.操作时穿戴工作服、一次性手套、医用外科口罩等防护用品B.所有新鲜组织标本均视为具有感染性,按生物安全要求处置C.废弃组织、一次性耗材按医疗废物分类收集处置D.甲醛、二甲苯等挥发性有毒试剂在通风橱内操作10.数字病理全切片扫描前的制片质量要求包括()A.组织切片完整,无皱褶、无明显刀痕B.盖玻片大小适宜,完全覆盖组织,无气泡C.封片树胶无溢出,避免污染扫描镜头D.标签粘贴整齐,不遮挡组织扫描区域三、判断题(共10题,每题1分,共计10分。正确打“√”,错误打“×”)1.病理组织固定时间越长,固定效果越好,越有利于后续制片与染色。()2.脱水时乙醇浓度应从高到低逐步进行,可减少组织过度收缩。()3.透明的核心作用是去除组织内的乙醇,使石蜡能够充分渗入组织间隙。()4.石蜡包埋时,组织的目标切面应朝向包埋盒底部,保证切片时能切到最大切面。()5.切片时出现纵向刀痕的主要原因是切片机固定螺丝松动。()6.HE染色中,苏木素是碱性染料,主要与细胞核内的酸性物质结合,使细胞核呈蓝色。()7.骨组织脱钙时,脱钙液温度越高,脱钙速度越快,制片质量越好。()8.冷冻切片中组织内出现冰晶伪影,主要是由于冷冻速度过慢导致细胞内外形成大冰晶。()9.免疫组化染色的切片,烤片时间越长,抗原保存越好,切片越不容易脱片。()10.病理切片制作完成后,仅需核对切片与申请单编号一致,无需记录制片过程参数。()四、简答题(共4题,每题10分,共计40分)1.简述常规石蜡病理切片制作的基本流程及各环节的核心质量控制要点。2.分析HE染色切片出现背景模糊、染色不均的常见原因及解决措施。3.比较冷冻切片与常规石蜡切片的优缺点,并简述各自的临床适用场景。4.简述病理切片制作过程中的生物安全防护要点及医疗废物处置要求。五、实操分析题(共2题,每题5分,共计10分)1.某技术员制作胃黏膜活检石蜡切片时,出现切片碎裂、不成形的问题,请分析可能的原因及对应解决方法。2.某实验室批量制作HE染色切片时,所有切片的细胞核均染色偏浅,细胞质染色基本正常,请分析最可能的原因并给出排查解决思路。【参考答案】一、单项选择题1.B2.C3.B4.B5.B6.C7.C8.D9.C10.A11.B12.C13.C14.B15.C16.B17.A18.D19.C20.C二、多项选择题1.ABC2.ABC3.ABD4.ABD5.ABC6.ABD7.ABCD8.ABD9.ABCD10.ABCD三、判断题1.×2.×3.√4.√5.×6.√7.×8.√9.×10.×四、简答题1.答题要点:(1)基本流程:取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→烤片→脱蜡→染色→封片→信息核对(2分)(2)核心质控要点:①取材:组织厚度≤0.3cm,大小≤2cm×2cm,避免机械挤压,严格核对标本编号,特殊标注需定向的组织(2分)②固定:采用10%中性缓冲福尔马林(pH7.2-7.4),固定液体积为组织的10-20倍,常温固定24-48h,避免固定不足或过度(1.5分)③脱水:梯度乙醇从低到高逐步进行,控制各梯度停留时间,避免脱水过度(组织变脆)或不足(透明浸蜡不佳),脱水温度≤37℃(1.5分)④透明浸蜡:二甲苯透明时间根据组织大小调整(15-60min),避免过度透明;浸蜡温度高于石蜡熔点2-3℃,更换3次蜡液保证浸蜡充分(1分)⑤包埋切片:核对编号,组织切面朝下压平,快速冷却制蜡块;切片厚度4-5μm,完整无皱褶,展片充分(1分)⑥染色封片:脱蜡彻底,染色核质对比清晰,封片无气泡、无溢胶,标签信息准确(1分)2.答题要点:(1)脱蜡不彻底:二甲苯使用时间过长、浓度不足或脱蜡时间不够,导致石蜡残留阻挡染液(2分);解决措施:定期更换二甲苯,保证3道脱蜡二甲苯的有效性,室温较低时可适当加温二甲苯或延长脱蜡时间(1分)(2)脱水透明不充分:脱水试剂失效、梯度异常,导致组织内水分残留,染液渗透不均(1分);解决措施:定期检测乙醇浓度,更换失效脱水剂,调整脱水程序,控制组织块大小符合要求(1分)(3)染液问题:苏木素或伊红染液氧化失效、混入杂质,染色能力下降(1分);解决措施:定期更换染液,使用前过滤染液,采用稳定型苏木素染液,定期监测染液染色效果(1分)(4)切片质量差:切片厚薄不均、有皱褶,或载玻片有油污(1分);解决措施:更换新刀片,调整切片机参数,保证切片厚度均匀,展片时充分展平皱褶,使用清洁的载玻片(1分)(5)分化或返蓝不当:分化过度或返蓝不足,导致核染色浅淡不均(1分);解决措施:镜下监控分化程度,调整分化时间,保证返蓝充分(1分)3.答题要点:(1)冷冻切片:优点:制作周期短(10-30min),无需脱水透明浸蜡流程,能最大程度保存组织内的酶活性、脂质成分与抗原性(2分);缺点:切片厚度略厚,组织易出现冰晶伪影,形态结构清晰度弱于石蜡切片,组织块无法长期保存(1.5分);适用场景:术中快速病理诊断(肿瘤良恶性判定、切缘评估)、酶组织化学染色、脂质成分显示、免疫荧光染色(1.5分)(2)石蜡切片:优点:切片厚度均匀(4-5μm),组织形态结构清晰,可批量制作,蜡块与切片可长期保存,适合各类后续染色(2分);缺点:制作周期长(常规1-2天),脱水透明过程会导致组织收缩,部分抗原、酶、脂质会被破坏或溶解(1.5分);适用场景:常规病理诊断、免疫组化染色、各类特殊染色、病理档案保存、科研标本制备(1.5分)4.答题要点:(1)生物安全防护要点:①个人防护:操作时穿戴工作服、一次性手套、医用外科口罩,接触甲醛、二甲苯等挥发性有毒试剂时需在通风橱内操作,必要时佩戴护目镜,严禁直接用手接触新鲜组织标本(3分)②标本防护:所有新鲜组织均视为具有潜在感染性,取材、处理标本在生物安全柜或专用操作台进行,避免标本溅洒,操作后及时消毒台面(2分)③试剂防护:有毒有害试剂密封保存,定期检测实验室空气中甲醛、二甲苯浓度,符合职业卫生标准,避免试剂接触皮肤黏膜(2分)④环境防护:实验室定期通风、空气消毒,设备使用后及时清洁消毒(1分)(2)医疗废物处置:①感染性废物:废弃组织、一次性手套、口罩、污染耗材等放入黄色医疗废物专用包装袋,密封后交由有资质的医疗废物处置单位处理(1分)②化学性废物:废弃二甲苯、乙醇、染液等化学试剂分类收集于专用密封容器,交由有资质的危废处置单位处理,严禁直接排入下水道(1分)五、实操分析题1.答题要点:(1)固定不当:固定液浓度不足、固定时间过短导致组织自溶松散,或固定时间过长导致组织变脆(1分);解决:保证固定液浓度与体积,小活检组织固定时间6-24h,避免
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