肿瘤标志物的检测和临床应用专家讲座

肿瘤标志物检测和临床应用宿州市医学检验中心张长礼肿瘤标志物的检测和临床应用第1页前言

肿瘤是严重威胁人类健康高发病率和高死亡率性疾病,大量研究和防治资料证实,早期诊疗和早期治疗是防治肿瘤与降低死亡率最有效方法｡所以,肿瘤标志物出现使人们对肿瘤早期诊疗寄予了极大希望｡因为肿瘤早期不伴转移,轻易切除,可为患者赢得较多生存机会,所以,早期发觉､早期治疗可降低癌症死亡率,改进预后,提升生活质量｡肿瘤标志物检测对肿瘤辅助诊疗及判断肿瘤预后､转归､评价疗效,都含有主要意义｡伴随肿瘤基础研究深入和临床治疗实践经验积累,肿瘤标志物检测得到了从事肿瘤基础和临床工作者重视,已成为临床检测主要项目之一｡肿瘤标志物的检测和临床应用第2页OtherDiseases其它疾病36.6%Cardiopathy心脏病17.74%SeveralTumors

各种肿瘤24.9%Cerebrovascular

Diseases

脑血管疾病21.28%恶性肿瘤、脑血管疾病、心脏病

=高死亡率!肿瘤标志物的检测和临床应用第3页肿瘤早期诊疗早期根治主要性肿瘤是人体组织细胞因为内在和外界致病原因长时间作用,使细胞遗传物质DNA产生突变,细胞发生异常增生和功效失调造成一个疾病。世界卫生组织指出:若能早期诊疗并及时治疗,90-95%肿瘤是能够治愈。如胃癌早期行根治术，5年生存率达90%，如侵及肌层则下降为50-70%，如侵入浆膜则仅为8-17%。肿瘤早期诊疗虽有可能(因为肿瘤潜伏期可长达数月至多年)，但实际上十分困难，因为当前大多数诊疗技术都不适合肿瘤早期诊疗肿瘤标志物的检测和临床应用第4页

所以人们对肿瘤标志物检测寄予了极大希望。那么肿瘤标志物测定能否到达早期诊疗目标?能否对普通人群进行筛查?其临床意义到底有多大?评价有多高?引发了医学界争议。肿瘤标志物的检测和临床应用第5页当前临床应用中常见问题1.对肿瘤标志物在肿瘤诊疗中作用认识和评价不一致，甚至错误。2.纠正"不用”和"滥用”两个极端。肿瘤标志物的检测和临床应用第6页此次会议交流内容一、肿瘤标志物（TM)定义与分类二、TM试验室检测方法三、TM试验室检测基本标准四、TM试验室检测影响原因五、TM临床应用六、TM联合应用七、TM测定合理应用及注意事项八、TM临床价值评价(备)九、惯用TM临床意义(备)肿瘤标志物的检测和临床应用第7页一、肿瘤标志物定义肿瘤标志物（TM)是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞基因表示而合成份泌或是由机体对肿瘤反应而异常产生和/或升高反应肿瘤存在和生长一类物质，它包含蛋白质、激素、酶（同工酶)、多胺及癌基因产物等。TM存在于肿瘤患者血液、体液、细胞或组织中，可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法测定，且对肿瘤辅助诊疗、判别诊疗、观察疗效、监测复发以及预后评价含有一定价值。1978年Herberman在NCI人类肿瘤免疫诊疗大会上提出1979年英国第七届肿瘤发生生物学和医学会议上被确认使用肿瘤标志物的检测和临床应用第8页细胞TM

位于细胞中与肿瘤相关物质或抗原,如激素受体、生长因子受体、白血病表型、分子基因等。体液TM

肿瘤细胞分泌或脱落于血液、尿液或其它体液中、或是宿主对体内新生物反应而产生并进入体液物质。肿瘤标志物的检测和临床应用第9页（二)、TM分类

TM主要分为两类：肿瘤组织产生和肿瘤与宿主相互作用而产生。

1)肿瘤组织产生包含：分化抗原；胚胎抗原(AFP,CEA)；同工酶(NSE)；激素(HCG)组织特异性抗原(PSA,freePSA)；粘蛋白、糖蛋白、糖脂(CA125)癌基因及其产物；多胺类等

2)肿瘤与宿主相互作用后产生包含：血清铁蛋白；免疫复合物；急性时相蛋白同工酶；白细胞介素受体；肿瘤坏死因子

等3)不进入体液标志物肿瘤标志物的检测和临床应用第10页

（三)、理想肿瘤标志物

灵敏度高能早期检测出肿瘤患者；

特异性强能准确判别肿瘤/非肿瘤患者；

器官特异性方便对肿瘤定位；

与肿瘤大小或分期相关血清中水平与肿瘤体积大小、临床分期相关，

与预后相关血清中水平用以判断预后；

监测肿瘤复发半衰期短，可反应肿瘤动态改变，监测治疗效果、复发和转移

测定方法简便、经济,取样方便

然而当前所应用肿瘤标志物均未到达上述要求，但如正确合理使用，仍有很大临床价值，关键是要正确评价肿瘤标志物检测临床意义。肿瘤标志物的检测和临床应用第11页二、临床上诊疗肿瘤方法和试验室检验方法:物理学检验用生物物理方法，如X线，CT和超声等检验，只有当肿瘤大小最少到1～2cm时才能发觉，而此时肿瘤细胞数已达109以上。组织细胞学检验

需做病理切片检测，普通在出现临床症状或高度可疑时适用，或在手术后发觉。生物化学检验ALP、GGT、ALT、AFU等标识免疫学分析

灵敏度和特异性均较高，广泛应用于试验室检测，已被广泛应用检测方法主要有：放射免疫分析（RIA)、酶免疫分析（EIA)、时间分辨荧光免疫分析（TFIA)和化学发光免疫分析（CLIA)时间分辨荧光、基因芯片、表面增强激光解析/电离化飞行时间质谱等。肿瘤标志物的检测和临床应用第12页1.放射免疫分析

放射免疫分析自20世纪60年代问世以来，在生物医学各个领域得到了广泛应用。20世纪90年代，RIA技术研究主要进展是试管固相法。有学者将试管固相法称之为第四代RIA。固相RIA和免疫放射测量法（IRMA)灵敏度、特异性、稳定性及测量范围均优于液相竞争法；尤其是不需要使用离心机进行分离，简化了操作步骤，提升了检测精密度。活化试管RIA和IRMA技术系共价键结合，包被均一，稳定性好，实现了分析技术一步法，易于实现自动化分析。该技术反应条件要求普通,但所用试剂含有放射性,对人体有一定危害,试验人员应加强防护。肿瘤标志物的检测和临床应用第13页2.酶免疫分析

因为RIA和IRMA有着本身固有、难以克服缺点，Engvall和Vanweemen各自领导研究小组分别以酶代替同位素，于1971年创建了酶免疫分析技术(EIA)。因其标识物制备简单，使用期长，对环境无污染等特点，EIA技术得到了快速普及和发展。20世纪90年代后期，在EIA中引进了放大系统，主要是生物素—亲和素系统应用，使测定灵敏度赶上或超出了RIA。（1)酶联免疫荧光测量法（ELIFA)同时兼具酶联免疫吸附试验（ELISA)和荧光免疫分析（FIA)两种方法优点，其灵敏度较传统ELISA显著提升，最小检出值达10-15mol/L。（2)增强发光酶免疫分析法（ELEIA)是20世纪80年代后期发展起来新型免疫分析技术，其特点是：酶促增强发光信号，且发光信号保持稳定，该方法最小检出值达10-20mol/孔。肿瘤标志物的检测和临床应用第14页3.化学发光免疫分析

1981年，Pannagli将化学发光原理与免疫反应结合起来，建立了化学发光免疫分析法（CLIA)。这种方法即使灵敏度能够到达放免水平，不过影响检测结果原因较多，稳定性较差，而且在发生化学反应之后，样品发光无法再现。为了克服这一方法学上缺点，有学者着手研究发光稳定剂，方便使发光信号连续时间延长。最近研究结果证实，使用甲基吖啶酯标识抗体更为理想，因无须加催化剂，所以受外界原因干扰少，且操作简单，稳定性高，标识蛋白后不影响发光信号产生。当前，在这一领域全自动测定仪器研制发展很快，极大地提升了该方法分析效率和普及推广。近年来，免疫电化学发光（IECL)技术正在快速发展。这一方法含有灵敏、快速、稳定、选择性强、重现性好、易于操作、方法灵活多样优点。它是集电化学发光、生物素—抗生物素、免疫分析，并由固相免疫分析发展起来磁微球等技术于一体，是众多学科交叉研究领域。IECL分析方法多样，广泛地应用于抗原、半抗原和抗体免疫检测，其线性范围也较宽，符合临床检验需要。IECL技术发展趋势在于合成新发光标识物，优化标识技术和免疫分析方法。肿瘤标志物的检测和临床应用第15页3.1免疫化学发光分析(CLIA)

是将标识物改为能产生化学发光化合物,代替放射性标识物,最终依据发光信号强弱来反应复合物量。免疫化学发光分析优点是有很高灵敏度,无放射性元素对人体危害。主要缺点是发光时间短,需要严格掌握测量时间,不然会影响试验结果。肿瘤标志物的检测和临床应用第16页3.2化学发光酶免疫分析技术(CLEIA)CLEIA标识物是碱性磷酸酶标识抗体,底物是金刚烷。经过夹心法免疫反应,复合物带有酶标识,加入底物,酶促反应使底物断裂,同时产生发光。CLEIA因为酶存在,发光时间较CLIA长,结果愈加可靠。肿瘤标志物的检测和临床应用第17页3.3电化学发光免疫分析技术(ECLIA)

ECLIA标识物是三丙胺,试验形成复合物含三丙胺,三丙胺在电极周围失去电子成为还原剂。底物是三价钌化合物,该化合物在还原性三丙胺作用下还原成二价钌,同时发出光子。发射光子后二价钌即复原成三价,又可再次被还原,再发射光子,从而使信号显著增强。较CLIA和CLEIA法含有结果稳定可靠、信号显著增强发射光子能重复利用等特点。肿瘤标志物的检测和临床应用第18页4.时间分辨荧光免疫分析技术（TrFLA)TrFLA标识物由镧系元素（铕)经过一定连接剂与抗体蛋白相连而组成。含有信号强,缩短测量时间并提升灵敏度等优点。

存在缺点是标识物和荧光增强剂制备难度大,且荧光增强剂含一定有毒物质,废物应该严格处理。肿瘤标志物的检测和临床应用第19页5.生物芯片生物芯片能够分为基因芯片,蛋白芯片和芯片试验室三类。基因芯片指将大量探针分子固定于支持物上,与标识样品分子进行染交,经过检测每个探针分子染交信号强度进而获取样品分子数量和序列信息。它以其可同时、快速、准确地分析数以千计基因组信息本事而显示出了巨大威力,已应用于基因表示检测、寻找新基因、染交测序、基因突变和多态性分析以及基因文库作图等方面。

蛋白芯片以蛋白质代替DNA作为检测目标物,比基因芯片更深入靠近生命活动物质层面,因而有着比基因芯片愈加直接应用前景。

芯片试验室是生物芯片技术发展最终目标。它将样品制备、生物反应以及检测分析整个过程集约化形成幑型分析系统。肿瘤标志物的检测和临床应用第20页6、液体芯片检测技术伴随蛋白质组学发展,蛋白质芯片已经广泛应用于生物样品核酸序列检测和蛋白质研究中。液相悬浮芯片技术是今年来刚才兴起一个新检测技术。它集中了免疫学、分子生物学、高分子化学、激光检测技术、微流体技术和计算机等方面先进技术为一体,利用细胞大小塑料颗粒作为载体,以流式细胞术作检测平台,可在较短时间内对核酸、多肽、小分子蛋白质等进行快速检测。液态芯片技术检测灵敏,低限可至10pg;反应时间短,速度快,在35-60分钟内完成测定。含有很高准确性和重复性。反应条件比较温和,有利于探针和被检测物充分反应,大多数反应不需洗涤,反应过程靠近天然状态。肿瘤标志物的检测和临床应用第21页7、表面增强激光解析/电离化飞行时间质谱表面增强激光解析/电离化飞行时间质谱原理是经过亲合作用,蛋白质结合到芯片化学或生物位点上,激光脉冲使芯片中分析物解析形成荷电子,因为各种蛋白质分子量及所带电荷不一样,在仪器场中飞行时间长短不一,质量较轻离子飞行速度快,较早抵达检测器,较重离子飞行速度慢，较晚抵达检测器，依据抵达检测器飞行时间不一样而被检测即测定离子质荷比（M/Z)与离子飞行时间成正比，检测离子。该方法含有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点，为生命科学等领域提供了一个强有力分析测试伎俩，并正饰演着越来越主要作用。

肿瘤标志物的检测和临床应用第22页8、其它检测技术PCR：新华网合肥年8月24日电，记者从安徽省科技厅得悉，经过多年研究，以中国科学技术大学为依靠安徽省分子医学重点试验室在肿瘤标志物相关基因检测试剂盒研究上取得重大突破，当前，已经有5项创造专利获国家专利局授权，并成功转让实施产业化。其在诊疗肿瘤转移、复发技术上，采取逆转录聚合酶链反应（RT－PCR)新型诊疗技术，到达国际先进水平。基因探针流式细胞术高效毛细管电泳荧光偏振……肿瘤标志物的检测和临床应用第23页三、TM临床检测基本标准《肿瘤标志物临床检测基本标准》（中华医学会检验医学分会

肿瘤标志物教授委员会）1.TM对肿瘤辅助诊疗价值：

因为当前临床惯用TM在诊疗恶性肿瘤时，灵敏度和特异性不够高，只能用于肿瘤辅助诊疗；不能作为肿瘤诊疗主要依据；也不提倡对无症状人群进行普查。肿瘤标志物的检测和临床应用第24页三、TM临床检测基本标准2、应用TM对高危人群进行筛查时应遵照以下标准：

（1)该肿瘤标志物对早期肿瘤发觉有较高灵敏度。

（2)测定方法灵敏度、特异性高、重复性好[AEP、PSA]。

（3)筛查费用经济、合理。

（4)筛查发觉肿瘤标志物异常升高，，但无症状和体征时，必须复查和随访。肿瘤标志物的检测和临床应用第25页三、TM临床检测基本标准3.TM器官定位价值：

因为绝大多数TM对器官特异性不强，所以，TM阳性不能对肿瘤进行绝对定位。但少数肿瘤标志物（如前列腺特异性抗原、甲胎蛋白和甲状腺球蛋白等对器官定位有一定价值）。肿瘤标志物的检测和临床应用第26页三、TM临床检测基本标准4.TM在判断肿瘤大小和临床分期价值：

大多数情况下，TM浓度与肿瘤大小和临床分期之间存在着一定关联。但各期肿瘤TM浓度改变范围较宽，会有相互重合。所以，不能依据TM浓度高低来判断肿瘤大小及进行临床分期。肿瘤标志物的检测和临床应用第27页三、TM临床检测基本标准5.TM在肿瘤监测中价值：TM主要临床应用价值是判断肿瘤治疗疗效和复发监测。临床可经过对肿瘤患者治疗前后及随访中TM浓度改变监测，了解肿瘤治疗是否有效，并判断其预后，为深入治疗提供参考依据。为确定何种TM适合用于对肿瘤患者进行治疗监测，在患者治疗前应做相关TM检测。肿瘤标志物的检测和临床应用第28页三、TM临床检测基本标准6、TM浓度改变对肿瘤疗效判断价值：恶性肿瘤治疗后TM浓度改变与疗效之间有一定相关性，治疗后TM浓度改变，常有三种类型：

（1)TM浓度下降到参考范围，提醒肿瘤治疗有效。

（2)TM浓度下降但仍连续在参考范围以上，提醒有肿瘤残留和/或肿瘤转移。

（3)TM浓度下降到参考范围一段时间后，又重新升高，提醒肿瘤复发或转移。肿瘤标志物的检测和临床应用第29页疗效监测:许多TM能明确手术、放疗或药品治疗是否有效，有TM可反应肿瘤残余量，这种定量关系含有主要临床应用价值。疗效观察可参考以下标准:

无效:TM浓度与治疗前相比下降＜50％

改进:TM浓度与治疗前相比下降＞50％

有效:TM浓度与治疗前相比下降＞90％

显效:TM浓度下降至临界值以下。肿瘤标志物的检测和临床应用第30页三、TM临床检测基本标准7、TM定时随访标准：

恶性肿瘤治疗结束后，应依据病情对治疗前升高TM作定时随访监测。不一样TM半衰期不一样，所以监测时间和周期也不一样。

大部分国内外教授提议：治疗后6W做首次测定;3年内每3个月测定一次;3至5年每六个月测定一次;5至7年每年测定一次;随访中如发觉有显著升高，应1月后复测一次，连续2次升高，可预示复发或转移。此预示常早于临床症状和体征，而有利于临床及时处理。肿瘤标志物的检测和临床应用第31页三、TM临床检测基本标准8、TM联合检测标准：同一个肿瘤或不一样类型肿瘤可有一个或几个TM异常;同一个TM可在不一样肿瘤中出现。为提升TM辅助诊疗价值和确定何种TM可作为治疗后随访监测指标，可进行联合检测，但联合检测指标须经科学分析、严格筛选。在上述前提下，合理选择几项灵敏度、特异性能互补TM组成最正确组合，进行联合检测。经过临床应用，以循证医学观点来评价和修改联合检测TM组合。肿瘤标志物的检测和临床应用第32页测定TM试验室应遵照基本标准1.试验室必须使用国家相关机构同意仪器和试剂，做好室内质控和参加室间质评，以确保试验结果准确性、重复性和可比性。2、使用不一样方法、不一样试剂测定同一个TM时，其结果可能出现差异。为此同一患者在治疗前后及随访中，应采取同一个方法和试剂；肿瘤标志物的检测和临床应用第33页测定TM试验室应遵照基本标准3、在更换检测方法和试剂时，应作比对试验。4.检验医学工作者应了解TM方法学评价，并主动参加对TM评定和临床应用讨论。5、检验医学学术团体应制订对应TM应用标准。肿瘤标志物的检测和临床应用第34页四、影响血液和体液中肿瘤标志物浓度原因1．肿瘤大小和肿瘤细胞数目:肿瘤越大细胞越多，肿瘤标志物浓度越高。

2．肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物速度:肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物速度越快，血液循环中肿瘤标志物浓度越高。3．肿瘤组织血液供给好坏:若血液供给差，血液循环中肿瘤标志物浓度低。肿瘤标志物的检测和临床应用第35页4．肿瘤细胞是否有坏死和坏死程度:肿瘤细胞坏死后，释放出大量肿瘤标志物，使肿瘤局部和血液中肿瘤标志物浓度升高。5．肿瘤细胞分化程度和肿瘤分期:肿瘤细胞分化程度越差，恶性程度越高，越晚期，产生肿瘤标志物越多。

肿瘤标志物的检测和临床应用第36页6．肿瘤细胞是否表示和合成肿瘤标志物:有些肿瘤细胞不表示、不携带肿瘤标志物，则在血液和体液中就检测不到。

7．肿瘤标志物在体内降解和排泄速度:若肝、肾功效差，排泄速度慢，则肿瘤标志物在体内可异常升高。肿瘤标志物的检测和临床应用第37页

㈠分析前1.标本采集对检测结果影响:

⑴前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、导尿和直肠镜检验后，血液PSA和PAP值可升高(宜在此操作过后一周取样）；

⑵肝、肾功效异常和胆道排泄不畅、胆汁淤滞等均可造成如CEA.ALP、GGT等浓度增高。

TM试验室检测应注意问题肿瘤标志物的检测和临床应用第38页

⑶一些药品会影响肿瘤标志物浓度，如抗雄激素治疗前列腺癌时可抑制PSA产生，造成PSA假阴性结果。⑷

唾液和汗液污染标本可使鳞状上皮细胞癌相关抗原（SCC)、CA19-9浓度升高，CEA也会轻度升高。肿瘤标志物的检测和临床应用第39页2.标本保留对检测结果影响:

⑴血液标本采集后应及时离心，若从采血到血清分离间隔时间﹥60min，NSE浓度会从血小板中释放而增高;保留於4℃冰箱中，24小时内测定;如在2～3个月内测定，则应-20℃保留，防止重复冻融。

⑵酶类和激素类肿瘤标志物不稳定，易降解，应及时测定或低温保留。

肿瘤标志物的检测和临床应用第40页

⑶因为红细胞和血小板中也存在神经元特异性烯醇化酶（NSE)，所以，样本溶血可使血液中NSE浓度增高（RBC中有大量NSE，1%溶血可使血清NSE升高5ug/L)。

黄疸血样本，会引发PSA检测值升高。肿瘤标志物的检测和临床应用第41页

㈡分析中1.测定方法和试剂对检测结果影响：

从方法学来看，肿瘤标志物测定方法很多，有放射免疫测定法，酶联免疫测定法，化学发光免疫测定法等，每种测定方法有自己精密度和重复性，但手工操作方法重复性较差，误差比较大，操作时要尤其认真;用自动化仪器进行测定，重复性好，误差小。

肿瘤标志物的检测和临床应用第42页

有研究报道，使用12种不一样CEA试剂盒检测某一混合血清中CEA浓度，结果其差异超出100%。造成分析间误差主要原因是没有测定标准化，包含缺乏统一抗原、抗原成份、校正品和参考方法等。所以，在工作中要尽可能使用同一个方法，同一个仪器和同一厂家试剂盒进行测定。肿瘤标志物的检测和临床应用第43页2.交叉污染对检测结果影响:

当测定非常高浓度标本时，交叉污染成为一个造成假阳性潜在问题。所以应不时地复查有没有标本被交叉污染。

肿瘤标志物的检测和临床应用第44页3.嗜异性抗体对检测结果影响：

大多数肿瘤标志物测定中常使用一对鼠单克隆抗体来与肿瘤抗原反应，假如病人血清中存在嗜异性抗体（尤其是人抗鼠抗体)，它可能在两种鼠单克隆抗体间起“桥梁”作用，造成在无抗原情况下，出现肿瘤标志物浓度增高假象。肿瘤标志物的检测和临床应用第45页㈢

分析后:

1．参考值范围:不一样标本如血液、尿液、胸、腹水等，必须有不一样参考值。

不一样地域、不一样人群、不一样方法、不一样试剂和设备应建立自己参考值范围。

肿瘤标志物的检测和临床应用第46页3.普通病人结果在排除检测方法引发误差后，上升或下降25％都有临床价值。对于测定结果尤其异常标本必须复查，以防测定误差。4.因为肿瘤标志物测定其临床意义特殊性，必须加强与临床交流和沟通当改变肿瘤标志物检测方法和试剂时，必须通知临床，不然会影响结果判断。

肿瘤标志物的检测和临床应用第47页5．必须知道肿瘤标志物半寿期（手术后降到二分之一所需时间)，这有助解释一些肿瘤标志物，如AFP和hCG浓度改变，对于临床疗效判断有主要意义。肿瘤标志物的检测和临床应用第48页主要肿瘤标志物经手术后半寿期

肿瘤标志物

半寿期

参考范围CEA3～4天＜10ng/mLCA19-98.5天<37UmlAFP4～5天<10.9ng/mLPSA2.3～3.2天<4ng/mLHCG12～20小时<2.9mIU/mLCA15-38～15天<28U/mlCA1254.8天<35U/mlSCC20分<1.5μg/LCYFRA21-14天<3.3ng/mL

肿瘤标志物的检测和临床应用第49页引发假阴性主要原因是:产生肿瘤标志物肿瘤细胞数目少细胞或细胞表面被封闭机体体液中一些抗体与肿瘤标志(肿瘤抗原)形成免疫复合物肿瘤组织本身血循环差,其所产生肿瘤标志物不能分泌到外周血中。血标本采集,贮存不妥也会影响肿瘤标志物测定结果肿瘤标志物的检测和临床应用第50页引发假阳性主要原因是:良性疾病时,如一些炎症性疾病使一些肿瘤标志物表示增加。一些生理改变,如妊娠和月经时,AFP、CAl25.HCG会升高。与本身免疫性疾病相关(如红斑狼疮、白塞氏病、肾小球肾炎等),当这些疾病加重时,肿瘤标志物多呈阳性反应。在肿瘤手术治疗、化疗和放疗过程中,因为肿瘤组织受到破坏或肿瘤坏死时,也会使一些肿瘤标志物产生增加,从而影响肿瘤标志物测定,造成假阳性。肿瘤标志物的检测和临床应用第51页五、TM临床应用1.普查：迄今为止还没有一个理想TM，所以使TM用于普查受到限制。2.定位:TM基本上不能对肿瘤进行定位，因为绝大多数TM都无器官特异性，只有极少数TM如PSA.PAP含有器官特异性，但这些指标却又不具备肿瘤特异性。3.确诊：任何一个TM都存在假阳性和假阴性问题，所以单凭TM测定值通常不能对肿瘤进行确诊。肿瘤标志物的检测和临床应用第52页4.分期:大多数TM与疾病分期相关，且浓度与肿瘤大小或分期相关系。如结肠癌CEA浓度与肿瘤大小相关、几乎全部TM在肿瘤晚期时均展现较高浓度。但这是总体而言，因为各期TM浓度范围很广，且相互重合，所以并不能依据个体测定值来判断肿瘤大小，也不能以TM浓度来准确地指示各期肿瘤。肿瘤标志物的检测和临床应用第53页注意：1)如化疗、放疗或手术后马上测定TM浓度，可能会有短暂升高，这是因为肿瘤细胞坏死所致。2)化疗、放疗或手术后TM浓度连续恒定升高，可能表示治疗无效，应尽可能改用其它治疗方法。肿瘤标志物的检测和临床应用第54页6.预后:有些TM对特定肿瘤含有预后价值,如术前TM浓度增加,术后浓度减低,则可能预后很好,尤其是在病程监测中,TM浓度增加或降低与疾病预后亲密相关。肿瘤标志物的检测和临床应用第55页7.预测:TM另一主要特征就是预测价值,其依据是Bayes法则，可用阳性预测值（PPV)和阴性预测值(NPV)来表示。某一TM灵敏度、特异性、PPV和NPV不是固定不变，而是依赖于选定临界值。将临界值提升可增加特异性，但灵敏度随之下降；反之，将临界值降低，则灵敏度提升，但特异性又下降。肿瘤标志物的检测和临床应用第56页

肿瘤标志物检测目标是要到达肿瘤早期诊疗,早期治疗,所以,希望找到特异性强,敏感性高肿瘤标志物。肿瘤标志物联合应用有利于提升检测敏感性。六、肿瘤标志物联合应用肿瘤标志物的检测和临床应用第57页

一个肿瘤可分泌各种肿瘤标志物,而不一样肿瘤或同种肿瘤不一样组织类型可有相同肿瘤标志物,而且在不一样肿瘤患者体内,肿瘤标志物质和量改变也较大。所以,单独检测一个肿瘤标志物,可能会因为测定方法灵敏度不够而出现假阴性,联合检测各种肿瘤标志物有利于提升检出阳性率。为此,选择一些特异性较高,能够互补肿瘤标志物联合测定,对提升肿瘤检出率是有价值。肿瘤标志物的检测和临床应用第58页肿瘤标识物现实:肿瘤标识物非常之多单个标识物敏感性或特异性偏低，不能满足临床要求。理论上和实践上都提倡一次同时测定各种标识物，以提升敏感性和特异性。肿瘤标志物的检测和临床应用第59页为何重视肿瘤标志物联合监测敏感性和特异性限制,对早期肿瘤检出阳性率较低单一选取一个肿瘤标志物对肿瘤进行诊疗、监测是不够一个肿瘤常可能产生各种肿瘤标志物联合检测数种肿瘤标志物有可能取长补短,提升诊疗水平肿瘤标志物的检测和临床应用第60页肿瘤标识物联合应用关键点

灵敏度与特异性关系假阴性与假阳性关系肿瘤标识物与患者个体差异和与患者临床详细情况关系肿瘤标识物分析要结合临床情况肿瘤标识物不是肿瘤确诊唯一依据,肿瘤确诊是一定要有组织或细胞病理学诊疗依据。肿瘤标志物的检测和临床应用第61页

惯用肿瘤标志物联合检测临床应用肿瘤

首选标志物补充标志物

肺癌CEA、NSE、CYFRA21-1TPA、SCC.ACTH、降钙素、TSA肝癌AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CEACA549、hCG、降钙素、铁蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA242前列腺癌PSA、f-PSAPAP结肠直肠癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA19-9睾丸肿瘤AFP、hCG宫颈癌SCCCA125、CEA、TPA膀胱癌

无TPA、CEA骨髓瘤

本-周蛋白、β2-M

肿瘤标志物的检测和临床应用第62页肿瘤标志物的检测和临床应用第63页七.TM测定合理应用及注意事项1.动态统计TM浓度改变:

TM测定临床价值主要在于动态观察,有时候即使在参考范围内浓度改变,可能也是有价值。2.定时测定TM浓度:

应依据不一样患者、不一样肿瘤制订不一样测定时间表。肿瘤标志物的检测和临床应用第64页普通标准：

治疗前：应测定每个病人TM原始值;

治疗后第1年至第2年：应每个月测定;TM浓度显著下降后：每三个月测定一次;

第3年至第5年：每年测定1－2次;

第6年起：每年一次;

另外，每次改变治疗方案、TM浓度增加或怀疑复发和转移时，均应及时测定TM浓度。肿瘤标志物的检测和临床应用第65页3.合理选取TM:

同一肿瘤可能含有一个或各种TM,而不一样或同种肿瘤不一样组织类型既可有共同TM,也可有不一样TM。4.TM组合测定:合理组合将有利于提升检测灵敏度,但常造成特异性下降,所以,TM组合测定应同时考虑灵敏度和特异性。肿瘤标志物的检测和临床应用第66页TM检测与临床诊疗肿瘤标志物的检测和临床应用第67页治疗0123456月

病人基础测定值改变,对于结果分析极有价值。故应监测病人治疗前、治疗中和治疗后各个阶段肿瘤标志物含量改变,最好画一张肿瘤标志物含量改变曲线图,方便综合分析。肿瘤标志物的检测和临床应用第68页Theend谢谢大家肿瘤标志物的检测和临床应用第69页肿瘤标志物的检测和临床应用第70页八.肿瘤标志物临床价值评价1.灵敏度或敏感性（SE)：

是指该指标真阳性率或阳性率，或是指肿瘤患者TM阳性率；灵敏度＝真阳性数／真阳性数＋假阴性数×100％

＝真阳性数／被检病人总数×100％

如：在100例肿瘤病人中检测结果70例病人为阳性，则其灵敏度为70／100，即70％，其中30例为假阴性。肿瘤标志物的检测和临床应用第71页2.特异性（SP)：

是指该指标真阴性率或阴性率，或是指非肿瘤患者TM阴性率；特异性＝真阴性数／真阴性数＋假阳性数×100％

＝真阴性数／对照组总数×100％

如：对100例对照人群进行检测，结果发觉97例为阴性，则其特异性为97／100，即97％，其中97例为真阴性，3例为假阳性。

特异性往往伴随选择不一样对照组而不一样。肿瘤标志物的检测和临床应用第72页3.有效性(efficiency)或称准确度

指是该项指标在全部测定人群中真阳性与真阴性之和所占全部测定人数比率。反应该TM能准确区分肿瘤与非肿瘤患者能力.

准确度=真阳性数+真阴性数/测定总人数肿瘤标志物的检测和临床应用第73页4.阳性预测值（positivepredictivevalue,PPV)：

是指TM阳性时该患者患肿瘤可能性有多大；

阳性预测值（PPV)＝真阳性数／真阳性数＋对照组假阳性数×100％

如：在对100例病人检测中，70例为阳性结果，而在对100例对照人群检测中，5例为阳性结果，则其PPV为70／（70＋5)×100％，即为93.3％。肿瘤标志物的检测和临床应用第74页5.阴性预测值（negativepredictivevalue,NPV)：

是指TM阴性时不患肿瘤可能性有多大.

阴性预测值（NPV)＝真阴性数／真阴性数＋肿瘤组假阴性数×100％

如：在对100例对照组人群中，98例为阴性，对100例肿瘤病人检测中30例为假阴性结果，，则其NPV值为98／（98＋30)×100％，即76.6％。肿瘤标志物的检测和临床应用第75页6.阳性似然比（positivelikelihoodratio)

指该TM真阳性率与假阳性率之比，反应其正确判断阳性可能性是错误判断阳性可能性倍数，应该越大越好。7.阴性似然比(negativelikelihoodratio)

指该TM假阳性率与真阳性率之比，反应其错判阴性可能性是正确判断阴性可能性倍数，应该越小越好。肿瘤标志物的检测和临床应用第76页由此可见，PPV(阳性预测值)与灵敏度类似;NPV(阴性预测值)与特异性类似;不一样是在PPV和NPV指标中包含了各自对照组人群中数据，所以更客观反应了试验可信程度。PPV与NPV不但与SE和SP相关，还与人群患病率相关;

某一TMSE、SP、PPV、NPV不是固定不变，而是依赖于选定临界值;肿瘤标志物的检测和临床应用第77页8.正常值制订和临界值特征曲线(ROC)应用

正常参考值：来自于一组对照人群均值并考虑到其标准差。

临界值：依据客观标准确诊为病人和正常对照组二组人群所确定。肿瘤标志物的检测和临床应用第78页九、临床惯用TM临床意义1．甲胎蛋白（AFP)

AFP是早期诊疗原发性肝癌最敏感、最特异指标，适合用于大规模普查。2.癌胚抗原（CEA)CEA是一个主要肿瘤相关抗原，70-90%结肠腺癌患者CEA高度阳性，在其它恶性肿瘤中阳性率次序为胃癌（60-90％)、胰腺癌（70-80％)、小肠腺癌（60-83％)、肺癌（56-80％)、肝癌（62-75％)、乳腺癌（40-68％)、泌尿系统肿瘤（31-46％)。肿瘤标志物的检测和临床应用第79页3.糖类抗原125(CA125)CA125是卵巢癌和子宫内膜癌首选标志物，迄今为止是用于卵巢癌早期诊疗、疗效观察、预后判断、监测复发及转移最主要指标。CA125升高也可见于各种妇科良性疾病，如卵巢囊肿、子宫内膜病、宫颈炎及子宫肌瘤,

胃肠道癌、肝硬化、肝炎等也有不一样程度升高。

肿瘤标志物的检测和临床应用第80页4.糖类抗原153(CA153)CA15-3是乳腺癌最主要特异性标志物。30%-50%乳腺癌患者CA15-3显著升高，是乳腺癌患者诊疗和监测术后复发、观察疗效最正确指标。CA15-3动态测定有利于II期和III期乳腺癌病人治疗后复发早期发觉。

肺癌、胃肠癌、卵巢癌及宫颈癌患者血清CA15-3也可升高。

肿瘤标志物的检测和临床应用第81页5.糖类抗原199（CA199)CA19-9是胰腺癌，胃癌，结、直肠癌、胆囊癌相关标志物，是至今报道对胰腺癌敏感性最高标志物。CA19-9测定有利于胰腺癌判别诊疗和病情监测。肿瘤切除后CA19-9浓度会下降，如再上升，则可表示复发。胃癌、结直肠癌、胆囊癌、胆管癌、肝癌阳性率也会很高。

胃肠道和肝各种良性和炎症病变，如胰腺炎、轻微胆汁郁积和黄疸，CA19-9浓度也可增高，但往往呈“一过性”，必须加以判别。

肿瘤标志物的检测和临床应用第82页6.糖类抗原724（CA724)CA72-4是当前诊疗胃癌最正确肿瘤标志物之一，对胃癌含有较高特异性，其敏感性可达28-80%，CA72-4水平在术后可快速下降至正常。在70%复发病例中，CA72-4浓度首先升高。与其它标志物相比，CA72-4最主要优势是其对良性病变判别诊疗有极高特异性，在众多良性胃病患者中，其检出率仅0.7％。

CA72-4对其它胃肠道癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌也有不一样程度检出率。CA72-4与CA125联合检测，作为诊疗原发性及复发性卵巢肿瘤标志，特异性可达100%。

肿瘤标志物的检测和临床应用第83页7.糖类抗原50（CA50)CA50因其广泛存在胰腺、胆囊、肝、胃、结直肠、膀胱、子宫，它肿瘤识别谱比CA199广，所以它又是一个普遍肿瘤标志相关抗原。CA50在各种恶性肿瘤中可检出不一样阳性率，对胰腺癌和胆囊癌阳性检出率居首位，占94.4%；其它依次为肝癌（88%)、卵巢与子宫癌(88%)和恶性胸水（80%)等。

有报导萎缩性胃炎患者胃液CA50浓度与正常人比较有显著改变。通常认为萎缩性胃炎是癌前高危期，所以CA50可作为癌前诊疗指标之一。在胰腺炎、结肠炎和肺炎发病时，CA50也会升高，但随炎症消除而下降。肿瘤标志物的检测和临床应用第84页8.糖类抗原242（CA242)CA242是一个新肿瘤相关抗原，当消化道发生肿瘤时，其含量升高。对胰腺癌、结直肠癌有较高敏感性与特异性，分别有86％和62％阳性检出率，对肺癌、乳腺癌也有一定阳性检出率。用于胰腺癌和良性肝胆疾病判别诊疗及预后，也用于结直肠癌病人术前预后及复发判别。

肿瘤标志物的检测和临床应用第85页9.非小细胞肺癌相关抗原（CYFRA21-1)CYFRA21-1是非小细胞肺癌最有价值血清肿瘤标志物，尤其对鳞状细胞癌患者早期诊疗、疗效观察、预后监测有主要意义。CYFRA21-1也可用于监测横纹肌浸润性膀胱癌病程，尤其是对预计膀胱癌复发含有较大价值。假如肿瘤治疗效果好，CYFRA21-1水平会很快下降或恢复到正常水平，在疾病发展过程中，CYFRA21-1值改变经常早于临床症状和影像检验。

肿瘤标志物的检测和临床应用第86页10.小细胞肺癌相关抗原（神经元特异性烯醇化酶，NSE)NSE被认为是监测小细胞肺癌首选标志物，60-80%小细胞肺癌患者NSE升高。在缓解期，80-96%患者NSE含量正常，如NSE升高，提醒复发。小细胞肺癌患者首轮化疗后24-72小时内，因为肿瘤细胞分解，NSE呈一过性升高。所以，NSE是监测小细胞肺癌疗效与病程有效标志物，并能提供有价值预后信息。

NSE也可作为神经母细胞瘤标志物，对该病早期诊疗含有较高临床应用价值。血清NSE水平测定对于神经母细胞瘤监测疗效和预报复发均含有主要参考价值，比测定尿液中儿茶酚胺代谢物更有意义。

对胺前体摄取脱羧细胞瘤、精原细胞瘤及其它脑肿瘤诊疗也有主要意义。

肿瘤标志物的检测和临床应用第87页11.鳞状细胞癌抗原（SCC)SCC是一个特异性很好而且是最早用于诊疗鳞癌肿瘤标志物。SCC在正常鳞状上皮细胞中抑制细胞调亡和参加鳞状上皮层分化，在肿瘤细胞中参加肿瘤生长，它有利于全部鳞状上