2026年度肿瘤生物学与表观遗传学实验室安全考试试题（附答案）

2026年度肿瘤生物学与表观遗传学实验室安全考试试题（附答案）一、单项选择题（共20题，每题2分，总计40分）1.依据GB19489-2008《实验室生物安全通用要求》及中国医学科学院2025年更新的《肿瘤研究实验室生物安全分级目录》，涉及人源肺癌类器官原代分离、EB病毒转化B淋巴细胞系培养的操作，必须在哪一级生物安全实验室开展？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-42.肿瘤表观遗传学实验常用的甲基化抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-Aza-dC）经2025年OECD化学品毒性分类确认为2类生殖细胞致突变物，其储存要求是？A.与普通试剂存放于4℃试剂架，无特殊防护要求B.密封后存放于-20℃防爆冰箱的毒性化学品专柜，双人双锁管理C.存放于室温普通药品柜，与酶类试剂相邻摆放D.存放于37℃孵箱旁试剂架，随取随用3.开展染色质免疫共沉淀（ChIP）实验使用37%甲醛溶液交联细胞时，若发生少量甲醛泼洒至实验台表面，正确的应急处置顺序是？A.立即用大量清水冲洗台面，开窗通风B.佩戴丁腈手套、N95口罩，用浸润10%氨水的吸水棉覆盖污染区域30分钟后，再用75%乙醇擦拭清洁C.直接用75%乙醇喷洒擦拭，覆盖吸附纸后丢弃至生活垃圾桶D.撒上固体碳酸氢钠覆盖10分钟后清扫干净4.肿瘤样本库储存的患者来源异种移植瘤（PDX）组织块、临床手术切除的新鲜肿瘤标本，属于哪类感染性废物？A.损伤性废物B.病理性废物C.化学性废物D.药物性废物5.下列关于CRISPR-Cas9表观编辑实验中慢病毒载体操作的安全要求，错误的是？A.慢病毒包装、转染操作必须在BSL-2级生物安全柜内进行，操作前开启紫外灯消毒30分钟，操作时关闭前窗至安全高度B.接触过快病毒的枪头、培养板、离心管需经1000mg/L有效氯溶液浸泡30分钟后方可移出安全柜C.慢病毒废液经121℃高压灭菌20分钟后，可直接排入实验室下水管道D.进行慢病毒离心操作时，必须使用带密封盖的转头或安全离心杯，待离心停止10分钟后再取出开盖6.表观遗传学测序实验常用的变性聚丙烯酰胺凝胶制备试剂中，属于剧毒化学品、需严格执行公安部门剧毒化学品“五双”管理制度的是？A.丙烯酰胺单体B.甲叉双丙烯酰胺C.TEMED（四甲基乙二胺）D.过硫酸铵7.开展循环肿瘤DNA（ctDNA）提取实验时，若操作过程中临床血浆标本发生气溶胶溢洒，导致生物安全柜内表面污染，处置时使用的含氯消毒剂有效氯浓度应为？A.250mg/LB.500mg/LC.1000mg/LD.20000mg/L8.肿瘤生物学实验常用的组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂曲古抑菌素A（TSA）属于神经毒性化学品，若发生皮肤接触暴露，首要处置措施是？A.立即用大量流动清水冲洗接触部位15分钟以上，脱去污染的实验服，必要时就医B.立即用0.5%碘伏擦拭接触部位消毒C.涂抹抗过敏药膏后继续实验D.用75%乙醇擦拭接触部位2分钟9.下列关于实验室-80℃超低温冰箱储存肿瘤样本、表观修饰酶试剂的安全要求，正确的是？A.为充分利用空间，可将样本盒堆叠至冰箱门体内侧，无需留通风间隙B.存取样本时必须佩戴防寒手套，操作时间控制在1分钟以内，避免冰箱门长时间开启导致结霜、温度波动C.冰箱内可临时存放过夜的实验用饮料、食品，待实验结束后带出D.超低温冰箱故障导致样本融化时，可直接将融化的临床样本、细胞系丢弃至普通医疗废物桶10.开展小鼠荷瘤实验（PDX模型构建、皮下成瘤实验）时，实验动物伦理审查要求及生物安全防护要求不包括？A.所有动物实验方案需经单位实验动物伦理委员会（IACUC）审批通过后方可开展，肿瘤体积不得超过2000mm³、动物体重下降不得超过初始体重的20%B.进入动物实验室需更换专用隔离服、佩戴N95口罩、双层手套，接触荷瘤小鼠后需及时消毒手套表面C.荷瘤小鼠的尸体、垫料、组织样本需经121℃高压灭菌30分钟后，交由有资质的医疗废物处置单位统一处理D.实验结束后剩余的肿瘤细胞悬液可直接冲入动物房下水道11.亚硫酸氢盐测序（BSP）实验中使用的亚硫酸氢钠属于强腐蚀性、刺激性化学品，配置饱和亚硫酸氢钠溶液时，必须佩戴的防护装备不包括？A.防化学飞溅护目镜B.耐酸碱丁腈手套C.防毒面具（配酸性气体滤盒）D.普通一次性PE手套12.实验室涉及肿瘤相关的病原微生物（如高危型HPV16/18阳性细胞系、幽门螺杆菌、EB病毒）操作时，若发生职业暴露（如被污染的针头刺破手指），下列处置流程错误的是？A.立即停止操作，从伤口近心端向远心端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，禁止局部按压B.用肥皂水和流动清水冲洗伤口5分钟，再用0.5%碘伏或75%乙醇消毒伤口并包扎C.立即向实验室安全负责人、单位生物安全管理部门报告，填写职业暴露登记表，根据暴露源风险评估结果进行阻断治疗、定期随访D.伤口简单消毒后继续完成实验，待实验结束后再上报13.表观遗传实验中常用的ChIP级蛋白酶K、RNaseA试剂，若发生误服，下列处置方式正确的是？A.立即催吐，饮用大量清水稀释，携带化学品安全技术说明书（MSDS）就医B.服用碱性药物中和C.无需处理，等待自行代谢D.饮用高浓度白酒消毒14.实验室使用二氧化碳培养箱培养肿瘤细胞系时，下列安全操作错误的是？A.培养箱需定期用75%乙醇擦拭内壁，更换无菌水时添加0.02%的叠氮钠抑制真菌生长B.二氧化碳钢瓶需固定在专用支架上，安装防回火装置，压力降至0.5MPa时及时更换C.发现培养箱内细胞发生支原体、真菌污染时，立即将污染的培养瓶拧紧，经高压灭菌后丢弃，对培养箱进行彻底消毒D.可将装有肿瘤细胞的培养瓶暂时放在培养箱门口，方便第二天取用15.肿瘤单细胞表观组测序实验中使用的微流控芯片配套油相试剂含有氟代烃类有机溶剂，其废弃处理方式正确的是？A.直接倒入下水道B.收集至专用有机废液桶，标注废液成分、产生日期、负责人，定期交由有资质的危废处置单位处理C.倒入普通医疗废物袋，与枪头一起丢弃D.敞口放置在实验台，待其自然挥发16.下列关于实验室高压灭菌锅使用的安全要求，错误的是？A.高压灭菌前需检查灭菌锅水位、密封圈状态，排除冷空气后方可升温，灭菌参数为121℃、103.4kPa、维持20-30分钟B.装有肿瘤组织、慢病毒废液、细胞培养废物的灭菌袋需松散放置，装载量不超过灭菌腔容积的80%C.灭菌结束后待压力降至0MPa、温度降至80℃以下时，方可缓慢开盖，佩戴隔热手套取物D.为提高效率，可将待灭菌的丙烯酰胺凝胶、5-Aza-dC试剂与细胞废物一起高压灭菌17.实验室电泳实验使用的溴化乙锭（EB）替代物（如GelRed、GoldView）虽然毒性低于EB，但仍属于潜在诱变剂，其污染区域的正确处理方式是？A.直接用拖把拖擦地面B.用干燥纸巾擦拭后丢弃至生活垃圾C.佩戴手套，用吸附材料收集污染废弃物，用专用脱色摇床清洗污染区器具，所有接触过染料的耗材统一收集至诱变剂废物桶D.喷洒75%乙醇后自然晾干18.开展肿瘤干细胞球培养、表观重编程实验时，使用的基质胶（Matrigel）来源于小鼠EHS肉瘤，下列操作要求正确的是？A.基质胶可在4℃冰箱长期存放，无需关注有效期B.操作基质胶时必须在冰上进行，使用预冷的枪头、培养板，避免胶提前凝固，接触过基质胶的耗材需经消毒后按生物废物处理C.剩余的基质胶可倒回原储存管反复冻融使用D.基质胶溅到皮肤表面无需处理，其自然干燥后擦除即可19.实验室消防器材配置要求中，针对涉及易燃有机试剂（如甲醇、乙醇、异丙醇，用于RNA提取、组蛋白提取实验）的实验区域，必须配置的灭火器类型是？A.清水灭火器B.二氧化碳灭火器或干粉灭火器C.泡沫灭火器D.以上都可以20.依据《实验室生物安全管理条例》，下列哪类人员无需经过专项安全培训、考核合格后方可进入BSL-2级肿瘤生物学实验室开展实验？A.新入学的博士研究生B.进修人员、访问学者C.经过授权的设备维修人员、保洁人员D.持有执业医师证的临床医生（无实验室生物安全培训合格证）二、多项选择题（共10题，每题3分，总计30分，多选、少选、错选均不得分）1.肿瘤表观遗传学实验中常见的物理性危害因素包括？A.超低温样本储存导致的冻伤B.高速离心机、超声破碎仪（ChIP实验用）运行时产生的噪声、气溶胶风险C.紫外透射仪（凝胶成像用）导致的紫外线眼损伤、皮肤灼伤D.高压灭菌锅、干式恒温器导致的高温烫伤2.下列属于肿瘤实验室2类生物危害材料的有？A.HeLa细胞系、HepG2细胞系等常见人源肿瘤细胞系B.临床来源的新鲜肿瘤穿刺样本、手术切除标本C.携带致癌基因的慢病毒、腺相关病毒（AAV）载体D.商品化的重组组蛋白、纯化DNA聚合酶3.下列关于实验室化学品储存的要求，正确的有？A.强氧化性试剂（如过硫酸铵、高锰酸钾）需与还原性试剂、有机试剂分开存放，远离热源B.挥发性强酸（浓盐酸、浓硝酸）需存放于耐腐蚀的酸性试剂柜，配备防溢托盘C.易燃试剂（甲醇、乙醇、丙酮）存放量不得超过实验室3天使用量，远离明火、电源开关D.蛋白酶K、限制性内切酶等酶类试剂需与毒性化学品存放在同一层冰箱，方便取用4.开展ChIP-seq、ATAC-seq等高通量测序表观实验时，防范气溶胶污染的有效措施包括？A.核酸提取、PCR扩增、文库构建区域物理分隔，专用移液器、耗材，避免交叉污染B.涡旋振荡样本后静置10秒再开盖，开盖时动作缓慢，避免液体飞溅C.生物安全柜、超净台内定期使用核酸去除剂擦拭，操作前后开启紫外灯照射30分钟D.为提高效率，可在同一超净台内同时处理多个不同患者的肿瘤样本5.肿瘤实验室生物安全柜的使用规范，正确的有？A.安全柜内物品摆放遵循“洁污分流”原则，清洁区（试剂、培养基）放在左侧，污染区（样本、废弃耗材）放在右侧，物品不得遮挡回风口B.操作时手臂垂直缓慢进出安全柜，避免频繁移动、快速挥动手臂导致气流紊乱C.安全柜内可放置酒精灯，利用火焰灼烧灭菌接种环、培养瓶口D.安全柜每年需由有资质的第三方机构进行风速、气流完整性、高效过滤器（HEPA）检漏检测，合格后方可继续使用6.下列实验操作中，必须在通风橱内进行的有？A.配置37%甲醛交联液、使用Trizol提取总RNA（含苯酚、异硫氰酸胍）B.配置亚硫酸氢钠转化液、使用浓盐酸调整试剂pH值C.称取丙烯酰胺单体粉末、配置聚丙烯酰胺凝胶储液D.向细胞培养瓶内添加完全培养基、观察细胞状态7.肿瘤样本库的安全管理要求，正确的有？A.所有入库的临床肿瘤样本、PDX模型样本必须标注样本编号、病理类型、冻存日期、存储位置，建立电子台账，做到账物相符B.样本库需配备双供电系统、温度实时监控报警装置，超低温冰箱温度异常时第一时间向管理员发送警报C.废弃的临床样本需经高压灭菌或化学固定后，按病理性废物处置，严禁随意丢弃D.研究人员可直接将自己收集的肿瘤样本带出实验室，用于合作研究，无需审批8.实验室锐器（针头、玻璃吸管、载玻片、手术刀片）的使用与处置要求，正确的有？A.尽量使用安全型针头、一次性塑料耗材，减少锐器使用，禁止用手直接接触破碎的玻璃器皿B.使用后的锐器直接丢弃至专用硬质锐器盒，锐器盒装载量不超过3/4时密封更换，标注产生科室、日期C.可将使用后的针头回套针帽，避免扎伤他人D.解剖荷瘤小鼠、处理肿瘤组织时，必须佩戴加厚乳胶手套，使用镊子夹持刀片、缝合针，严禁徒手操作9.下列关于实验室危险废物处置的要求，正确的有？A.化学废液需按有机废液、酸性废液、碱性废液、含重金属废液分类收集，严禁混合存放，废液桶张贴规范的危险废物标签B.生物废物（细胞培养物、肿瘤组织、微生物污染物）需经高压灭菌或有效消毒后，装入黄色医疗废物袋，交由有资质的单位集中处置C.废弃的实验动物尸体、组织需装入专用密封袋，标注信息后存放于-20℃动物尸体暂存冰箱，定期统一清运D.空的化学试剂瓶经过简单冲洗后，可作为生活垃圾丢弃10.实验室突发安全事件的上报与处置要求，正确的有？A.发生火灾、化学品泄漏、生物安全事件时，第一时间疏散无关人员，立即向实验室主任、单位安全管理部门报告，不得隐瞒B.发生火灾时，若火势较小（如酒精灯倾倒燃烧），可使用湿抹布覆盖灭火，若火势较大，立即沿消防通道撤离，拨打119报警C.发生有毒化学品泄漏时，人员需向上风向撤离，佩戴防护装备后方可进入污染区处置D.实验过程中发生小范围样本溢洒，可自行处置，无需记录和上报三、判断题（共10题，每题1分，总计10分）1.BSL-2级实验室的入口处必须张贴生物安全危害标识、实验室负责人联系方式、应急电话，无关人员未经许可严禁进入。（）2.实验过程中佩戴的一次性丁腈手套破损时，可在外面套一层新的手套继续操作，无需更换。（）3.5-氮杂胞苷、组蛋白去甲基化酶抑制剂等表观遗传药物多具有细胞毒性、致突变性，配置母液时需在通风橱内操作，避免吸入粉末、皮肤接触。（）4.超净台与生物安全柜功能一致，都可以用于慢病毒包装、临床肿瘤样本处理等操作。（）5.长期接触超声破碎仪、高速离心机产生的噪声不会对实验人员听力造成损伤，无需佩戴防噪声耳塞。（）6.储存于-80℃冰箱的肿瘤样本取出后，可直接放入37℃水浴融化，融化后的样本可以反复冻融，不影响后续表观修饰检测结果，也无生物安全风险。（）7.实验室的MSDS（化学品安全技术说明书）必须放置在方便取用的位置，所有实验人员需熟悉常用化学品的危害特性、应急处置方法。（）8.处理肿瘤细胞、临床样本时，为方便操作可将实验服袖口挽起，无需完全遮盖手臂皮肤。（）9.进行裸鼠荷瘤实验时，因为裸鼠存在免疫缺陷，不会携带病原体，所以无需在SPF级动物房开展操作。（）10.每日实验结束后，必须关闭实验区域电源、水源、气源，检查无安全隐患后方可离开实验室。（）四、简答题（共2题，每题10分，总计20分）1.某实验室开展人结直肠癌组织原代细胞分离、DNA甲基化测序实验时，一名实验人员在向EP管分装37%甲醛溶液时不慎将整管甲醛碰倒，约10mL甲醛泼洒在右手手套及实验台表面，且部分甲醛溶液流入放置在台面上的临床结直肠癌样本管架，导致1管肿瘤组织悬液倾倒在台面上。请结合肿瘤生物学与表观遗传学实验室安全规范，写出完整的应急处置流程。2.请简述BSL-2级肿瘤生物学与表观遗传学实验室开展日常实验时，个人防护装备（PPE）的穿戴要求及不同实验场景下的防护差异。参考答案一、单项选择题1.B2.B3.B4.B5.C6.A7.D8.A9.B10.D11.D12.D13.A14.D15.B16.D17.C18.B19.B20.D二、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABC4.ABC5.ABD6.ABC7.ABC8.ABD9.ABC10.ABC三、判断题1.√2.×3.√4.×5.×6.×7.√8.×9.×10.√四、简答题1.应急处置流程如下：（1）立即停止操作，第一时间告知同实验室所有人员停止手头工作，疏散至实验室门外，打开实验室通风系统及通风橱，关闭该区域空调，避免甲醛蒸气扩散至其他区域；（2）个人暴露处置：立即脱去被污染的外层丁腈手套，若皮肤有接触，用大量流动清水冲洗右手接触部位15分钟以上，更换干净手套后再进行后续处置，若出现眼部刺激、咳嗽、头晕等症状，立即前往通风处休息，必要时就医；（3）污染区域处置：佩戴N95口罩（配有机蒸气滤盒）、护目镜、双层加厚丁腈手套，用干纱布或吸水棉先覆盖倾倒的肿瘤组织悬液区域，倾倒20000mg/L的高浓度含氯消毒剂作用30分钟，对溢出的生物样本彻底灭活；再用浸润10%氨水的吸水棉覆盖甲醛污染区域，静置30分钟，使甲醛与氨水充分反应生成低毒的六亚甲基四胺，期间禁止无关人员进入；（4）废物处置：所有接触过污染区域的吸水棉、纱布、破损EP管、一次性手套全部放入黄色医疗废物袋，密封后标注“生物毒性污染废物”，经121℃高压灭菌后交由危废处置单位处理；实验台表面依次用2000mg/L含氯消毒剂、75%乙醇、清水反复擦拭3次；（5）后续排查：通风30分钟后使用甲醛浓度检测仪检测区域内甲醛浓度低于0.1mg/m³的安全阈值后方可恢复实验；确认剩余临床样本的标签、管盖完整性，若样本管外部被污染，用75%乙醇擦拭表面后转移至干净管架；（6）事件上报：24小时内向实验室安全负责人提交事件报告，记录溢洒原因、