《液质联用仪操作规范》条款解析

SOP·仪器操作培训液质联用仪操作规范条款解析开机·关机·维护·质控·故障汇报时间：2026CONTENTS课程导览01规范总览与开机流程建立操作规范整体认知02关机流程与液相维护掌握关机顺序与液相维护要点03质谱维护与数据质量掌握质谱维护周期与质控要求04常见故障与应急处理建立故障识别与排查能力规范总览与开机流程规范是操作的底线01条款解析规范框架与仪器构成液相色谱负责分离，质谱负责检测液质联用仪工作原理样品检测流程色谱分离样品经色谱分离离子化分离后组分离子化质荷比分离质量分析器分离质谱图得到检测结果五大构成01进样系统密封性好、死体积小、重复性好02液相色谱柱柱效高、选择性好03离子源常用大气压电离源04质量分析系统四极杆、离子阱或飞行时间型，关注分辨率、质量准确性与线性范围05真空系统机械泵与高真空泵组合，决定背景噪音与灵敏度液质联用仪操作规范培训04/30条款解析环境与安全基本要求温湿度温度

20-30℃、相对湿度低于

70%；部分规程收紧为15-25℃，且温度变化不超过

3℃，仪器表面不得有冷凝水。环境清洁无尘、无腐蚀性气体，避免震动、阳光直射及强磁场、强电场干扰。开机前先开启空调并设定温度，保持运行

4-8小时后再开机。安全红线壹液氮罐运输只能立放并用皮带固定贰维修前必须先切断电源叁压力容器必须固定防止翻倒肆定期检查真空泵泵油和供气系统压力液质联用仪操作规范培训05/30开机前核查气体与真空准备气源门槛GASSUPPLY氮气高纯（>99%）690±140kPa氦气超高纯（>99.995%）135±70kPa培训常用·液氮罐供气罐体输出

0.7MPa，氮气输出

0.15MPa，最大不超过

0.2MPa真空判据convectron0.9–1.1Torr压力维持离子规约1.0–1.5×10⁻⁵Torr压力过滤与阀门所有气体经分子筛过滤，去除水分与油雾开机前逐一检查气路阀门处于打开状态液质联用仪操作规范培训06/30配液规范溶剂与流动相准备01溶剂等级有机相与水相有机相限甲醇、乙腈、异丙醇，均须HPLC级水相用超纯水配后超声脱气10–15分钟≥18.2超纯水电阻率单位MΩ·cm02盐类边界挥发性盐使用电喷雾离子化禁用非挥发性盐与缓冲液避免钠盐、磷酸盐，必要时改用铵盐≤100盐溶液浓度上限单位mM03pH控制酸碱体系选择使用有机/水相体系与挥发性酸、碱含氨基样品流动相偏酸，以维持正电状态强无机酸或碱对仪器有损害pH2–5含氨基样品流动相偏酸范围液质联用仪操作规范培训07/30条款解析硬件与泵油检查毛细管与进样连接1检查石英或金属毛细管的切口与位置2校正：直接连接柱塞泵3调谐或做样：LC或注射泵进样机械泵泵油1油位须在最小与最大刻度之间2油色应保持澄清；变黄变黑或低于下限须立即更换3每两周震气一次，排出泵内积聚气体室温维持在18-25

℃这些检查是避免开机后真空不足或泵体受损的第一道防线。液质联用仪操作规范培训08/30开机操作开机程序与抽真空等待1检查气压2开气源3开质谱主机总电源4机械泵工作5等待抽真空6开电子开关7开液相模块8开电脑软件总开关先行10小时以上总开关打开后真空泵自动开启，几分钟后涡轮分子泵启动；应先开总开关

10小时以上再开电子开关，长时间未使用更应开启过夜。停机时长抽真空时间4天以上24小时1–3天8小时0.5天1小时抽真空时长·视停机时长而定判定标准≥95%开机后观察两个涡轮泵转速，达到95%以上方可正常使用质谱短时间不用时保持总开关开启以维持真空液质联用仪操作规范培训09/30条款解析调谐与参数优化开机完成后须进行调谐校准。在Analyst软件Project工具条中选择Installation，双击HardwareConfiguration激活配置文件，再单击TuneandCalibrate进入调谐模式。三类标准物质，各管一项校准壹利血平溶液异丙醇:水=1:1浓度1.00ng/μL校正峰面积重复性与离子丰度比贰利血平标准A流动相配制浓度100pg/μL校正分辨率与信噪比叁PPG混合标准含乙酸铵甲醇水浓度10-100ng/μL校正质量准确性方法优化针泵连续进样标准溶液，逐级扫描确定MRM离子对针泵连续进样标准溶液一级质谱扫描获得母离子碎片离子扫描获得子离子确定MRM离子对作为定量依据液质联用仪操作规范培训10/30关机流程与液相维护规范关机，延长寿命02操作规程关机总顺序液质联用仪操作规范培训12/30核心原则与开机相反，先停样品，再依次处理液相、质谱与气源。壹工作站停止所有运行样品灭活HardwareConfiguration并退出软件贰冲洗液相系统质谱置standby或vent泄真空叁关闭质谱主机电源等待机械泵停稳肆关闭气源关闭液相各单元电源品牌机型通用顺序先关软件关仪器电源关计算机关液氮罐总阀或氮气发生器电源关氩气总阀关UPS电源，并清空缓冲瓶及废液瓶无特殊情况或长假，质谱仪不建议关机，保持待机可延长寿命。条款解析液相冲洗与色谱柱保存壹冲洗前提关机前必须完成液相流路冲洗，所有管路保存在甲醇中。贰含盐方法先用水过渡，再置换为甲醇以

0.4mL/min

冲洗半小时以上每条管路均须甲醇冲洗过叁色谱柱保存停止流速后取下色谱柱，两端堵头密封；任何情况下不可流过100%纯水，分析结束后保存在100%有机相，推荐甲醇或乙腈。肆含盐流动相清洗至少以

5%甲醇水溶液清洗45分钟以上，再逐步换到纯甲醇清洗；完成后关闭柱温箱或降至室温。液质联用仪操作规范培训13/30条款解析质谱放空与关机细节1关机前确认液相流速已停止，质谱进入standby，脱溶剂气温度降到

100℃以下

方可关闭氮气，并清洗离子源及离子源内腔。2放空操作软件中右击放空图标并确认yes，约

15分钟

后提示放空完成，再等

30分钟

关闭软件。3断电顺序依次关闭质谱左下角按钮→液相各模块→电脑→质谱主电源。4Vent键机型按Vent键

5秒，等待约

15-30分钟

待真空灯熄灭后关闭主机电源，再等约

15分钟

关闭机械泵电源。5收尾清空缓冲瓶与废液瓶内液体，防止废液挥发污染环境。液质联用仪操作规范培训14/30日常维护液相日常冲洗程序每批次样品分析结束后，执行三段式冲洗。01第一段高配比纯水相冲洗15分钟以上冲洗管路和色谱柱；管路盐多时，加大纯水比例、延长冲洗时间。不可用100%纯水，以免损伤色谱柱。02第二段高配比有机相冲洗15分钟以上以高配比有机相冲洗。03第三段100%有机相冲洗15分钟以上将液相系统保存在纯有机相中，推荐甲醇或乙腈。每次结束须清空水相流动相瓶，防止长菌。通常固化为分析结束后的自动冲洗流程，是保持系统稳定、避免盐结晶堵塞管路的基础。液质联用仪操作规范培训15/30操作要点色谱柱使用注意事项保存红线三条不可逾越的底线1任何情况下不可流过

100%纯水2分析结束保存在

100%有机相3拆除时两端用堵头封闭用前确认新柱先激活；确认最大耐受压力与酸碱范围。进样前过滤样品最后一步必须过

0.22μm

有机相滤膜或离心去颗粒，防止堵塞筛板。方向与拆装安装方向正确；管路脆弱，拆装须谨慎。流动相与柱温流动相须符合固定相兼容性；柱温按说明书设定，保持

±1℃

稳定。液质联用仪操作规范培训16/30条款解析流动相与样品瓶管理流动相新鲜度含缓冲盐流动相：现配现用，放置不超过

48小时水相：每天更换，夏季尤其防长菌添加剂选择禁用无机酸、碱金属碱——腐蚀仪器推荐醋酸、甲酸、氨水等挥发性有机酸碱进样小瓶与瓶盖清洗：禁用洗涤剂，用超纯水或有机试剂超声震荡瓶盖不可拧得过紧，否则瓶内真空导致下一针无法准确定量密封件维护溶剂瓶：每周清洗一次；瓶口密封垫老化渗漏须及时更换进样口密封垫：每

500-1000次进样更换一次液质联用仪操作规范培训17/30质谱维护与数据质量维护保性能，质控保数据03维护保养离子源清洗频率与异常信号异常信号峰分叉基线不稳出现杂峰出现上述信号，首先考虑清洗离子源清洗频率每周一次

至少大量或过浓样品分析后应加密清洗污染后果锥孔处与离子源通道堆积污染物离子传输效率下降灵敏度下降拆洗顺序·按污染可能性排列1一级锥孔及锥孔套2离子源块3离子透镜维护边界个人维护只做离子源部分拆装涉及Q组件、离子光学系统等更深拆装，应咨询质谱仪器厂家售后，避免损坏精密部件液质联用仪操作规范培训19/30条款解析离子源清洗步骤1拆洗戴手套，按说明书拆下离子源及各部件，无尘纸蘸甲醇、异丙醇或丙酮擦洗。2超声部件置于烧杯，甲醇、异丙醇或丙酮超声

30-60分钟；污染程度决定时长，非金属部件禁用丙酮超声。3打磨污染严重时，低温烘干后用砂纸打磨表面污物及氧化物，避免过度磨损。4复洗与回装重复超声清洗，低温烘干或冷风吹干后原样装回；拆装过程逐步骤拍照，避免遗漏。清洗完成后通常需重新调谐校正。液质联用仪操作规范培训20/30条款解析雾化器与毛细管维护雾化器维护·两种强度日常冲洗90%乙腈+10%水2mL/min3分钟每批样品结束后执行，去除雾化器及切换阀内残留。离子残留多时，改用50%乙腈+50%水。深度超声外部较脏时，取下雾化器超声清洗，溶剂须能溶解样品残留。尖端不触壁；溶剂不得没过根部橡胶圈。毛细管清洗·接触禁忌毛细管推流内冲或超声清洗，枪头须蘸到尖端。柱两端与柱体不可触碰异物。液质联用仪操作规范培训21/30维护保养机械泵与锥孔维护换油周期每

4-6个月或半年一次；油位偏低时放空后倒出旧油，添入约

1升新油。不同品牌泵油不能混用。震气除杂ESI源至少每星期一次，APCI源每天一次，保证毛细管洁净。锥孔清洗甲醇:水:甲酸（45:45:10）超声

10分钟，再分别用超纯水和甲醇各超声10分钟，晾干后安装。日常检查每月查质谱液路图，漏液较多及时处理；每次分析后查废液桶，液体积较多及时倾倒。液质联用仪操作规范培训22/30条款解析环境要求与流速控制环境硬指标壹温度

15-25℃，变化小于

3℃贰相对湿度小于

80%叁无腐蚀性气体，仪器表面无冷凝水供气与流速上限壹氮气纯度

>95%，输出压力

<0.7MPa减压阀后

0-0.4MPa贰ESI流速

≤0.5mL/minAPCI≤1.0mL/min流速过高会破坏脱溶剂效率、损伤离子源。日常巡视应对照这组参数逐项确认。液质联用仪操作规范培训23/30条款解析质控规则与质控样品四类规则各管一段校准与质控确保设备准确性与过程稳定浓度判断分析物含量是否落在合理范围分析物身份精准识别目标物，避免误判峰质量关注色谱峰形态，确保信号可靠质控样品频率20个样品/批每20个样品须含1个质控样品与1个空白样品，并定期分析质控样品进行监控。流动相新鲜度≤48小时含缓冲盐流动相：存放不超过48小时每天更换水相：每天更换，防止长菌污染引起假峰与信号漂移液质联用仪操作规范培训24/30条款解析质量轴校准与性能检测每日校准首次开机后用专用校准液校准质量轴m/z误差≤±0.2Da性能检测流动注射标准品进质谱，观察峰高、半峰宽、峰位置，快速判断响应强度、分辨率与质量准确度异常指向峰强下降→离子源污染、毛细管堵塞或真空度不足分辨率过高或质量数漂移→目标离子检测强度受影响压力基线波动≤±2%泵压力波动>1%即警惕单向阀故障液质联用仪操作规范培训25/30条款解析检测限与定量方法检测限确定路径一空白样与加标试样至少测定

20次，取净测量值标准偏差σ，最小检测限=3.29×σ路径二或以

S/N=2或3

时的浓度计定量方法·按基质复杂度递进01标准曲线法5个梯度浓度标液绘制校准曲线适用简单基质·操作简便02内标法加入内标物计算峰面