分光光度计的使用课件_第1页
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文档简介

1、分光光度计的使用、主要内容、1、分光光度计的概念2、分光光度计的结构和原理3、分光光度计的使用4、实验操作(绘制CuSO4溶液标准曲线)、分光光度计的概念、分光光度计的概念、分光光度法：利用物质吸收光谱进行物质识别及其含量测定的分析技术。也称为吸收光谱。光谱分析技术中最常见、最常用的是紫外和可见分光光度计。特性：敏感、准确、快速、容易。应用：生物化学微量物质定量分析研究中广泛使用的方法之一，多用于糖、蛋白质、核酸、酶等快速定量检测。频谱范围：200至1000nm。分光光度计的概念、红外分光光度计3360 760nm以上的红外区域可见光分光光度计3336400 760nm可视区域紫外分光光度计3

2、360200400nm紫外线区域、分光光度计分类、722E可视分光光度计、722E可视分光光度计、分光光度计的基本结构、光源、光源I、非碟形吸收杯、高光、Ir、Ia、吸收光、分光光度计的基本原理，I/i0表示光线通过溶液的程度，以t表示透射度。 - IgT表示溶液吸收光的程度，以吸光度(a)表示。即lLambert-beer-比夫定律(光吸收定律)，Lambert定律：a=k1 l beer定律：a=k2 Lambert-beer定律：单色光束垂直通过固定溶液时溶液的吸光度a等于溶液的浓度c和溶液的厚度即a=KCl其中，a-吸光度k-消光常数，受物质种类和光波长影响的c-溶液的浓度l-溶液的厚

3、度，Lambert-beer定律的应用，1，使用已知浓度基准溶液和未知浓度测量对象溶液处理颜色，测量吸光度，根据Lambert-beer定律在最大吸收波长(max)下读取每个管的吸光度，使用每个管的吸光度a作为纵坐标，浓度c作为横坐标，作为标准曲线。 稍后测量时，将测试的样品以相同的条件在max中读取吸光度，以确定该样品在标准曲线中的浓度。使用0，722E分光光度计，默认操作： (教育)开机仪器自检(BLA)预热20毫米波长设置方法设置(MOODT(或A)仪表调整“0.000”)，使用722E分光光度计，注意事项：1，预热-确保准确的设备稳定性；2、清洗盘子-测试液清洗、清洗；3、碟组-碟不能是任意的；4、盘内液体量- 2/3，液体，应用擦镜纸清除，使光路不受影响；5、放彩色碟子要保持“羊毛面”，去除光路通过“光面”；6、溶液浓度要适当。建议吸光度值在0.1至0.7范围内。否则，误差会更大，需要适当调整浓度。7、连续使用分光光度计一般在2小时以下。实验操作，实验内容：CuSO4溶液标准曲线绘制操作步骤：1，10%，15%，20%，25%，30%C

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