疑难血型分析鉴定及处理

1、疑难血型鉴定分析及处理,昆明医科大学第一附属医院输血科董伟群,输血前检查,红细胞血型系统简介,最重要的血型系统：ABO、Rh临床意义：输血安全、器官移植、新生儿溶血病,ABO血型临床意义,溶血性输血反应新生儿溶血病器官移植,ABO血型系统的血清学特点,ABO系统主要的抗原、抗体,ABO血型系统的血清学特点,A、B抗原的免疫性强规则抗体：血清中规律性的存在抗A和/或抗B抗体分泌型人的分泌液（血浆、唾液、羊水等）存在着A、B、H血型物质红细胞上的抗原与血清中的抗体存在相反的互补关系-正反定型的理论基础,ABO血型系统的血清学特点,抗A、抗B抗体的特性主要为IgM、IgGIgM抗体可被2-Me（2-

2、巯基乙醇）破坏IgG抗体分子量小，可通过胎盘屏障，造成新生儿溶血,！,新生儿溶血病,ABO正反定型试验方法,玻片法试管法：经典微量板法：微柱凝胶法PCR方法注意：细胞浓度、血清与细胞比例,ABO正反定型结果,ABO正反定型相符：“正反定型中有且只有2个强凝集反应管”,ABO亚型/抗原抗体减弱未达到两管强凝集,ABO正反不符,不规则抗体？除两管强凝集之外还有其他凝集,提示疑难血型,疑难血型的定义,疑难血型：是指一种血型难以判定的“现象”实质不是一种独立的血型在临床输血中,常规只要求查ABO和Rh（D）,不要求查其它血型,因此,疑难血型只涉及ABO和RhDABO疑难血型一般是因为正、反定型不合而发

3、现的,ABO正反定型不符合原因,试验因素假阴性：未加试剂；红细胞与血清比例不当；试验温度不当；离心速度不够；未判明结果为溶血；试验结果解读不准确。假阳性：试剂血清、红细胞或生理盐水污染；应用不洁的器皿；离心过度；试验结果解读不准确。患者本身,排除人为试验差错,漏加试剂红细胞浓度过低或过高试剂污染、失效加样枪污染离心机转速不达标标本搞错记录错误结果判读错误,正反定型不合的三种情况,正定型被干扰:抗原“变多”抗原“变少”反定型被干扰:抗体“变多”抗体“变少”正,反定型同时被干扰,ABO亚型,年龄6月、老年,白血病输异型血移植输血反应血型物质,正定型，抗原减弱或缺少,红细胞抗原“变少”,1、获得性B

4、抗原(类B)(临床提示感染)2、多凝集红细胞,3、自身凝集素(临床提示AIHA)直抗（+）,4、红细胞粘附大量蛋白5、红细胞未洗涤,血清对试剂反应6、输异型血(输血史)7、造血干细胞移植(病史)（混合视野）,正定型，意外抗原反应,红细胞抗原“变多”,新生儿、老年,处理：加大血清量，降低温度,低蛋白血症免疫抑制药物血液病先天性免疫缺乏骨髓移植,反定型、意外阴性,血清抗体“变少”,缗钱状形成（多发性骨髓瘤）,冷型自身抗体,同种抗体自身抗体,反定型、意外阳性,血清抗体“变多”,常见问题处理方法,了解患者一般情况。在做进一步试验之前，先进行重复试验。用试管法,洗涤细胞。更换新的试剂。灭活补体。,常见问

5、题处理方法,初步检查：再取一份患者新鲜标本红细胞洗涤后配成25%浓度重复进行各项试验直接抗人球蛋白试验用O及自身细胞检测血清判定结果之前，实验管至少在室温和4放置30分钟，阴性者用显微镜观察结果,进一步实验,增加试剂血清：抗A1、抗H、抗AB增加细胞：自身、O细胞、脐血细胞唾液血型物质鉴定吸收试验放散试验直接抗球蛋白试验分子生物学实验,实例分析和处理方法,实例分析（一）,1、病史：患者，女，37岁，子宫肌瘤，既往妊娠史：G2P1，无输血史。,分析：A亚型？A型（A抗原减弱）？其它可能,2、补充试验（人源抗A/B、抗H）,H抗原强弱：Oc大部分亚型Ac,3、吸收放散试验：1份Pc（生理盐水三洗后

6、）+1份抗A4吸收30-60min4生理盐水洗6次热放散后取上层放散液放散液的检测：,通过吸收放散试验在Pc上检测出A抗原,4、结论综上所述：可判断为A亚型，但还不能确定亚型的具体分型输血：A型红细胞、血小板,ABO亚型的检测,人源抗A/B,抗-H,抗-AB,抗A1,吸收放散,ABO亚型,检测项目,实例分析（二）,分析：患者的血型可能是A型。巨球蛋白血症或部分多发性骨髓瘤患者，血液中异常球蛋白升高，导致缗钱状凝集,对策：核对患者诊断和用药情况；盐水替代：A型输血：A型红细胞、血小板,实例分析（三）,患者是新生儿，抗体未出，反定无效正定型未出现2管强凝集,血型可能是O型，脐带血中有Wharton

7、胶。洗涤被检细胞后正定型凝集消失：O型输血：O型血,ABO正反定型不符需要关注的问题,患者的年龄？细胞是否三洗？患者是否血浆蛋白浓度低？患者的疾病类型？（白血病，胃肠道肿瘤）血样是否是输血后采集？,ABO正反定型不符思路整理,正定型,意外,（）,意外,（+）,洗涤RBC，降低温度，延长孵育时间,用不同来源的抗体试验，镜检,人源试剂，吸收放散试验（加对照）,可能的亚型;因为年龄、诊断或用药造成的抗原减弱,洗涤RBC,冷抗体或缗钱状凝集,用不同来源的抗体试验，研究病人的输血史和诊断,直抗（+）,获得性B、多凝集,ABO正反定型不符思路整理,反定型,意外,（）,意外,（+）,加大血清量，降低温度，延长孵育时间，镜检,与A(A1、A2)和B细胞反应，加自身对照（）,因为年龄、诊断或用药造成的抗体减弱,抗体筛选自身对照,A1c（+）A2c和筛选c自c(-)，,所有细胞呈（+）