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文档简介
1、探索:培养液中酵母个体数的变化,研究:培养液中酵母个体数的变化,目的1,利用血细胞计数板学习微生物计数方法2,实验培养液中酵母个体数的变化方法3,注意类似方法的应用4,影响个体数变化因素的经验1,酵母的繁殖方法主要为:2,酵母的呼吸方式为:要培养到适当的温度,调节PH值,调节氧气溶解等。酿造和面包需要酵母。这种酵母可以用液体培养基(培养液)培养。培养液中酵母种群的增加与发酵食品生产有着密切的关系。培养液中酵母个体数的开始一段时间内,以“j”型的增长,营养物质的消耗,有害代谢产物的积累,PH值的变化,个体数增加到“s”型。探索:培养液中酵母个体数的变化:培养液中酵母个体数的数量如何随时间变化?温
2、度会影响酵母的生长吗?营养素会影响酵母的生长吗?根据前面学过的知识,假设探索研究想法所需的菌株和无菌土豆培养液或肉汤培养液、试管、血细胞计数板(2mm2mm方格)、滴管、显微镜等由教师提供。在制定计划之前,需要思考以下问题,并与同学们讨论。实验设计将9个试管分成3个ABC组。a组为实验组,安装培养液10毫升,酵母母液0.1毫升,环境温度28 。b组装培养液10毫升,酵母母液0.1毫升,环境温度5,与a组温度条件比较。c组未设置培养液,仅无菌水10毫升,酵母母液0.1毫升,环境温度28 ,与a组形成了营养条件。实验操作:(1),无菌土豆培养液和酵母母液的制备;(2),预先设计的装扮。用10mL尺
3、度吸管将10mL培养液分别吸收到a组和b组试管中,用其他10mL尺度吸管将10mL无菌水分别吸收到c组试管中。各考官追加后用捆绑式捆起来,然后标明徽章的名称、组和日期。(3),用高压蒸汽灭菌锅灭菌;(4),接种菌株:灭菌干净的1毫升刻度吸管,每次拉出0.1毫升酵母母液,添加到每个试管中。(不要放太多的铃铛,避免早期细菌的数量太多。(5),培养:将a,c试管放入28 的恒温器中培养。把试管放在5 的保温箱里培养。5 的恒温箱可在部分冰箱保温室设置为5 时替代。(6),计数和记录:每日抽样时间大体一致,考官每组带来一个。计数过程中必须遵守灭菌操作规范,取样的吸管干净、分离使用,每次取样前试管振动均
4、匀摆动。用显微镜计算细胞计数后,立即将数据填进了记录表。分析结果,绘制结果数字,分析实验结果是否支持你做的假设。酵母的个体数在营养条件有限的情况下以s的形式增加,但在此之后减少。温度和营养素会影响酵母种群的变化。探索结论:一,酵母计算方法?提示:对试管培养液(可设置为10毫升)中的酵母进行逐个计数非常困难,可以进行抽样测试。首先将蜂箱放在计数室,用吸管拉出培养液,放在复盖幻灯片边缘,让培养液自行渗透,多余培养液用滤纸吸进去,等一会儿酵母细胞全部沉入计数室底部,计算计数台中央小方块内酵母的数量,估计试管中酵母的总数。请说明:血球计数板的结构。1。血细胞计数板:显微镜的插件,可以测量小物体(如细胞
5、或细菌)的长度或单位体积。血细胞计数板是用比一般幻灯片厚的特殊幻灯片制作的。玻璃片有四个凹槽,构成三个平台。中间是更宽的平台。其中一个被分成短槽,另一半被刻在栅格上。2,网格构成:附栏web上刻有9个大附栏,其中只有一个大附栏是计数室,计数室通常有两个规格。一个大方块里有16个中间栏,每个栏有25个;另一个是在大方块里,分别分成25个中间格和16个小格。但是,无论计算室是哪个配置,每个大方格都有一个共同的特征,即1625=2516=400个小方格。3,使用方法:用镜子擦拭血细胞计数板,在中央计数室用专用复盖幻灯片,稀释酵母悬浮,吸管在复盖幻灯片边缘拖动一滴,使细菌慢慢渗透,多余的细菌被吸收地吸
6、收,稍后酵母全部沉淀到血细胞计数室,盖幻灯片拍摄。5,单位转换:以1mm1mm为例,大正方形的长度和宽度分别为1mm,深度为0.1mm,体积为0.1m3。转换为1mL:1000/0.1=104,即1ml为104个0.1mm3。4,count room规格:count room横向为1mm、2mm 2mm、3m m3mm等深度为0.1mm。如果使用16单元25格的计算室,请对角选择左上、右上、左下、右下四个中间单元(即100个单元)中的酵母数量。如果使用大小为25芯16单元的计数室,则不仅需要4个对角方向,还需要中央一个中心(即80个小方块)的酵母数量(5点采样方法)。发芽的酵母在芽达到雌性细胞
7、大小的一半时,可以计算为两个菌体。怎么数?计算了将25网格16网格的计数室、5点采样法、7、格氏玻璃下培养液厚度0.1毫米转换为小方块酵母数从10毫升培养液中总酵母数的公式。每毫升的菌液中包含的酵母数计算公式(以1 mm1毫米为例):(1)16芯25个细胞的血细胞计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100个酵母细胞数/100)400 104稀释倍数,即小方块酵母数4 106稀释倍数,也就是说,1 ml等于2.5103个0.4mm3。每毫升2毫米2毫米酵母数的计算公式:(1) 16芯25单元格的血细胞计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100单元格的酵母细胞数/100)400 2.5103稀释倍数,
8、即小方块的酵母数106稀释倍数,(2)25晶格xx,不需要。其他时间取样形成了对比。需要。最小化误差。每个样品数三次,平均。第二,最好从试管中吸取培养液,在世纪前轻轻振动试管几次。这是为什么?第三,这种探索需要设定比较吗?如果需要,请说明对照组如何设计和操作,如果不需要,请说明原因。第四,是否需要反复实验?第五,如何记录结果?记录表是如何设计的?相邻两侧及其顶角的酵母细胞数以万计,稀释培养液。稀释的目的是方便酵母悬浮液的计算,每个小方块内包含4-5个酵母细胞,通常稀释10倍即可。8.清洗血球计数板后,用自来水冲洗,不要硬洗,洗后用吹风机烘干,或者用吹风机烘干,或者将乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水95%后干燥。要通过显微镜检查,看看每个细胞中是否还留有菌体或其他沉淀物,如果不干净,要重复,直到清理干净为止。6.小方块里酵母太多,数不清的话,该采取什么措施呢?7,按小方块边界的酵母应该如何计算?表示和交换报告1,7天半,计算每个半组的平均数值,根据平均情况重新绘制酵母个体数的增加曲线。将这条增长曲线与该组的曲线进行比较,
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