鲜蔬菜水果中农药多残留快速检测技术

1、新鲜蔬菜、水果中残留大量农药的快速检测技术、一部分农药残留检测的基础知识、(1)术语、农药残留后生物、农产品和环境中残留的微量农药母体、有毒代谢物、分解物和杂质的总称。 以毫克/公斤、毫克/公斤、毫克/公斤表示。 中国一般只检测农药的母体。 发达国家检查母体、代谢物、环境分解物、工业品杂质。 (1)术语二农药残留分析对测定样品中微量农药残留进行定性和定量分析。 目的为新农药提供在农作物中的残留动态和最终残留量。 制定农药的最大残留量和合理使用标准。 评价农药残留对农畜产品、环境带来的危险性。 为制定农药污染防止措施提供依据。 (一)专业术语二农药残留分析特征：分析目标物含量低，样品中只有ug、

2、ng、pg、fg量目标物种类多，化学结构差异大。 样品种类多，干扰物的成分不同。 方法要求快速、简便、低成本、敏锐、准确、安全。 对样品的预处理和仪器测试的要求越来越高。 (1)术语二农药残留分析： 1单残留分析为测定样品中某种农药残留定性定量(已知、未知)登记农药(中国、外国) 中国标准方法2多残留分析样品中多种农药残留同时定性定量(已知、未知)单种农药多残留分析(有机磷、有机氯等)中国标准方法多种农药多残留分析未知多种残留分析(cdfa、FDA、Canada) (1)术语， 三农残分析基本概念1添加回收率(fortified recovery )空白样品中添加某浓度的农药(C1 )后，该样

3、品中该农药浓度测定值(C2 )占添加值的百分率(f )。 F=C2/C1*100%添加回收率是以测定测量值和真值的误差为目的，制定农残分析方法精度和可行性的指标。 一般来说，可以以MRL值水平高1位、低1位、相同水平的3个浓度水平添加，或者以1、5、10 LOQ水平测定添加回收率，通过单一农药添加测定来测定残留添加回收率，也可以同时添加多种农药，测定残留添加回收率。 至少重复三次。 测试样品有代表性(34种)。 测试农药有代表性的东西。 单残留回收率： 80100%，多残留回收率： 70120%。 (1)专业术语三农馀额分析基本概念2变异系数(Coefficient of variation，

4、CV )测量回收率偏差的程度，判定农馀额分析方法的精度(再现性)指标。 CV=标准偏差/平均回收率*100%一般20%，(1)专业术语、三农馀额分析基本概念3检定限制、定量限制(1)检定限制(limit of detection )测定器或方法灵敏度(检测目标物)的指标。 要求低于物体的MRL值。 在色谱图上可以明确确认的分析对象物色谱峰的下限。 通常是噪音的三倍(信噪比=3)。 分为仪器的检测界限和方法，存在无检测界限的样品基质，在与样品测量完全相同的条件下，某个分析仪器能够检测出被分析物的最小量或最低浓度。 方法：检测有限样品基质的存在，在与样品测定完全相同的条件下，可以用某种方法检测分析

5、对象的最小量或最低浓度。 (1)专业用语、三农馀额分析基本概念3检定界限、定量界限(2)定量界限(limit of quantitation )测定器和方法灵敏度(定量目标物)的指标。 可以在色谱上正确地定量分析目标物的色谱峰的下限。 通常是噪音的十倍(信噪比10 )。分为仪器的定量限制和方法，仪器的定量限制中不存在样品基质，在与样品测量完全相同的条件下，某些分析仪器能准确地定量分析目标物的最小量或最低浓度。 方法定量仅限于样品基质的存在，在与样品测定完全相同的条件下，某些方法可以正确地定量分析目标物的最小量或最低浓度。 (1)专业术语、三农馀量分析基本概念3检定界限、定量界限；(3)测定方法

6、用机器检定界限或定量界限、某分析对象物的最低浓度标准进行测定。 Agilent机器化工厂可以直接测量信噪比。 如果：-BHC样品浓度为0.01ppm，S/N=30，则用设备LOD=0.001ppm、设备LOQ=0.003ppm的方法检测界限或定量界限，添加某个分析对象物的最低浓度等级或预测等级的样品，在该方法的所有操作步骤中重复实验两次。 向韭菜中添加：-BHC，CDFA法的添加水平为0.01ppm，样品的最终浓度为0.01ppm，S/N=12，方法LOD=0.0025ppm，方法LOQ=0.008ppm。 (1)术语、三农馀额分析基本概念4农馀额分析方法的认证指标精度(Accuracy )真

7、值(true value )回收率精度(reproducibility )、变异系数灵敏度(sensitivity )、检测限制、定量限制器线性范围(Linearity )标准曲线(sta (5个不同浓度、垄断的数量级或1X、5X、10X LOQ水平)相关系数(R0.9900 )、测定天数(3days )、(1)专业术语、三农馀量分析基本概念5农馀分析质量保证和质量控制(QA/QC )试剂空白实验(reagent blank ) (每天)基质至少2种基质； 2X LOQ水平) (每天)加回收率(加混标，交替加) (每天) LOD、LOQ、机器、方法(机器、方法条件变化时)机器的线性关系、基准曲

8、线、相关系数(至少3天)、三农馀量分析基本概念6最大馀量限制(最大馀量限制) 也称为农畜产品中的农药残留的法定最高允许浓度、最高馀量限制，用农畜产品中的农药残留毫克数(毫克/公斤)来表示。 目的：抑制食品中过剩农药的残留，保障食用者的安全，对超标产品采取措施，即禁止食用。 推动和指导合理用药，农产品监测超过标准的，表明没有按时用药。 为了减少国际贸易争端，各国制定了本国PS，国际组织PS/PS也制定了相应的PS标准。 制定方法：按照农药标签规定的剂量和方法使用农药后，农产品中的最大残留浓度，其数值应被毒理学接受，各国政府部门法律公布。 农残检查以MRL值判断是否超过标准。 (1)专业术语、食品

9、中农药的最大允许残留量(mg/kg ) (强制国家标准)从“农产品农药残留量标准套件”农业部农药检定所2001.9中摘录，(2)基本程序、预处理、设备分析、预处理、农药残留分析、提取、净化、浓缩、ECD、ELCD FPD、NPP GC/MS LC/MS、EI、CI，其他，UV、FLD、DAD :，样品收集，ESI，APCI，TLC，ceELISLISA，(三)农馀分析结果的计算和表现，(外标法，一点定量)，第二部分农馀检查技术概要， 土样、阴干、研磨、筛分(40目)动植物的样子：用高水分(水果、蔬菜)、切片、食品加工机加工低水分(粮食)后磨碎，筛高脂肪(畜产品)，用切片、刨肉机加工。 (1)农

10、残检查预处理技术概要，2用提取用溶剂从样品中溶解提取分析对象物。溶剂的选择：目标物溶解度大，基质干扰物溶解度小，纯度高(农残级，HPLC级，分析纯重蒸，浓缩200X，仪器检测)，(1)农残检测预处理技术介绍，二萃取，按溶剂类型，乙腈法CDFA(US) Dr.Mill，乙酸乙酯法e Dr.Luke混合溶剂法(乙腈-丙酮-甲醇) FDA (US ) (测定牛奶中的有机磷、有机磷、(一)农残检查预处理技术概要， 二萃取、样品类型别、浸渍、振动、索氏萃取-土壤(非结合残留)、匀浆外混合器：水果、蔬菜、茶叶、粮食、(脂肪2% )，其他SFE、超声波萃取、(一)农残检查预处理技术概要，三净化1液萃取法(L

11、LE )分析对象物为2种不溶溶剂利用目标物和干扰物在两种不溶性溶剂中的溶解度的差异，达到分离目的。 根据目标物和干扰物的性质，选择溶剂对。 传统的方法多被采用(例如国标法)。 逐渐被置换(花费时间，花费试剂，回收率容易降低)。 比较有机溶剂提取效果，(1)农残检测预处理技术介绍，三净化2固相提取法SPE固相微提取法SPME分析对象物被分配到结合硅吸附剂和溶剂中，与干扰物分离。 原理：图1、图2适用范围广，不同结构类型的SPE商品柱适用于不同结构类型的农药分析。 表1的优点：表2成为农残分析的主要预处理手段，取代了LLE。 发达国家得到广泛应用，我国正在推进。 Next，(1)农残检查前处理技术

12、的概要，图1，(1)农残检查前处理技术的概要，图2，Back，(1)农残检查前处理技术的概要，表1，(1)农残检查前处理技术的概要，接着表1，(1)农残检查前处理技术的概要，接着表1，Back，(1)农残检查前处理表2的固相提取法和液-液提取法的操作比较Back，(1)农残检查预处理技术的介绍，三净化3凝胶渗透法(GPC )原理：根据物质分子的大小和形状的不同实现分离。 主要根据相对分子量的差异，用GPC将农药和农药、农药和共提取物分开。 被分离净化。 (很多农药的分子量不足500 )图3的优点：净化容量大，适合有机磷、有机磷农药的提取，去除脂肪和色素。 很多农药的回收率很高。 自动化容易。

13、缺点：凝胶柱成本高，溶剂使用量大。 欧洲的应用很多。 (1)农残检验前处理技术概述，(3)农残检验前处理技术概述，三净化4超临界萃取法(SFE )以超临界流体为萃取剂，从复杂成分中提取目标物成分。 原理：通过超临界流体中不同物质的溶解度达到分离的目的。 优点：快速方便、选择性高的流体密度、溶解度、粘度可以通过压力控制的超临界流体在常温下自然挥发，省略了浓缩工序的GC、LC以及超临界色谱和在线样品使用量少，回收率高。 缺点：设备投资大、技术要求高、物质浓度过高的干扰检测分析基质对提取过程影响大的适用农药和样品范围窄的SFE是农药多残留分析有发展前景的技术。 (1)农残检查预处理技术介绍、三净化5

14、其他：磺化法、冷冻法、凝聚沉淀法。 磺化法：利用脂肪和蜡质能与浓硫酸进行磺化反应的原理，有效去除基质中的脂肪和蜡质(以测定的农药不与硫酸反应为前提，经常用于有机氯农药的检测)。 冷冻法：低温下在有机溶液中，动植物中的脂肪、蜡质沉淀析出，农药残留在溶液中，达到了分离目的。 凝聚沉淀法：用凝聚剂沉淀脂肪、色素等杂质的净化方法，极性强，适合在水中具有一定溶解度的农药。 (1)农残检验预处理技术介绍，四浓缩真空旋转蒸发法：处理溶剂量大，速度快，损失率高。KD浓缩器：处理量大，农药提取充分，损失率比真空旋转蒸发器低，时间长。 喷氮器：浓缩效率高，农药损失率低，溶剂处理量少，与SPE净化方法结合是理想的浓

15、缩装置。 自然挥发法：适用于浓缩慢、体积小、容易挥发的溶剂。 (二)国外农残检测技术的发展趋势，趋势：重视农产品、食品安全， -系统完善的法规，标准健全的机构、人员、设备完善-监控、检测及时有力的消费者健康和商品在国际市场上的竞争力，ISO9000和各国政府的法律法规-检测能力大-方法指标严格-样品处理量小-分析对象物的种类，数量多-精度、精度、灵敏度高-数据文件处理量大；(二)国外农残检测技术的发展趋势二概况： GC-挥发性农药高速筛选HPLC-半易失、非易失、 -GC/MS、LC/MS分析目标物-母体、农药代谢物、分解产物、结合残留、索式提取(Soxhlet Extraction )振动过

16、滤器(shake过滤器)匀浆(blending )等仍在使用(参照文献1 )。 (2)最大进展是固取提取(SPE )广泛用于农残分析，具有提取、净化、浓缩更集中于一步、缩短分析时间、降低成本、节约有机溶剂、实现半自动化、实现全自动化操作等优点(参见文献2、3 )。 (3)用活性炭柱和SPE柱净化，用GC/MS和HPLC-FLD检测水果，公布了蔬菜中200多种有机磷、氮和聚氨酯类农药的残留方法(参见文献7 )。 二概况：(二)国外农残检测技术的发展趋势，二概况： 1预处理技术(4)非极限提取，使用SPE杖和膜(disks )结合GC和GC/MS方法，在线和非在线液体提取固相微提取(SPME )超临界基质固相分散提取苯乙烯-二乙烯基苯共聚物的提取；和， 多孔碳柱和SPE拐杖或膜(特别是C8、C18 )组合使用的加速溶剂萃取(accelerated solvant extraction )微波萃取； 钝化扩散聚合物膜(passivedi