课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.ppt

1、课题3 分解纤维素的微生物的分离,纤维素： 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物,纤维素能被土壤中微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶,讨论：食草动物是怎样消化食物中纤维素的？,在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素的微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素。,纤维素生物燃料： 最有希望替代石油的能源,科学家正致力于研究，怎样将农业废弃物，木材及生长更为迅速的草本植物，转化为种类繁多的生物燃料（甚至是航空燃料）,一、基础知识,1.纤维素,纤维素是以一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质,2.纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶，一般认为至少包括三组分

2、，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,（一）纤维素和纤维素酶,【思考】,实验分析：P27,对照组,实验组,实验说明：纤维素酶可以分解纤维素,（二）纤维素分解菌的筛选,1.方法：,刚果红染色法,该方法通过颜色反应直接筛选,2.原理：,刚果红可以与纤维素形成_,当纤维素被_分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的_,可以通过_来筛选纤维素分解菌。,红色复合物,纤维素酶,透明圈,是否产生透明圈,空白的刚果红培养基,纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明带,从功能上看，这是一种什么培养基？,鉴别培养基,二、实验设计,（一）实验流程,土壤取样,选择培养（可省略）,梯度稀释,将样品涂布到鉴别纤维素

3、分解菌的培养基上,挑选产生透明圈的菌落,1、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，原因是_,【资料二】选择培养,阅读资料二“选择培养基”，回答以下几问题：,液体,没有添加琼脂,2、该培养基对微生物_（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是 _,具有,以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖；,若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将_改为_。,3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？,葡萄糖,纤维素粉,提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。,1、土壤取样,地点：富含

4、纤维素的环境中,2、选择培养,目的：增加纤维素分解菌的浓度,选用的培养基：,液体选择培养基,可以设计一个牛肉膏蛋白胨培养基做对照试验,3、鉴别纤维素分解菌的培养基刚果红培养基,先培养微生物，再加入刚果红,倒平板时就加入刚果红,颜色反应基本是纤维素分解菌的作用,操作繁琐，刚果红可能会使菌落之间发生混乱,操作简便，不存在菌落混杂问题,产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分,两种方法的比较,有可能刚果红染液把一个菌落的菌冲到另一个菌落里,这样的话菌落就可能不是单菌种了,挑菌摇菌的时候有可能得到混合菌,在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。,为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？,为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有_ 发酵