胰腺癌细胞系的表型及基因型介绍ppt课件

1、1、PPT制作：杨金收，胰腺癌细胞系的表型和基因型介绍，2、胰腺癌细胞系进行胰腺癌相关实验的原因(1)胰腺癌常见的四种基因(K-ras，p16，p53，Smad4)的突然变异比例和胰腺癌细胞系的突然变异比例相近胰腺癌细胞系统不同的表型和基因型利用代表胰腺癌不同亚类的胰腺癌细胞系统进行反应历程推理和因果实验，如不同特定蛋白表达和肿瘤生长、浸润、转移的关系，化学疗法耐受力实验。3、常见胰腺癌细胞来源的AsPC-1细胞球：胰头癌原发肿瘤转移，腹部器官，腹水分泌细胞：粘蛋白，CEA BxPC-3细胞球：胰腺癌原发肿瘤不转移的分泌细胞： CEA，CA199， 粘蛋白等裸鼠移植生长类似患者的原位肿瘤Cap

2、an-1细胞球：胰头癌来源的肝脏转移灶转移至区域淋巴结、肝脏等的分泌细胞：黏液、Capan-2细胞球：胰头癌来源的浸润、十二指肠壁浸润的远端CFPAC-1细胞球：胰头癌来源的肝脏转移灶(来源于转移广泛转移到肝脏CFTR的突然变异：来自先天性胰腺炎引起新胰腺癌危险因素(有争议)的HPAC细胞球：胰头癌分化稳定、良好的HPAF-II细胞球：胰腺癌腹水癌细胞(转移到肝、隔和淋巴结)，4、 几种常见胰腺癌细胞系统来源的Hs 766T细胞球：胰腺癌淋巴结转移灶来源的MIA Paca-2细胞球：浸润胰体尾癌原位肿瘤，主动脉周围不表达多种CEA，ALP阴性PANC-1细胞球：转移胰头癌原位肿瘤， 转移到胰周

3、淋巴结的CEA SU.86.86细胞球：转移到胰头癌肝脏转移灶的广泛肝脏转移、5、细胞球粘附、细胞球粘附均以细胞球外基质和细胞表面分子的接触为介导：血纤蛋白、基膜和结缔组织发现的糖蛋白I型和IV型胶原， 关于组织间质和基膜层粘连蛋白基膜中主要非胶原蛋白的研究： Capan-1比Mia-paca-2更容易连接在I型胶原Capan-1和Mia-paca-2之间， Capan-1对Bxpc-3、panc-1和I型胶原蛋白的黏附性与Bxpc-3和panc-1之间的黏附性相近的研究表明，Bxpc-3更强，6、影响细胞球黏附性、研究差异的变量：细胞球定量技术差异， 如分光光度法与光学显微镜不同处理细胞球培

4、养条件细胞球外基质的方法，研究者建议：引用已有的研究，应认真阐明不同细胞系的黏附特性；7， 细胞球迁移和侵犯相关实验方法：细胞球增殖实验MTT CCK8细胞球迁移实验transwellusingbodenchamberswond-healingcellmigationassay (细胞球齿轮离合器实验)细胞球浸润实验transwell (特定基质) *特定基质：人工基质凝胶型胶原、巢蛋白、硫酸肝素等)、8、细胞球迁移和浸润、细胞球迁移在癌细胞迁移中起重要作用。 关于细胞球转移的研究： Panc-1 (多数是单细胞球转移)是bxpc-3 (多数是整个细胞球团的转移)的5倍的能动性Panc-1细胞

5、球，在I型胶原transwell中发现了比bxpc-3更优秀的HPAF-II以比bxpc-3更高的能动性侵害癌症的患者关于细胞球浸润的研究： Capan-1和mia-paca-2与人工基质糊剂类似的浸润特性Bxpc-3比mia-paca-2具有更强的浸润能力， 研究表明，两者的Panc-1比mia-paca-2具有更强的侵犯能力，影响研究差异的变量在检测侵犯性能的试剂细胞球培养条件细胞球培养时间细胞球定量技术为研究者得出实验中的侵犯能力结论时，首先明确本实验细胞系的侵犯特征。、1.0、血管生成能力、肿瘤微血管密度(TMVD )是重要的肿瘤发展和患者生存的预测指标，在大部分肿瘤(如乳腺癌、前列腺

6、癌)中介导心血管的生成。 肿瘤的增殖与心血管的生成密切相关，其血管生成促进因子多于抗血管生成促进因子，其中的促进因子如血管内皮生长因子与胰腺癌的TMAD密切相关。 血管生成促进因子的高表达不仅促进中肿瘤血管的生成，还促进肿瘤细胞球有丝分裂的进行。 血管生成促进因子：细胞球因子，如IL-1、IL-8趋化因子、酶催化剂类其他肿瘤产物，COX-2的肿瘤血管生成促进作用：促进AA向PGE2的转化，PGE2是血管生成促进因子PGE激活NF-kB NF-kB促进COX-2的转录和翻译， IL-8能促进细胞球增殖和血管内皮细胞趋化因子运动介导的肿瘤生长，1.1、血管生成能力、相关研究： BxPC-3、Cap

7、an-1、Capan-2和hpaf-ii能表达COX-2，而AsPC-1、MIA PaCa-2、PANC-1不表达， 其中，Capan-2表达大量的COX-2，BxPC-3表达高水平的IL-1和IL-8，而Capan-2和MIAPaCa-2表达低水平的IL-8和检测不到的IL-1的总结： BxPC-3和capan-3 AsPC-1和MIA PaCa-2表达低水平血管生成促进因子的建议：可检测肿瘤细胞系中血管生成促进因子的表达，作为反映肿瘤血管生成能力的指标。1.2、肿瘤形成能力(体内)、肿瘤形成性做评估：肿瘤体积瘤质量发生概率生长速度移植瘤方法：皮下注射胰腺癌细胞(免疫缺乏小鼠)腹膜内注射/静

8、脉注射肿瘤细胞球原位移植瘤组织供体皮下移植瘤小鼠移植瘤细胞球原位移植瘤细胞球insitu，1.3，肿瘤形成能力(体内)， 关于皮下注射的研究Bxpc-3肿瘤比PANC-1大，也有显示PANC-1肿瘤大的研究Capan-1注射后在1.4周发展成肿瘤，bxpc-1和PANC-1在肿瘤4个月以上的Bxpc-3注射后的潜育期在4.0开始生长， capan-1在1.0潜育期开始生长的panc-1肿瘤潜育期为4周，mima-paca-2肿瘤潜育期需要对3周腹膜内注射的研究：严重联合免疫缺乏小鼠注射癌细胞后形成肿瘤的概率为Capan-1-100%，panc-1-86%， mia-66%肿瘤体积研究综述了mi

9、acapan-1 panc-1:bxpc-3和panc-1细胞球比肿瘤形成前潜育期capan-1细胞球在皮下和腹膜下易形成肿瘤、1.4、肿瘤的能力(体内) 有关原位移植肿瘤组织的研究：不同细胞系肿瘤概率为100%的研究有移植肿瘤体积、mia-paca-2capan-2、其他研究， HPAF-IIMia-paca-2panc-1Aspc-1 Q :为了研究供体皮下血液循环和肿瘤微环境的确立和肿瘤早期的发生发展，没有一盏茶说服力的原位移植肿瘤细胞球的研究： AsPC-1: 100% (10/10 )， CFPAC-1: 100% (10/10 )、HPAFII:100% (8/8)、capan-2

10、3360 9.0 % (9/1.0 ) hs 766 t 3360 9.0 % (9/1.0 )、HPAC: 88% (7/8)、PANC-1:80% (8/10 ) 总结andb xpc-:67 % (6/9) mia-paca-2肿瘤体积在HPAC细胞球mia-paca-2和Aspc-1注射后2、5周内具有相似的生长特征：胰腺癌细胞、不同移植方法、肿瘤性不同、1.5、 基因型特征常见基因变异： kr ASM p53 CDK n2a (p16/p 1.6 ink 4a ) Smad4(DP C4 )显示这4个基因的变异与胰腺癌细胞的分化程度及生物科学行为无关。 也有研究证实，肿瘤转移性与P5

11、3基因的变化有关。 因此，基因型和表型之间可能有一定的联系。 1.6、基因型特征KRAS基因、KRAS突然变异几乎发生于所有胰腺癌原发肿瘤，与肿瘤的早期发展有关。致癌反应历程： 1.2、1.3或6.1密码子突然变异抑制Ras蛋白质内的GTP酶催化剂，Ras蛋白质与GTP酶催化剂相连接，处于持续激活状态的Ras蛋白质形成Raf-mitogen-activited蛋白酶体信号通路， 有关akt-蛋白酶b信号通路的研究除密码子1.2突然变异发生于多种细胞系中的Hs766T和BXPC-3外，SW979中无RAS突然变异，但有研究表明Hs766T中有高水平的RAS基因突然变异： BXPC-3细胞系KRA

12、S基因是野生型的无ras激活* BxPC-3细胞球不能代表大部分胰腺癌，1.7、基因型特征CDKN2A/P16基因p16基因失活发生在98%以上的胰腺癌患者身上，发生在40%的胰脏上皮内肿瘤变化，被认为是胰腺癌早期发展的重要原因失活的反应历程：基因变异(16% )的纯子缺失(12% )启动子甲基化(52% )的研究： Capan-1和panc-1包括纯子缺失，HPAF-II为框内缺失，HPAC为外显子2的突然变异Bxpc-3细胞球p16为野生型，但不能检测p16蛋白AsPC-1、Capan-2和Hs766T细胞球p16也是野生型。 总结：基本上所有胰腺癌细胞系有各种原因p16基因失活。 1.8

13、、基因型特征TP53与Smad4基因、TP53基因(抑癌基因)的突然变异发生于50%前后的胰腺罹患癌症，与肿瘤后期的进展有关。 关于TP53的研究： P53和p16在细胞周期G1/S期发挥重要的检测和修复作用的p16和P53的高突变频率强调了在胰腺癌的发生发展中废除G1/S期检测部位的重要性。 Smad4基因(抑癌基因)是tgf家族的一员，约48-55%的胰腺癌可发生突然变异，与胰腺癌后期的发展有关。 关于Smad4的研究： BxPC-3、CFPAC-1和Hs766T的同质结合子可靠，被SMAD4/DPC4蛋白质Capan-1细胞球缺乏的的SMAD4/DPC4在点突变中失活，Capan-2、 MIA PaCa-2 PANC-1和SU. 86.86 88细胞球中Smad4