第九章 分光光度法

1、第1，9章可见-紫外分光光度法Vis-UV分光光度法，第1节分光光度法基本原理第2节可见分光光度法基本原理，第2，1节分光光度法基本原理，第一，光的基本特性，光是什么？光是以电磁波的形式传播的光子流。2 .光的波粒子二重性的波动出现在传播时：C=(衍射)光的粒度是能量的吸收或发射时： E=h。也就是说，光的波长与频率成反比，波长越小，频率越大；频率越大，光子的能量越高。3，2，物质对光的选择性吸收，1。物质的颜色，2。互补色光如果两种颜色的光能以适当的强度比例混合成白光，就称为互补色。单色光：单波长光。复色光：含有多种波长的光。4，3。物质的颜色和物质对光的吸收，一束白光照射在溶液中时，如果溶

2、液有选择地吸收特定频率的光，溶液会产生什么样的现象？溶液表示颜色，表示吸收的光的补色。物质是吸收光的补色。如果物质完全不吸收光(白光)，则是白色或无色的。物质吸收光后是黑色的。如果物质只吸收特定频率的光(特定颜色的光)，那就表示吸收的光的补色。4 .物质的结构与颜色物质的结构不同，吸收光的频率不同，颜色也不同。5，5。电磁波谱，电磁波谱：以电磁波的波长大小顺序排列的光谱。6，3，物质的吸收光谱取决于一种溶液吸收另一种波长的光的程度。以入射光的波长作为横坐标，以纵坐标的形式绘制溶液吸收其波长的程度，就可以得到这种物质的吸收光谱，也称为吸收曲线的曲线。max=515nm，吸收光谱，7。如图所示，1

3、 .相同浓度的溶液对不同波长的光吸收不同。2.相同物质浓度不同的溶液在吸收光谱中的形状基本相同，最大吸收波长max也相同。在实际测量中，通常选择max作为测量波长。吸收光谱说明一种物质徐璐吸收另一种波长的光的程度不同。右图是三个铁配合物的吸收光谱。8，I0=Ia It Ir，在实验中，标准溶液和测试的溶液分别放置在具有相同纹理和厚度的有色杯子中，高光强度Ir大小近似值可能会徐璐抵消，因此：I0=Ia It，溶液吸收的光线越多，通过的次数越少。分光光度计的基本原理，第一，通过溶液吸收光，ia absorption It transmission IR reflection，9，2，透射率，定义：

4、透射强度It，透射率从透射角度反映物质的光吸收。显然，透光率越大，物质的光吸收就越少。T=0表示吸收所有入射光。T=1时，入射光全部透射，不吸收。0 T1表示吸收了部分入射光，并透射了部分光。10，3，吸光度，定义：透射率的负值对数称为吸光度a。吸光度反映物质吸收光的程度，吸光度越大，溶液吸收光的程度越大。11，2，Lambert-beer定律。当适当波长的单色光接触溶液时：兰伯特的定律a与液层的厚度b成正比，前提是浓度恒定。A=k1b，Beer的定律液体层厚度固定时，吸收度a与浓度c成正比。a=k2c，Lambert-beer的定律，A=b c，a=a b，12，Lambert-beer的定

5、律，当适当波长的单色光照射在溶液中时，溶液的吸光度与浓度和液层厚度的乘积成正比。比例系数称为吸收系数(或a)，是与温度、入射光波长度和物质性质相关的常数。数值上=A/b c是单位厚度(1厘米)的吸收池中单位浓度(1mol/L)的溶液，表示物质产生的吸光度。与b，c无关的数量。(类似于a)。，吸光系数越大，物质对该波长单色光的吸收就越容易，测量的灵敏度越高。13，数据处理器，分光光度计五大系统，第二部分可见分光光度法，14，1。光源系统提供波长范围为3601000nm的连续光谱。可见光光源是钨灯，要求高强度和良好的稳定性。2 .光谱系统提供所需波长的单色光。单色器是光源发出的原色光，提供了足够的

6、强度和纯度。3 .用于盛溶液的吸收罐的容器(碟形)。有光学玻璃的可见光区域必须干净透明。4 .光电转换和信号放大的检测系统。由光电池，放大器组成，将光信号转换为电信号并放大。5 .输出系统数据输出。由指示器、数字显示和印刷机等设备组成。15，2，测量方法，分光光度计主要用于测定已知物质含量的定量分析。(a)测量被测试材料浓度的标准对照方法Cx示例：首先准备被测试材料的标准溶液cs；测定要测试的物质标准溶液的吸光值。Lambert-beer定律测量所测量物质未知浓度的x溶液的吸光度值Ax具有A=ABC，AS/CS=Ax/Cx，Cx=CS (Ax/AS)的优点。这种方法的优点是简单快捷。缺点：不能避免偶然的错误。16，(2)标准曲线法，测定被测试物质的浓度Cx例如，一系列x标准溶液C1，C2，C3，C4，被测试物质的每个标准溶液的吸光值A1，A2，A3，4，创建世界曲线，c作为横坐标，a作为纵坐标。5。在标准曲线上找到与Ax对应的浓度Cx。Cx、A x、4。测量未知浓度的测试对象物质溶液的吸光值a x。17，1。除溶剂坯料主体外，其他溶剂无色时，可以将溶剂用作空白溶液。2.试剂空白着色剂着色时，根据着