细菌培养基ppt课件

1、,=,细菌培养基,2011562 赵健乔 2011563 苟 强,1,一 基本理论 二 培养基的分类 三 培养基的主要成分及其作用 四 培养基配制原则 五 培养基使用注意事项 六 常用培养基及制备方法,2,一 基本理论,培养基的定义： 培养基是按照微生物生长繁殖或积累代谢产物所需要的各种营养物质，由人工配制而成的营养基质，它专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存用。 培养基的用途： 主要用于繁殖及分离纯化细菌、传代和保存菌种、鉴别细菌种属、研究细菌生理及生化特性、制造菌苗、疫苗和其他微生物制剂等。,3,二 培养基的分类,按用途分类,按物理性状分类,按成分分类,4,1.按用途分类,基础培养基,营

2、养培养基,增菌培养基,选择性培养基,鉴别培养基,显色培养基,5,选择性培养基,加入青霉素等抗生素的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基：分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物 加入氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基：分离杂交瘤细胞,6,2.按物理性状分类,液体培养基,流体培养基,半固体培养基,固体培养基,7,液体培养基：不含凝固剂，利于菌体的快速繁殖、代谢和积累产物 流体培养基：含0.05-0.07%琼脂粉，可降低空气中氧进入培养基的速度，利于一般厌氧菌的生长繁殖 半固体培养基：含0.2-0.8%琼脂粉，多用于

3、细菌的动力观察、菌种传代保存及贮运细菌标本材料 固体培养基：含1.5-2%琼脂，用于细菌的分离、鉴定、菌种保存及细菌疫苗制备等多方面,8,3.按成分分类,合成培养基,天然培养基,半合成培养基,9,三 培养基的主要成分及其作用,营养 物质,水分,凝固 物质,抑制剂 指示剂,主要成分：,10,主要营养物质,蛋白胨 牛肉浸液 糖醇类 血液 鸡蛋和动物血清 生长因子 无机盐类,11,四 培养基配制原则,2.营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。,3.pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。,1.目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微生物对培养物质的需求不同

4、。,12,五 培养基使用注意事项,配制培养基所用的化学药品，均应化学纯净。 配制培养基时各种成分应准确称量。 培养基的酸碱度，必须准确测定，特别对含有指示剂的培养基；测定酸碱度须于冷却后测定为准。 制备的培养基必须保持澄清，以便细菌生长后，容易观察。液体培养基沉淀法和滤纸法；固体培养基可用脱脂棉花滤清。,13,培养基必须达到完全无菌的目的。要注意有些培养基高压灭菌的磅数不可过高，时间不可过长，否则能使培养基变质。如乳糖高压灭菌磅数过高，可能分解为葡萄糖。 制备的培养基不宜保存过久，以少量勤做为宜。平板及少量分装的试管培养基均宜保存于4冰箱内。 培养基所用的一切玻璃器皿，必须是中性硬料，否则能影

5、响培养基酸碱度。,14,配制培养基的容器，不宜用铜或铁。含铜大于0.3mol/L时，细菌不易生长；含铁大于0.14mol/L妨碍细菌产生毒素。 培养基分装时不宜超过容器的2/3，以免灭菌时溢出。,15,六 常用培养基及制备方法,牛肉膏 0.3克 蛋白胨 1.0克 NaCl 0.5克 水 100毫升 pH 7.07.2,在烧杯中加水，称取牛肉膏、蛋白胨和NaCl，加热溶化后，调节pH值至7.07.2。分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌即成。常用于培养细菌。,ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guil

6、d Design Inc.,1.营养肉汤培养基,16,六 常用培养基及制备方法,牛肉膏 0.3克 蛋白胨 1.0克 NaCl 0.5克 水 100毫升 pH 7.07.2,在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。常用于培养细菌。,ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.,2.营养琼脂培养基,17,六 常用培养基及制备方法,蛋白胨20g 琼脂25-30g NaCl5g 乳糖(CP)10g 胆盐(3号胆盐或牛胆酸钠)5g 1%中性红水溶液5ml 蒸馏水1 000ml,

7、除去中性红水溶液外，其余各成分混合于锅内加热溶解。调pH值到7.07.2，煮沸，以脱脂棉过滤。加入1中性红水溶液，摇匀，灭菌15分钟，待冷却至 50时，倾倒平皿。,待平皿内培养基凝固后，置温箱内烤干表面水分即可用。保存于冰箱内（4）。现有厂家专门配制、出售麦糠凯琼脂干粉剂，用时，加水溶解，灭菌后即成。,3.麦糠凯（Macconkey） 琼脂培养基,18,六 常用培养基及制备方法,可溶性淀粉 2克 K2HPO4 0.05克 MgSO47H2O 0.05克 KNO3 0.1克 NaCl 0.05克 FeSO4 0.001克 琼脂 2克 水 100毫升 pH 7.27.4,在烧杯中加水95毫升，加热至沸腾，取可溶性溶粉2克，用5毫升水调成糊状，倒入沸水中和匀。再称取其它药品，陆续加入烧杯内（待一种药品溶解后，再加入第二种药品）。待全部药品溶解后，停止加热，补足失水，调pH值至7.27.4。分装后，高压蒸汽灭菌。,本培养基常用于培养放线菌。,4.高氏一号培养基（淀粉琼脂培养基）,19,常用于培养酵母菌。,六 常用培养基及制备方法,马铃薯 200克 蔗糖 10克 琼脂 20克 水 1000毫升 自然pH,称取200克马铃薯片，加水1000毫升，煮沸半小时，用纱布过滤，补足失水。在上述滤汁中加入10克