标准解读

《GB/T 37966-2019 纳米技术 氧化铁纳米颗粒类过氧化物酶活性测量方法》是一项国家标准,旨在提供一种科学的方法来测定氧化铁纳米颗粒的类过氧化物酶活性。该标准详细规定了实验所需的材料、试剂、仪器设备以及具体的测试步骤,适用于科研机构、高校及相关企业对氧化铁纳米颗粒类过氧化物酶活性进行准确测量。

根据此标准,首先需要准备一定浓度的氧化铁纳米颗粒溶液作为待测样品,并选择合适的底物与显色剂,通过控制反应条件如pH值、温度等,让氧化铁纳米颗粒催化底物与过氧化氢之间的反应。反应后生成的颜色变化可通过分光光度计进行定量分析,从而间接反映出氧化铁纳米颗粒的类过氧化物酶活性水平。


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  • 2019-08-30 颁布
  • 2019-08-30 实施
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GB∕T 37966-2019 纳米技术 氧化铁纳米颗粒类过氧化物酶活性测量方法_第1页
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GB∕T 37966-2019 纳米技术 氧化铁纳米颗粒类过氧化物酶活性测量方法_第3页
GB∕T 37966-2019 纳米技术 氧化铁纳米颗粒类过氧化物酶活性测量方法_第4页
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文档简介

犐犆犛11.100

犆04

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犌犅/犜37966—2019

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犖犪狀狅狋犲犮犺狀狅犾狅犵犻犲狊—犕犲犪狊狌狉犲犿犲狀狋犿犲狋犺狅犱犳狅狉狆犲狉狅狓犻犱犪狊犲犾犻犽犲犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳

犻狉狅狀狅狓犻犱犲狀犪狀狅狆犪狉狋犻犮犾犲狊

20190830??20190830??

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犌犅/犜37966—2019

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?????GB/T1.1—2009???????。

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犌犅/犜37966—2019

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??????(?Fe2O3)、?????(Co3O4)、???(Cu2O)、????(MnFe2O4)、???(FeS)、?

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犌犅/犜37966—2019

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2???????

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GB/T19267.2??????????????2??:?????????

JJG178??、??、

????????????

3?????、

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3.1.1

????狀犪狀狅狆犪狉狋犻犮犾犲狊

????????????????????。

[GB/T32269—2015,??4.1]

3.1.2

???犲狀狕狔犿犲犪犮狋犻狏犻狋狔

????????????。

?1:????????????????????????????????。

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mg

-1。

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3.2???

???????????。

DMSO:?????(Dimethylsulfoxide)

H2O2:????(Hydrogenperoxide)

NPs:????(Nanoparticles)

SOP:??????(StandardOperationProcedure)

TMB:3,3′,5,5′??????(3,3′,5,5′Tetramethylbenzidine)

犌犅/犜37966—2019

4??

??1??,??3,3′,5,5′??????(TMB)??????,?37℃?????(pH=3.6)

????????????,TMB?H2O2??????TMB???,?????650nm????

?????。?37℃、650nm??????????????????,????????????

?????TMB???????,???????????????????(犫nano)。?犫nano???

???????????????,?????????????????????????(犪nano),

????????????????。

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5.1?????

5.1.1??

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pH

?、?????、??、?????、???、???、??

??。????????A。

5.1.2?????

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1)nm,????≤2nm。???????????????GB/T19267.2???。

5.1.3???

??????????,??±1.5%,???±0.1℃。

5.1.4狆犎?

????????

pH

,??????0.01?,???±0.01。

5.1.5?????

????????,?????????(37±1)℃。

5.1.6??

????????,?????0.01mg,???(????)≤0.015mg(5g)。

犌犅/犜37966—2019

5.1.7?????

200μL、1000μL?????。

5.1.8???

10mL、100mL???。

5.1.9???

???(10.00±0.05)mm。

5.2??

??????1。

?1??

????????/???

??

?????(???)???

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3,3′,5,5′??????(???)TMB

30%H2O2???

??

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???<2μS·cm-1,pH6~7

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?????DMSO

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???????(GBW(E)130070)?

?????(GBW(E)130071)?

6????

6.1????

???????????????100%??。???????????100%[??狔(%)],?

????:犉content=100/狔,???????????????????。

??????????GB/T19267.2???。

???????,????????±0.5%。

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pH

???。??,?????

pH

????????

pH

?。???

????????????,??????????????????????????

pH

?。

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?????0.164g,???8mL?,???10mL????,?????????0.2mol·L-1

??????。

????1.144mL,???80mL?,???100mL????,?????????0.2mol·L-1

犌犅/犜37966—2019

??????。

??????????

pH

,????0.2mol·L-1???????0.2mol·L-1??????

??

pH

?3.6(37℃),?0.2mol·L-1,pH=3.6????/??????。???2℃~8℃???

?3??。

6.3??2

??TMB0.10g??8mLDMSO?????????,???10mL????,?DMSO?

??????10g·L-1TMB?DMSO??。???2℃~8℃????,????1??,???

??。??????????,??????,??????,?????????????????

????????。???????????,?????。

6.4???????

???????????????????????。

7????

7.1????

????????2。

?2????

????

??(37±1)℃

????(650±1)nm

??(10.00±0.05)mm

????(60±10)s

????≥300s

???≥11

7.2????

7.2.1???????,

??????????,?????????。

7.2.2???????,

????????,??37℃???????????。

7.2.3????????1、

??????????、??2?30%H2O2?????????37℃。

7.2.4???????3?????????????。

?3????

????

2.00mL

??1

???????,?????37℃

0.100mL

??????????

???????,????

犌犅/犜37966—2019

?3(?)

????

0.100mL

??2

???????,????,??60s。??????,????????????37℃

0.200mL

30%H2O2

???????,????,????????????,???????????(650nm)??

7.2.5????????2。

?2?????

7.3???????

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???????2:???????????????,?????7.2。

?:???3?,??3?????????。

7.4????????????????

????B。

犌犅/犜37966—2019

8??????

8.1??

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?????????????????。

犫nano=

ε×犾×Δ

Δ狋

…………(1)

??:

犫nano———???????????????,??????(IU?U);

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ε

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犾———?????,?????(cm);

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?犫nano??????????????????,????????????????????

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犪nano=犫nano/犿Fe…………(2)

??:

犪nano———???????????????,?????????(U·

mg

-1);

犿Fe———??????????????,?????(

mg

)。

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8.2.1???,

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犌犅/犜37966—2019

??犃

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犌犅/犜37966—2019

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?犃.3狆犎???

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pH

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?犃.4???????

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犃.5????

?????,?????SOP?????????,???A.5。

犌犅/犜37966—2019

?犃.5????

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犌犅/犜37966—2019

??犅

(?????)

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??????1000

μg

·mL-1?????????100μL、200μL、400μL、600μL、800μL,??

???????,???????,?????????,???

pH

??5??,???50mL,??

????????????510nm?????。

??????????Fe???????????犆犃????,??(B.1):

犃=0.19956犆+0.06171…………(B.1)

??:

犆———???50mL?Fe?????,????????(

μg

·mL-1);

犃———???510nm?????。

?????100μL,????Fe????????????????,???50mL,????

??????????,???????????????,????????100μL??????

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?:?????????????????,???????????????????????。

01

犌犅/犜37966—2019

??犆

(?????)

??????????????????????????

犆.1?????????????????

???????(γFe2O3)???????0.046mg·mL-1,??????狀=3,??????

????TMB?????????????,??C.1。

?犆.1犜犕犅????????????(??????)

????????,??????,??C.1。

?犆.1??????

?????????????????

Δ犃/Δ狋(min-1)0.15730.15870.1589

????6.31×10-41.51×10-31.23×10-3

????????????、犿Fe=犆Fe×犞Fe=0.046mg·mL-1×0.1mL=4.6×10-3

mg

、犞=

2400μL、犾=1.000cm、ε=39000mol

-1·L·cm-1???(

C.1)?(C.2):

犫nano=

ε×犾×Δ

Δ狋

…………(C.1)

犪nano=犫nano/犿Fe…………(C.2)

?????????C.2:

?犆.2犪狀犪狀狅????

????????????????????????

犪nano

(??:U·

mg

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2.0982.1172.1192.1110.012

犆.2??????

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11

犌犅/犜37966—2019

犪nano,??C.3。

?犆.3犪狀犪狀狅????

????

犪nano(???U·

mg

-1)

????????????????????

Day1

Ⅰ2.1332.1011.7811.919

Ⅱ2.3542.0902.0612.215

Ⅲ2.3332.0212.101

Day2

Ⅳ1.8501.9731.8231.991

Ⅴ2.0211.8981.9061.877

Ⅵ2.0771.9701.8791.778

Day3

Ⅶ2.0981.9252.1172.119

Ⅷ1.9652.2131.91112.031

Ⅸ2.1331.8662.0982.063

?:??“—”??????????????。

??C.3?????(C.3),??γFe2O3??????????????????珔犪nano?

2.020U·

mg

-1。

犪nano=∑

犻=1犪

…………(C.3)

???????????(C.4),?犛(犪犻)?0.142U·

mg

-1。

犛(犪犻)=

犻=1(

犪犻-珔犪nano)

狀-1槡

…………(C.4)

??(C.5)?,A????????0.024U·

mg

-1。

犝A珔犪nano()=犛珔犪()=犛(

犪犻)

槡狀

…………(C.5)

犆.2.2??????犅???

犆.2.2.1犅?????

??犪nano????(C.1)??(C.2),???B??????????:ε、犾、犞、Δ犃/Δ狋、犿Fe。??,

TMB??????????ε???,???????。?B?????????(C.6)??:

犝B(犪nano)

犪nano

犝C犾()

[]

犝C犞()

[]

犝C

Δ犃

Δ狋

()

Δ犃

Δ狋

犝C犿Fe()

犿Fe

[]

………(C.6)

???????????????。

犆.2.2.2?????犾

??????????????,????????????:犾=1.000cm,犝=0.003cm,犽=2。

21

犌犅/犜37966—2019

??(C.7)??,?犾????????0.0015。

犝C(犾)

犽×犾

…………(C.7)

犆.2.2.3?????????犞

????????????。

????????????、??2、30%H2O2????????100μL、100μL、200μL,??

???1?????(2000μL),???????????????。??犞??????????

???????(??100μL~1000μL),????????????。??(C.8)??犞????

????0.002。

犝C(犞1000μL)

=0.002…………(C.8)

犆.2.2.4????????????????????Δ犃/Δ狋

??????????????。

????????????????,????????????????:犝=0.008,犽=2。?

犝C(犃)=0.004。

???,Δ犃/Δ狋???????:?????????????????、?????????

??。

??????????,???????????????????(C.9)?:

Δ犃

Δ狋=

-2犃1-犃1.5+犃2.5+2犃3

…………(C.9)

??,???????????????????????(C.10)?:

犝C(Δ犃)=6

5犝C

犃()=0.0048…………(C.10)

?????????????????(C.11):

犛b=犫

1-狉

2(

狀-2)槡

…………(C.11)

??:

犫———?????????;

狉———?????????。

???犛b??,?????。?Δ犃/Δ狋??????????(C.12)??:

犝C

Δ犃

Δ狋

()

Δ犃

Δ狋

=0.0048

Δ犃

Δ狋

…………(C.12)

犆.2.2.5??????????????犿犉犲

???(C.13)

犿Fe=犞Fe×犆Fe…………(C.13)

??犿Fe????????(C.14)?:

犝C犿Fe()

犿Fe

[]

=[

犝C犞Fe()

犞Fe

犝C犆Fe()

犆Fe

[]

…(C.14)

??,犞Fe???????????,?:

31

犌犅/犜37966—2019

犝C犞Fe()

犞Fe

[]

=0.002

2=4×10-6

犆Fe????????????。???(C.15)

犆Fe=犆0

Fe()×犞0(Fe)

犞?

…………(C.15)

??犆Fe????????(C.16)?:

犝C犆Fe()

犆Fe

[]

=[

犝C犆0Fe()[]

犆0Fe()

+[

犝C犞0Fe()[]

犞0Fe()

犝C(犞?)

犞?

[]

………(C.16)

??:

犆0(Fe)???????????(???)????????。?????????????

?B,?????3.845mg/mL。?犆0(Fe)?????????????,???,犝C[犆0(Fe)]=

0.010mg/mL;

犞0(Fe)????????1000μL???,犝C[犞0(Fe)]=2μL;

犞?????????50mL???。???????????????,?????????

???:犝=0.05mL,犽=2。?犝C[犞?]=0.025mL。

????????(C.14),??:

犝C犿Fe()

犿Fe

=0.0039

????,?B?????????(C.6)?:

犝C犾()

=0.0015犝C

犞()

=0.002

犝C

Δ犃

Δ狋

()

Δ犃

Δ狋

=0.0048

Δ犃

Δ狋

犝C

犿Fe()

犿Fe

=0.0039

??Δ犃/Δ狋≈0.15,

犝C

Δ犃

Δ狋

()

Δ犃

Δ狋

?????????????????。???????????

???????????,??0.0048

Δ犃

Δ狋

???????????。

?B??????:

犝B犪nano()=犪nano×0.0048

Δ犃

Δ狋

=0.0048×犞

ε×犾×犿Fe

=0.065U·

mg

-1

犆.2.3??????

?????????,?A?、B?????????。??(C.17)??????????

0.069U·

mg

-1。

犝C=犝A珔犪nano()[]

2+

犝B犪nano()[]槡

2…………(C.17)

?????犽=狋0.05,34=2.03。

??(C.18)????????0.14U·

mg

-1。

犝犪nano()=犝C×犽…………(C.18)

??,?????????????????????

犪nano=2.02±0.14U·

mg

-1,

犽=2.03

41

犌犅/犜37966—2019

????

[1]GB/T19702????????????????????????????

[2]GB/T32269—2015??????????????????、????????

[3]GBW(E)130387???Fe2O3???????

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