细菌耐药机制研究和检测进展.ppt

1、细菌耐药机制研究和检测进展,细菌耐药性已成为全球医疗领域中最受关注的问题,细菌耐药性趋势 MRSA是革兰阳性菌中的主要耐药问题 肠杆菌科细菌对B-内酰胺类的耐药性 氟喹诺酮类的耐药性 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药性 铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药性 泛耐药革兰阴性菌几乎无药可治，1020年没有新药,The resistance situation in CHINA,E. coli / ESBL phenotype 50% E. coli / Ciprofloxacin 60% Klebsiella / ESBL phenotype 40% Klebsiella / Ciprofloxacin

2、 30% Klebsiella / Imipenem (new bp) 10% MRSA 50% VRE 5% CRAB 50%,MDR细菌已成为全球关注的焦点,在全球范围内，“ESKAPE”耐药已成为导致患者发病及死亡的重要原因1,“ESKAPE”耐药现象日益严重，但当前新型抗菌药物的研发逐渐减缓，未来可能面临无药可用的局面3,新药数量,1983-1987,1988-1992,1993-1997,1998-2002,2003-2007,1. Rice LB et al. The Journal of Infectious Diseases 2008; 197:107981 2. http:/

3、/world-health-day/zh/ 3. Boucher HW et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:112,一、定义,多重耐药细菌（Multi-drug resistant bacteria, MDR） 多重耐药细菌指细菌对常用抗菌药物主要大类中的3类或以上耐药。 广泛耐药细菌（Extensively drug resistant bacteria, XDR） 广泛耐药细菌指细菌对常用抗菌药物几乎全部耐药，革兰阴性杆菌仅对粘菌素和替加环素敏感；革兰阳性球菌仅对糖肽类和利奈唑胺敏感。,定义,泛耐药细菌（Pandr

4、ug-resistant bacteria, PDR） 泛耐药细菌指细菌对所有大类的常用抗菌药物全部耐药，革兰阴性杆菌对包括粘菌素和替加环素在内的全部抗菌药物耐药；革兰阳性球菌对包括糖肽类和利奈唑胺在内的全部抗菌药物耐药。,（一）耐药肠杆菌科细菌的定义标准,1. 肠杆菌科细菌对任何一种第三代、第四代头孢菌素或氨曲南耐药；确定为产ESBL，或对任何一种碳青霉烯类耐药，即判定为MDR。 2. 肠杆菌科细菌对第三代、第四代头孢菌素或氨曲南、加酶抑制剂、碳青霉烯类均耐药，仅对多粘菌素和替加环素敏感，为XDR。 3. 肠杆菌科细菌对第三代、第四代头孢菌素或氨曲南、加酶抑制剂、碳青霉烯类、多粘菌素和替加环

5、素全部耐药，为PDR,（二）耐药铜绿假单胞菌的定义标准,具有抗铜绿假单胞菌活性的抗菌药物包括： 1.头孢类（头孢吡肟、头孢他啶）； 2.碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南）； 3.氟喹诺酮类（左氧氟沙星、环丙沙星）； 4.氨基糖苷类（阿米卡星）； 5. 加酶抑制剂（头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦） 6.多粘菌素 除多粘菌素外，15类中3类耐药的细菌为MDR；15类全部耐药，但对多粘菌素仍敏感的菌株为XDR；16类（包括多粘菌素）全部耐药的细菌为PDR。,（三）耐药鲍曼不动杆菌的定义标准,对鲍曼不动杆菌有活性的抗菌药物包括： 1.头孢类（头孢吡肟、头孢他啶）； 2.碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培

6、南）； 3.氟喹诺酮类（左氧氟沙星、环丙沙星）； 4.氨基糖苷类（阿米卡星）； 5. 加酶抑制剂（头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦）； 6. 多粘菌素； 7. 替加环素 除67多粘菌素和替加环素外，15类中3类耐药的细菌为MDR；15类全部耐药，但对多粘菌素和替加环素仍敏感的菌株为XDR；17类（包括多粘菌素和替加环素）全部耐药的细菌为PDR。,我国主要的MDR致病菌,我国，“ESKAPE”耐药菌株检出率高,检出率(%),产ESBL大肠埃希菌,MRSA,产ESBL肺炎克雷伯菌属,不动杆菌属*,铜绿假单胞菌*,耐万古霉素屎肠球菌,*在G-菌中的检出率,朱德妹等.中国感染与化疗杂志.2011;

7、11(5):321-329,抵制耐药，让我们立即行动!,加强微生物检验和耐药监测 加强院感控制（手卫生、耐药菌管理） 加强抗菌药物管理,一、Persister,二、S. aureus and MRSA,Methicillin resistant S. aureus Presence of a mecA gene Carried in a mobile genetic element (SCCmec) Most routine testing antibiotic sensitivity (MRSA id agar),CLSI药敏指南,“金黄色葡萄球菌或所有凝固酶阴性葡萄球菌 如对苯唑西林(或甲

8、氧西林)耐药，则对青霉素类、 头孢菌素类、碳青霉烯类和含酶抑制剂的复方制剂 均应报告耐药，而不考虑其体外药敏结果”。,Cefoxitin Disk Test for mecA-mediated Resistance in Staphylococci Breakpoints (mm),* Report as oxacillin resistant * Report as oxacillin susceptible CoNS, coagulase-negative staphylococci,OX-R=mecA=MRSA?,Discovery of the new MRSA strains (LG

9、A251),We found S. aureus that were highly resistant on one farm (ST425) (Oxacilin MIC=16mg/l, cefoxitin MIC=32mg/l) Looked for mecA gene negative results Sequenced whole genome to look for the reason Found a divergent mecA gene inside a new SCCmec,Importance of the new MRSA,Molecular tests (PCR Plac

10、e ertapenem or meropenem (best) disk on lawn. Streak test isolates (#1 - #3) from edge of disk outward (use 1 mcl loop) Incubate overnight Look for growth of E. coli around test isolate streak- indicating the presence of carbapenem-hydrolyzing enzyme,Modified Hodge Test,#2 pos,#3 neg,CLSI M100-S20,2012 ertapenem的折点标准,进行耐药机制的初筛试验 (MIC升高至接近“敏感”折点为 “可疑”),进行耐药机制的筛选和确证试验,若检测到耐药机制需更改药敏报告,发现-内酰胺类耐药 (怀疑产ESBL或碳青霉烯酶),旧的药敏报告模式,ESBL,MHT,Cour