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文档简介
1、,一、实验目的: 二、主要仪器设备及材料: 三、实验原理及步骤: 四、结果分析(绘图及标注): 五、思考题:,实验一 上皮组织和结缔组织的微细结构观察,一、实验目的:,通过观察切片,进一步加深对上皮组织和结缔组织结构特征的认识,熟悉其分类及特征;掌握血涂片的制作方法。,二、主要仪器设备及材料:,1.玻片标本:甲状腺滤泡壁、肠横切、气管横切、食道横切、输尿管横切、疏松结缔组织/蜂窝组织、肌腱纵切/鼠尾腱纵切、血涂片; 2.显微镜,解剖工具,滴管,载玻片,鱼或虾、蟹等鲜活标本,三、实验原理及步骤:,观察切片时,应在低倍镜下观察整体结构,然后转换高倍镜观察局部微细结构。,1.单层立方上皮/腺上皮:甲
2、状腺滤泡壁 低倍镜观察:甲状腺主要是由许多圆形或卵圆形的囊状滤泡构成,滤泡之间有丰富的毛细血管网。挑选一个滤泡换高倍镜观察:滤泡壁由单层立方细胞构成,核呈圆形,位于细胞中央或略偏基部。腺腔内有染成粉红色的胶状物质-甲状腺激素。,2.单层柱状上皮:肠横切 管腔面由单层柱状细胞组成,核卵圆形,位于细胞的基底部。细胞的基底端有一层极薄的膜,即基膜。面向肠腔的游离面上有一层深红色的结构,即纹状缘(微绒毛)。柱状细胞间有许多杯状细胞。,3.假复层柱状纤毛上皮:气管横切面 用低倍镜寻找管腔面上皮组织的部位。可见组成管腔的上皮较厚,其中夹杂有形似高脚酒杯的细胞,即杯状细胞。换高倍镜观察:寻找切面切得较正的部
3、位,可看到明显的三层细胞核:基部是一层近圆形的小核,排列在同一平面上,这就是锥形的基细胞的核。第二层细胞核较大,呈卵圆形,排列稀疏,是梭形细胞的核;表面的一层细胞核椭圆形,是纤毛柱状细胞的核。这种细胞的游离面有一层排列整齐的纵纹,即纤毛。在纤毛柱状细胞之间,可看到杯状细胞。杯状细胞的粘液在制片时被溶解,故呈空泡状。在上皮细胞和结缔组织接触处有一层很厚的基膜。,假复层柱状纤毛上皮:气管横切面,4.复层扁平上皮:食道横切 先用低倍镜找到管壁内层的上皮后,换高倍镜观察。和基膜相连的是一层排列整齐的低柱状细胞,即基底层细胞,具有一圆形核。从第二层细胞向上的数层细胞形状不规则,排列也不整齐,为多角形细胞
4、。细胞愈靠近表面愈变得扁平,核的着色也淡,甚至模糊不清,为扁平细胞。,图 未角化的复层扁平上皮(食管),5.变移上皮:输尿管横切 先用低倍镜找到管腔壁表面的上皮后换高倍镜观察。选择切面较正的部位,表面是大小不一的盖细胞,表层细胞质浓缩成壳层,有的盖细胞具有两个细胞核。中间层细胞是多边形的;基底层细胞是立方或锥体形的。,6.疏松结缔组织/蜂窝组织 肉眼观察:铺片呈紫红色,选择较透亮的区域用低倍镜观察。可看到很多分散的纤维,互相连接成网状。较粗的、染成粉红色的,为胶原纤维;纤细的、紫黑色的,为弹性纤维。换高倍镜观察各种细胞,其特征如下:A、成纤维细胞:为多角形或星形的扁平细胞、核大;B、巨噬细胞:
5、细胞具短而钝的伪足;C、浆细胞:多呈圆形,核染色深,居细胞一侧;D、肥大细胞:常成群分布在毛细血管附近,胞体较大,略呈圆形,核小而圆,胞质中充满嗜碱性颗粒,有时把核遮蔽起来。,7.致密结缔组织:肌腱纵切、鼠尾腱纵切 高倍镜观察:粗而直的胶原纤维束彼此平行排列,呈现纵行纹理。这是因为纤维束是由胶原纤维紧密平行排列而成的,胶原纤维束之间,分布着腱细胞,排列成单行的长带。,图 胶原纤维(肌腱)光镜图(F腱细胞),8.血涂片: 制作步骤:取鱼血可用剪断尾鳍法,从尾静脉采血。将流出来的第一滴血擦掉,将第二滴血滴于载玻片右端的1/3处,用另一载玻片与血滴相接触,血液即沿玻片边缘散开,两玻片成40度角,然后
6、均匀地向左端推玻片,血液即在载玻片上成一均匀的薄膜,放在无尘处晾干;用滴管滴Wright氏染液或Giemsa染液数滴,使其盖过血膜,静置23分钟后,在染液上滴加与染液等量的磷酸盐缓冲液或蒸馏水,用口吹气或用牙签轻轻拨动,使染液和缓冲液混合均匀,再染4分钟左右,用缓冲液或蒸馏水将染液洗去,稍干后,即可观察。如染色适宜,红细胞为粉红色,白细胞的核为蓝紫色,嗜酸性白细胞颗粒鲜红色,嗜碱性白细胞颗粒蓝色。,血涂片观察:人血涂片低倍镜观察:红细胞呈粉红色,白细胞的核蓝紫色。选择白细胞较多的区域换高倍镜观察,区分下列各种血细胞:A、红细胞:大量、小而圆、中央透亮、无核、红色。B、白细胞:a、嗜中性粒细胞:
7、胞质呈淡红色、充满紫红色的小颗粒,核紫色、通常可分为 2-5叶,叶间有细丝相连。如核呈杆状的,为幼稚型细胞。b、嗜酸性粒细胞。较难找到,胞质中充满桔红色的圆形颗粒。核淡紫色,常分2叶。c、嗜碱性粒细胞:不易找到,胞体比上述两种白细胞稍小。胞质中分散着大小不等的蓝紫色圆形颗粒。核色稍淡,位于细胞中央,圆形或分叶。d、淋巴细胞:核深蓝紫色,胞质天蓝色、很少,常呈圆环状围绕细胞核.e、单核细胞:不易找到。胞体很大,呈圆形成卵圆形。胞质多,呈灰蓝色。核呈肾形戎马蹄形,常扭曲或折叠。f、血小板:常聚集成群,形状不规则,淡蓝色,中央有紫色的小颗粒。 蛙血涂片/鱼血涂片红细胞的胞体呈卵圆形,具有卵圆形细胞核,血栓细胞是成群的卵圆形细胞,有卵圆形的核和染成淡蓝色的细胞质。其它血细胞特征同人血细胞。,四、结果分析:绘图及标注(高倍镜下绘各组织的一个局部) 1.单层立方上皮:立方上皮细胞 细胞核 2.复层扁平上皮:基底层细胞 多角形细胞 扁平细胞 3.疏松结缔组织:胶原纤维 弹性纤维 成纤维细胞 巨噬细胞 4.
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