课题3　血红蛋白的提取和分离 (6)

1、课题3血红蛋白的提取和分离，第1，基本原则：(1)蛋白质提取和分离原理：(2)蛋白质提取和分离的方法1)凝胶颜色频谱：分配颜色频谱2)电泳法(3)缓冲液的作用，第2，实验操作实验阶段蛋白质提取和分离取决于蛋白质的理化性质。1.分子的形状，大小2。电荷性质和多少3。溶解度4。吸附特性5。对其他分子的亲和力，1。凝胶频谱，(1)原理：(2)材料：凝胶小分子通过多孔凝胶颗粒内部，长而慢。凝胶是一个小的多孔球体，如葡聚糖和琼脂糖。里面有很多贯穿通道。根据相对分子质量大小分离蛋白质的方法，概念：2凝胶传记游泳法：1)原理：不同蛋白质的传记特性(正电荷或负电荷)，功率，形状和大小不同，以及在电场中受力的大

2、小，方向，2)影响蛋白质分子运动速度的因素，在特定的PH中，蛋白质可分离组携带电荷，2凝胶传记永冻法：1)原理：不同蛋白质的传记特性(正电荷或负电荷)，传记，形状和大小不同，电场中受力的大小，方向，电阻不同，因此电场中会发生不同蛋白质的运动。2)影响蛋白质分子运动速度的因素，传记电泳：由于电场的作用，带电粒子移动的过程，蛋白质为什么带电荷？3)常用的传记永冻法琼脂糖凝胶电泳游泳聚酰胺凝胶电泳游泳SDS-聚丙烯凝胶电泳添加了很多负电荷的SDS，形成了蛋白质SDS复合物，蛋白质迁移率仅取决于分子大小。、H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4等，(4)缓冲溶液洗涤作用：准备：控制酸

3、和盐的量，抵抗外部酸碱溶液pH的干扰，保持pH稳定。想：不同PH值的缓冲液如何制作？血液成分，阅读思维：血液由_ _ _ _ _ _ _ _ _和_ _ _ _ _ _ _ _两部分组成。血细胞中_ _ _ _ _ _ _ _ _ _细胞数最多、细胞含量最高的化合物是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _牙齿化合物洗涤红细胞，阅读思考：洗涤的目的是什么？洗涤方法是什么？洗涤干净的标志是什么？反复洗3次，直到血液100毫升，上清液没有黄色为止。2.释放血红蛋白，在释放血红蛋白的过程中，在洗涤的红细胞中放什么物质呢？为了加速释放过程，采取了什么措

4、施？目的分析：蒸馏水的作用是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _充分混合的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，烧杯，凝胶色谱专栏制作：2 .凝胶色谱柱填充：教材图519，3轻拍，填充悬浮液，凝胶颗粒蒸馏水充分膨胀，根据频谱柱体积计算凝胶用量，频谱柱垂直固定在支架上，准备悬浮液，计算定量凝胶，固定频谱柱，材料：交联葡聚糖凝胶G-75 20 mmol/75是什么意思？注：色谱柱中不应有气泡。安装后立即用缓冲液洗涤，平衡凝固剂用凝胶填满，3 .样品的添加和溶出，1。调整面额，2 .加法3。重新调整面额，4 .洗脱，5。收集低速，短时间离心。2.色谱柱填充：填充尽可能紧密，减少粒子间距。没有气泡，洗脱液被切断后渡边杏