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文档简介
1、专题4 酶的研究与应用,课题 1 果胶酶在果汁生产中的应用,课题背景,我国每年上市的新鲜水果品种多、数量大。但由于收获的季节性强,易造成积压滞销,腐烂变质。水果的加工技术,(制作果汁、果干、果粉和国酒)可以缓解产销矛盾。,本课题将探究: 果胶酶在果汁生产中的应用,一.果肉的出汁率低,耗时长 二榨取的果汁浑浊,黏度高, 易发生沉淀,制作果汁要解决两个问题,怎样解决?,使用 果胶酶,阅读课本P42的内容,回答以下问题: (1)细胞壁的组成成分? (2)果胶的单体是什么? (3)果胶酶的作用?,基础知识,1、果胶 是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一,它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物,
2、不溶于水。,基础知识,(一)果胶酶的作用,2、果胶对果汁制作的影响:,果胶酶是分解果胶的一类酶的总称,包括半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等。,影响果汁的出汁率,还会使果汁浑浊。,3、果胶酶:,基础知识,4、果胶酶在果汁制作中的作用, 分解果胶,瓦解植物的细胞壁及胞间层;提高水果的出汁率 使果胶水解为半乳糖醛酸,并使果汁变得澄清。,基础知识,回忆-回答: (1)酶的概念 (2)酶的化学本质,基本组成单位 (3)酶的功能及原因 (4)酶的特性,(二)酶的活性与影响酶活性的因素,基础知识,(1)酶的概念,酶是活细胞所产生的具有生物催化作用的一类特殊的有机物;,蛋白质(大多数)或RNA;基本组成单
3、位:氨基酸或核糖核苷酸,酶能降低化学反应的活化能,从而使反应能够迅速的进行。在各种化学反应中起催化作用,(2)酶的本质,(3)酶的功能,(4)酶的特性,(1)高效性,(2)专一性,(3)需要适宜的条件,基础知识,1、酶的活性,2、酶催化能力高低的衡量标准,指酶催化一定化学反应的能力。,在一定的条件下,酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。,酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。,基础知识,(二)酶的活性与影响酶活性的因素,A、温度对酶的影响 在较低温度时,随着温度的升高,酶的活性也逐渐提高,达到最适温度时,酶的催化能力最高,但高于最适温度后,酶的催化能力迅速下
4、降,最后完全失去催化能力。,3、影响酶活性的因素:温度 pH,B、果胶酶的最适温度 果胶酶的最适温度为45500C。,温度,基础知识,A、 pH对酶的影响 酶的催化能力的发挥有一个最适pH ,在低于最适pH时,随着pH的升高,酶的催化能力也相应升高,高于最适pH时,随着pH的升高,酶的活性逐渐下降,pH过高或过低会使蛋白质变性,当蛋白质变性后,酶也就完全丧失了活性。,基础知识(二)酶的活性与影响酶活性的因素,B、果胶酶的最适pH 果胶酶的最适pH范围为3.06.0。, pH,基础知识,1、酶的生产,提取法:采用各种技术,直接从动物或微生物的细胞或组织中将酶提取出来(在原料充分的地区得以应用)。
5、,发酵法:通过微生物发酵来获得人们所需的酶(20世纪50年代以来生产酶的主要方法),如用曲霉、青霉等微生物发酵生产果胶酶。,2、控制酶的用量,为了果胶酶得到充分的利用,节约成本,需要控制好酶的用量。,(三)果胶酶的用量,基础知识,实验设计的2个基本原则:,1、对照原则,2、单一变量原则,实验设计,1.探究温度对果胶酶活性的影响,果胶酶的活性受温度影响。处于最适温度时,活性最高。高于或低于此值时活性均下降。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比,1、实验原理,实验设计1.探究温度对果胶酶活性的影响,2、实验操作流程,思考: 1、你打算设置多少个温度值? 2、你如何得到苹果泥? 3、你
6、怎样保证在任一温度装置中苹果泥和果胶酶及混合后温度的一致? 4、你依据什么来判定果胶酶的活性大小的大小?,实验设计1.探究温度对果胶酶活性的影响,实验设计1.探究温度对果胶酶活性的影响,搅拌器搅拌制成苹果泥,均分装入,9支试管,果胶酶水溶液,等量,9支试管,将分别装有苹果泥和果胶酶的试管9组分别放入300C、350C、400C、450C、500C、550C、600C、650C和700C的恒温水箱中保温,试管内温度稳定后,将果胶酶加入相同温度的苹果泥内恒温保持10分钟,过滤果汁,用量筒测量果汁的量,填入表格, 设计记录数据的表格 结果分析与评价: A、根据表中数据画曲线图 B、据曲线说明温度是如
7、何影响酶的活性的?,将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理,可以保证底物和酶在混合时的温度是相同的,避免了果泥和果胶酶混合时影响混合物的温度,从而影响果胶酶活性的问题。,问1:为什么在混合苹果泥和果胶酶之前,要将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理?,实验设计1.探究温度对果胶酶活性的影响,实验设计,果胶酶的活性受pH影响,处于最适pH,酶的活性最高,高于或低于此值活性均下降。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比。,1、实验原理,2、实验操作流程,实验设计2.探究pH对果胶酶活性的影响,探究pH对果胶酶活性的影响,只须将温度梯度改成pH梯度,并选定一个适宜的温度进行水浴加热。
8、反应液中的pH可以通过体积分数为0.1%的NaOH或HCl溶液进行调节。,将分别装有苹果泥和果胶酶的试管在恒温水箱中 恒温加热,保持恒温一段时间,过滤果汁,用量筒测量果汁的量, 填入表格,确定最适pH,搅拌器搅拌制成苹果泥,均分 装入,9支试管,果胶酶水溶液,等量,9支试管,将苹果泥和果胶酶分别加入9组试管中(选取的pH 梯度: 5.0、5. 5 、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0),问2在探究温度或pH的影响时,是否需要设置对照?如果需要,又应该如何设置?为什么?,提示:需要设置对照实验,不同的温度梯度之间或不同的pH梯度之间就可以作为对照,这种对照称为相互对照。,实验
9、设计2.探究pH对果胶酶活性的影响,问3A同学将哪个因素作为变量,控制哪些因素不变?为什么要作这样的处理?B同学呢?,A同学将温度或pH作为变量,控制不变的量有苹果泥的用量、果胶酶的用量、反应的时间和过滤的时间等。只有在实验中保证一个自变量,实验结果才能说明问题。 B同学对于变量的处理应该与A同学相同,只是观察因变量的角度不同,实验设计2.探究pH对果胶酶活性的影响,果胶酶将果胶分解为小分子物质,小分子物质可以通过滤纸,因此苹果汁的体积大小反应了果胶酶的催化分解果胶的能力。在不同的温度和pH下,果胶酶的活性越大,苹果汁的体积就越大。,问4 想一想:为什么能够通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断
10、果胶酶活性的高低?,实验设计2.探究pH对果胶酶活性的影响,问5当探究温度对果胶酶活性的影响时,哪个因素是变量,哪些因素应该保持不变?,提示:温度是变量,应控制果泥量、果胶酶的浓度和用量、水浴时间和混合物的pH等所有其他条件不变。只有这样才能保证只有温度一个变量对果胶酶的活性产生影响。,实验设计2.探究pH对果胶酶活性的影响,实验原理,在一定的条件下,随着酶浓度的增加,果汁的体积增加;当酶浓度达到某一数值后,在增加酶的用量,果汁的体积不再改变,此值即是酶的最适用量,探究果胶酶的用量是建立在探究最适温度和pH对果胶酶活性影响的基础之上的。此时,研究的变量是 ,其他因素都应 。,果胶酶的用量,保持
11、不变,实验设计 3.探究果胶酶的用量,2、实验操作,(1)配制不同浓度的果胶酶溶液和制备水果泥;,配制不同浓度的果胶酶溶液 准确称取纯的果胶酶1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、 8mg、9mg,配制成相等体积的水溶液,取等量放入9支试管中,并编号19。,制备水果泥 搅拌器搅拌制成苹果泥并称45g,等量装入9支试管中,并编号19,(2)将上述试管放入恒温水浴加热一段时间。,(3)将不同浓度的果胶酶分别迅速与各试管的苹果泥混合,然后再放入恒温水箱中。,(4)恒温水浴约20分钟,(5)过滤后测量果汁的体积,实验设计 3.探究果胶酶的用量,一般为50mg/l左右,因为用此浓度处理
12、果汁24小时后果汁率增加10后不再增加。,在最适温度和pH条件下制作1升苹果汁,使用多少果胶酶最合适?,结果分析与评价,课堂小结,练习 答:大规模生产与实验室制备的主要不同点是: 1.有两次瞬间高温灭菌; 2.酶处理的时间相对较长; 3.有离心分离步骤和浓缩步骤。,果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要成分之一。果胶酶能够分解果胶,从而分解植物的细胞壁及胞间层。在果汁生产中应用果胶酶可以提高果汁的澄清度。下面是某研究性学习小组同学在“探究果胶酶催化果胶水解的适宜pH”的课题过程中遇到的问题。 (1)本课题实验步骤中,在完成“烧杯中分别加入苹果泥(假定pH的改变对苹果泥成分无影响),试管中分别注入果胶酶溶液、编号、编组”之后,有下面两种操作: 方法一:将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合,再把混合液的pH分别调至4、5、610。 方法二:将试管中果胶酶溶液和烧杯中苹果泥的pH分别调到4、5、610,再把pH相等的果胶酶溶液和苹果泥相混合。 请问哪一种方法更为科学,并说明理由?,课堂巩固,请问哪一种方法更为科学,并说明理由?,方法二的操作能够确保酶的反应环境从一开始达到实验预设的pH(或“方法一的操作会在达到预定pH之前就发生了酶的催化反应”)。,(2)实验步骤中有玻璃棒搅拌的操作,其目的是使什么?,酶和反应物(果胶)充分地接触以减少实验误差
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