沈敏《酵母菌种群数量的变化》

1、1,探究“培养液中酵母菌种群数量的变化”,2,实验学习内容,3,实验原理,思考：,1、酵母菌的呼吸方式。 2、酵母菌在液体培养基中繁殖其种群数量受哪些因素影响。 3、酵母菌种群数量增长的曲线类型。,4,实验设计思路,思考：,如何设置对照实验探究“酵母菌种群数量变化”？,提示： 从影响实验室中培养的酵母菌的因素来考虑,5,实验设计思路,对照实验设置,28,5,28,培养液,无菌水,酵母菌,10,0.1,10,0.1,10,0.1,6,实验步骤,（1）向三支试管中加入培养液或无菌水,（2）向三支试管中接种酵母菌,（3）将三支试管在不同的温度下培养,（4）每天取样计数酵母菌,（5）分析数据画出曲线,

2、7,血球计数板计数,8,（1）计数工具血球计数板,实物图,正面图,侧面图,计数室,滴液处,血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。 计数时，常采用样方法。,血球计数板计数,9,（1）计数工具血球计数板,放大后的计数池,每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。 每个计数池分为9个大方格。,血球计数板计数,10,16个小格,25个小格,25X16 = 400小格,16X25 = 400小格,每个计数室（大方格）共有400小格，总容积为0.1mm3,抽样检测： 516=80个小格,抽样检测： 425=100个小格,11,血球计数板计数,思考： 1、使用1625规格时计数几个中方格中

3、的细胞数？即个小方格中的细胞数？,2、设每个中方格中的细菌数分别是：A1，A2，A3，A4，稀释倍数为：B，则样品中细胞数/ml是多少？,4个中方格，100个小方格,（A1+A2+A3+A4）/100 4000000B,12,（2）计算： 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？,13,实验数据记录,连续多天统计，每天统计多次。请设计实验数据记录表格,14,酵母菌培养： 培养液配制 灭菌 接种 培养,配制质量分数为5的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000 mL水），分装到5个烧杯中（200mL/烧杯）,用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。,接种时要在酒精灯附近，用灭菌干

4、净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意：滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）,将烧杯置于28的恒温箱中培养,无菌 操作,讨论：计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？,15,实验注意事项,1、从试管中吸取培养液进行计数前，为什么需将试管轻轻震荡几次？,2、若一个小方格内酵母菌数过多，难以数清，则如何处理？,使培养液中酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差。,将培养液稀释一定的倍数，再重新计数。,16,注意事项： 进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。 显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。

5、 若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。 本实验无对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。 血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。,实验注意事项,17,实验结果分析,18,实验结果分析,1、分析酵母菌种群数量变化趋势的原因 2、分析影响酵母菌种群数量的因素。,养料、温度、pH及有害代谢废物等,19,实验再探究 培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗？ （2008年江苏卷31题）为研究酵母菌种群密度的动态变化，某同学按下表所列条件进行了A、B、C和D 共4组实验，用1000mL锥形瓶作为培养器皿，棉塞封口，在25下静置培养，其他实验

6、条件均相同，定时用血球计数板计数。根据实验结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下。,20,例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3 ，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。,例1 :在用血球计数板（2mm2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液中有酵母菌 个。,2x107,2108,稀释,21,例3 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为01 mm3。 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 个mL。,5n105,22,利用计数板可在显微镜下对微生物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片，样品就滴在计数室内。计数室由2516400个小室组成，容纳液体的总体积为01mL。现将lmL酵