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文档简介

1、2.2.1动物细胞培养和核移植技术,选择3现代生命科学专题2细胞工程2.2动物细胞工程,教育目标,重点难点,问题回顾,教育课程,知识结构,教育反馈,课后练习,教育参考,教育目标,动物细胞培养的过程,条件和应用。简述了通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。主要动物细胞培养过程和条件。用动物的体细胞核移植技术克隆动物的过程。难点在于用动物的体细胞核移植技术克隆动物的过程。、主要困难、植物细胞工程常用的技术手段是什么?那么,动物细胞常用的技术手段是什么呢?回忆,想象,植物组织培养,植物细胞杂交,问题回顾,动物细胞工程学科:动物细胞培养,动物细胞细胞核移植,动物细胞融合,单克隆抗体生产等,

2、动物细胞培养技术是其他动物细胞工程学科技术的基础,课程,培训课程,细胞株:原代细胞一般在10岁左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到4050岁左右。这种传代细胞是细胞系。细胞株:细胞株传到50多岁后,又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的变化,在培养条件下可以无限地继承。这种传代细胞是细胞系。细胞株和细胞株的差异:细胞株的遗传物质变化具有癌细胞的特征,不能抑制接触,易于世代培养。概念,培养的第一代细胞和10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,制作细胞悬浮液,分两个以上的培养瓶进行继续培养,称为传代培养。概念,培养基,1,无菌,无毒环境(添

3、加一定量的抗生素)3,温度和PH 36.5 0.5度;PH为7.2-7.4。4.气体环境:O2和CO2(95%空气和5% CO2),合成培养基中缺乏的物质,动物细胞培养条件,(1)蛋白质生物产品生产:疫苗,干扰素,单克隆抗体等。(2)为了皮肤移植,大量获得自己的皮肤细胞。(3)用于检测有毒物质(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据,动物细胞培养技术的应用,2,为什么选择动物胚胎或幼体的器官或组织作为动物细胞培养材料?1,动物细胞培养液的主要成分是什么?什么比植物组织培养培养基更独特?3,为什么在培养前要将组织细胞分散为单个细胞?4,动物细胞培养像绿色植物组织培养一

4、样,最终能培养成新的个体吗?主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。独特之处有1,液体培养基2,成分有动物血清等。这些组织或器官的细胞生命力旺盛,分裂能力强,快速繁殖,培养无病毒植物等,培养目的,葡萄糖,动物血清,甘蔗,植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养核仍然是全能的:因为核包含维持物种遗传性所需的所有基因,并且没有因细胞分化而失去基因,所以高度分化细胞的核仍然是全能的。再想想,动物体细胞核移植技术,动物细胞核移植:将动物一个细胞的细胞核移植到已经消除细胞核的卵母细胞中,重新组装,发展成新的胚胎,牙齿新胚胎最终

5、发展成动物个体。通过核移植获得的动物。克隆动物:记忆,供体细胞(细胞核用),细胞培养,体细胞,卵巢卵母细胞(M中期:供应摘要: 1)核移植和胚胎移植2。以卵细胞为受体细胞的原因是:牙齿最大的细胞,所以容易操作,发育可以直接表达形态,同时为细胞核的多能性表达提供物质基础3。严格地说,新个体具有卵母细胞的细胞质,因此两个茄子亲本的性状、核移植过程、核移植过程克隆动物的研究意义,1。克隆动物作为生物反应器生产医用蛋白质。2。动物品种改良3。治疗人类疾病,4作为捐赠者。保护濒危动物,体细胞核移植技术的问题,1。很多克隆动物体型过大,出现异常肥胖、发育困难、免疫不平衡等遗传和生理缺陷2。成功率很低,克隆

6、动物食品的安全性问题。知识结构,动物细胞培养和核移植技术,动物细胞培养,细胞培养的应用和概念,细胞培养过程,细胞培养条件,细胞培养技术的应用,动物体细胞核移植技术和克隆动物,核移植技术和克隆动物的概念,体细胞核移植技术的过程,体细胞核1。在动物细胞培养过程中,遗传物质发生变化的细胞()A细胞株b细胞株c原代细胞D传代细胞,2,动物细胞工程技术的基础是- () a .动物细胞融合b .单克隆抗体c .胚胎移植D .动物细胞培养,A,D,3 d B .动物细胞培养无需在无菌状态下进行。c .动物细胞可以代代培养,但植物细胞不能培养。d .动物细胞可以大量培养,但植物细胞只能培养植物。a、教育反馈、

7、1。动物细胞培养要经过脱分化吗?为什么?2.用体细胞核移植方法生产的克隆动物对体细胞供应体动物进行了100%的克隆吗?为什么?课后练习,教育参考,1 .在动物细胞传代培养时,用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间物质主要是什么成分。胃蛋白酶可以吗?细胞之间的成分主要是蛋白质。适合胃蛋白酶的PH值约为2,PH6牙齿,胃蛋白酶就会失去活性。相反,适合胰腺蛋白质作用的环境PH为7.2 - 8.4,适合大部分动物细胞培养的PH为7.2 - 7.4,胃蛋白酶在牙齿环境中没有活性。胰蛋白酶在牙齿环境中活性高,因此胰蛋白酶适合细胞培养时消化。胰蛋白酶真的不能消化细胞吗?为什么?胰蛋白酶不仅能消化细胞间蛋白质,而且长

8、时间的作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞造成损伤,所以要好好调节胰蛋白酶的消化时间。3.单细胞培养:1957年,科学家使用胰蛋白酶消化处理和液体培养基应用方法进行了单细胞培养。单层培养法的出现对细胞培养的发展起到了很大的促进作用。4。为什么培养动物细胞时通常要添加血清?血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白质是白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本成分,有些动物细胞不能合成,必须在培养液中提供。激素促进胰岛素,生长激素等细胞的生长,增殖,附着。因此,细胞培养必须使细胞顺利生长和繁殖,一般要添加10%-20%的血清。5.无血清培养:在科学研究中,有时需要明确定义培养液的成分,血清中含有很多未知的成分,会影响研究结果,因此可以在细胞培养中使用无血清培养。无血清培养基是在基本培养基中添加

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