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文档简介
1、肠道病原菌的分离与鉴定三,肠道病原菌的分离鉴定(3) 细菌的药敏实验结果观察 厌氧菌培养法及厌氧菌生长状态 小白鼠感染肺炎球菌实验结果观察 细菌致病性试验,双糖铁培养基的制备,成分:脲 胨、乳 糖、蛋白胨、葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、硫代硫酸钠、琼脂、蒸馏水、酚红水溶液 制法:加热溶解校正pH为7.2,然后加入0.4酚红水溶液,分装试管,高压灭菌,使成为底层较深的斜面。 用途:初步鉴别肠道致病菌用,可以观察葡萄糖、乳糖的发酵,并可观察有无H2S产生及细菌有无动力。,原理,该培养基中只加少量的葡萄糖与较多量的乳糖。细菌分解糖类产酸可使培养基局部指示剂改变颜色。当分解葡萄糖的细菌在斜面上生长时,产生
2、的酸少,又在有O2的情况下氧化,生成CO2和H2O,失去改变局部酸碱度的作用,所以培养基斜面部分不变色。但当细菌分解乳糖时产生酸量较多,故培养基斜面部分可变色。细菌在高层中生长时,因处于无O2状态,产生的酸不分解,故使高层部分培养基指示剂变色。硫酸亚铁可与产生的H2S作用,生成FeS使培养基变黑。硫代硫酸钠是一种还原剂,防止培养基中氧化物与H2S作用而影响FeS的生成。,生化反应结果观察,血清学鉴定,(1)沙门氏菌属 取一载玻片与沙门氏菌属、群、型血清做玻片凝集试验。 取可疑培养物,先与A-E群沙门氏菌多价O血清做凝集试验,阳性者认为该菌属于沙门氏菌属。 用沙门氏菌属各群特有的单价O因子血清做凝集反应,可判定其属于沙门氏菌属何群。 用该群内各菌所特有的H因子血清作玻片凝集反应,可最后判定为何种菌。,主要沙门氏菌抗原结构表,厌氧培养法,材料:厌氧罐、厌氧气袋、钢丝绒、厌氧手套箱、干燥皿、焦性没食子酸等。 方法:厌氧菌的培养方法种类较多,总体上可以分为三大类:物理法、化学法和生物耗氧法。 1、物理法:厌氧罐培养法、厌氧气袋
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