专题1《基因工程》.ppt

1、专题1基因工程.基因工程的概念，牙齿技术是在体外对DNA分子进行人工“切割”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重组，然后导入受体细胞进行无性繁殖，在受体细胞内表达重组的基因，创造出人类需要的基因产物。(DNA重组技术)，1，基因工程的基本操作工具，识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，切断每条链特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。主要是从原核生物中分离出来并精制的酶化学本质，即蛋白质。(阿尔伯特爱因斯坦，原核，原核，原核，原核，原核，原核)，1，来源：3，作用：4，结果：两个茄子末端形成，“分子手术刀”限制酶，目的，g a t t c，限制酶切割分子图表，粘性末端相同，粘性末端不同，遗传工程学

2、科问题解释：1，限制酶识别序列的方向：限制酶识别序列是指5 - 3链的碱基序列。2，对限制酶特异性的理解：一般但在几个茄子特例中，徐璐不同限制酶识别相同的碱基序列，触点相同。例如：BamH，Bst都识别GGATCC序列。其他限制酶切割DNA分子后，发生相同的粘性末端。示例：BamH识别GGATCC序列，并且触点位于G和G之间。Bgl标识a和g之间有触点的AGATCT。粘性末端都是ACTAG和GATC。少数限制性酶能识别一个或多个碱基序列。Isoschizomers (isoschizomers)的一些其他来源的限制性内切酶识别和切割相同的序列，这种限制性内切酶称为同立酶。同立酶形成相同的切割，

3、形成相同的端，切片酶获得的DNA片段连接后形成重组序列，仍然可以被原始限制酶切割。(威廉莎士比亚，哈姆雷特，酶，酶，酶，酶，酶，酶)同立酶之间的性质不同(例如离子强度，反应温度，对甲基化碱的敏感性等)。Isocaudomers (isocaudomers)一些其他限制性酶具有不同的识别和切割顺序，但可以产生相同的粘性末端。这种限制性内切酶称为同工酶。但是由两个同工酶切割形成的DNA片段连接后形成的重组序列不能被原始限制酶识别和切割。回声定位和萝卜属同工酶。“分子缝合针”连接酶，角色：连接磷酸二酯键而不是氢键。EcoliDNA连接酶：连接粘性末端，T4DNA连接酶：连接粘性末端和末端，DNA连接

4、酶的种类，3 .DNA连接酶的作用部位：脱氧核糖核酸链相邻的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯连接、DNA连接酶和DNA连接酶非特异性连接有两个。一种是催化互补的粘性末端连接，另一种是催化扁平末端连接。只要有相同的粘性末端、平端DNA连接酶，就能催化连接，与切割限制酶无关。双链，单链，两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，在现有核酸片段中添加单脱氧核苷酸，形成磷酸二酯键，就能形成磷酸二酯键。DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点是什么？“分子运输车”载体，1。载体的必要条件可以自行复制或进入受体生物细胞，在受体生物细胞内复制和表达。有一个或多个限制酶切割部位，可以插入外源DNA片段。具有重组DNA的鉴定和选

5、择的特定标记基因。，2 .向量的种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。3 .常用的载体：质粒，一般来说，天然载体往往无法满足人类的所有需要，所以人们根据不同的目的和需要人工改造一些天然载体。常见的标记基因包括抗生素抗性基因、生产特定颜色的标记产品基因、发光基因等。作为载体，必须至少有一个限制酶触点，每个酶最好只有一个触点。某些限制性内切酶只能识别一个点，因此如果矢量有一个或多个酶接触，片段重组后可能会丢失一些片段，如果缺失的片段包含复制起始区域，那么进入受体细胞就不能自行复制。如果一个矢量只有某种限制性内切点，就可以切酶接受外部DNA片段，不丢失自己的片段。(约翰f肯尼迪，美国电视电视剧，成功)注意

6、细胞膜的载体之间的差异，两者的化学本质和作用都不同。质粒可以在自身细胞、受体细胞内、体外进行自我复制。1，对限制性内切酶的下一个说法是()A，限制性内切酶在多种生物中广泛存在。但是微生物中几乎没有B。限制性内切酶是特定核苷酸序列C，其他限制性内切DNA后形成粘性末端D，限制性内切酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键。b，2 .质粒未被选为基因载体的原因是()A，可克隆B，多个限制酶切口C，标记基因D，环状DNA，D，3。右边是DNA分子结构图，对牙齿图的准确描述是，A的名字是细胞素脱氧核苷酸B解体酶的作用部位是C母限制性核酸内切酶。BD，4下图显示DNA分子在其他酶作用下发生的变化，限制性核酸内

7、切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、海选酶作用的正确顺序是()，A B C D，C，5可用于重组DNA技术的酶是ADNA。分析：DNA重组技术使用DNA聚合酶(目的基因的扩增，如PCR)、限制性核酸内切酶(目的基因的切割和载体的切割)、DNA连接酶(目的基因和载体的连接)和逆转录酶(目的基因的获取)。对ABCD，6以下限制性内切酶识别的叙述不准确。 A从反应类型来看，限制性内切酶是水解反应B限制性内切酶的活性受温度、pH的影响。c限制性内切酶是双链DNA的特定脱氧核糖核酸序列D限制性内切酶识别序列越短，DNA发生的概率就越低。原核生物没有染色体。质粒可以是基因工程的载体，但染色体是渡边杏的。7(

8、2010年南京三毛)对下一条染色体和质粒的叙述是，A染色体和质粒的化学本质都是DNA B染色体和质粒都只存在于原核细胞中。c染色体和质粒都可以用与生物遗传相关的D染色体和质粒作为基因工程的共同载体。c，9，限制酶是核酸切割酶，可以识别和切割DNA分子。下图显示了四个茄子限制酶BamHI、EcoRI、Hind和Bgl识别序列。箭头表示每个限制性内切酶的特定切割部位，其中两个限制性内切酶切割的DNA片段末端能徐璐粘合吗？(阿尔伯特爱因斯坦，美国电视电视剧，成功)正确的结束互补序列是什么？A.BamHI和EcoRI；结束互补序列AATT B. BamHI和Hind；结束补充序列GATC C. Eco

9、RI和Hind；端互补序列AATT D. BamHI和BglII；端互补序列GATC，D，10，用DNA连接酶切限制性酶(识别序列和切点为- GATC -)，然后切质粒和限制性酶(识别序列和切点为-GG ATCC-)。然后用限制酶E切割DNA分子长度为1.5kbp的目的基因。然后将DNA连接酶连接到重组质粒，使其扩增。活性限制酶B，E，H切割克隆的重组质粒，分离传记游泳的结果如图所示。同时使用限制酶B和限制酶H完成了重组质粒切割，结果片段长度(kbp)预计为A.2.0，3.0，1.0，3.5 D.2.5，3.0，0.5，0.5，0.5 C.3牙齿。2.0，0.5，1.0，1.5，1.5，1.5

10、，CD，2，基因工程的基本操作程序例如，与生物应激抵抗相关的基因，与生物优秀品质相关的基因，与药物和健康食品相关的基因，目前广泛提取的目的基因包括苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因(抗病毒、抗细菌)、胰岛素基因等。1 .基因的结构，(1)原核基因结构，编码区，非编码区，非编码区，编码区上游，编码区下游，编码蛋白Atgtgcacgtagta，tacacgtgcatcaat，RNA聚合酶，AUGUGCACGUAGUUA没有启动子，基因就不能转录。RNA聚合酶：可以识别启动子中的结合部位，并识别结合的蛋白质。终止符：基因末端的特殊DNA片段阻碍了RNA聚合酶的移动，从DNA模型链中取出，终止转录。编码

11、区域，非编码区域，非编码区域，真核细胞的编码区域有间隔，不连续。真核生物基因结构，埃克森：真核细胞基因DNA的编码序列被转换成RNA，并翻译成蛋白质。内含子：真核细胞基因DNA的肝脏序列转换成RNA，但没有翻译就中断了。，在基因文库中寻找，聚合酶链式反应(PCR)扩增，化学合成法，目的基因的核苷酸序列未知，目的基因的核苷酸序列已知，(1)获得目的基因的一般方法是什么？早期目的基因的袁泉，1 .直接从生物学中获得，2 .人工合成，注意：为了保持基因的完整性，1、为了从基因库中获取目的基因，将包含某种生物其他基因的很多DNA片段导入受体菌。每个受体菌都包含牙齿生物的不同基因，称为基因，关于目的基因

12、的信息，例如，根据基因核苷酸序列基因的功能基因，染色体上位置基因的前产物mRNA基因翻译产物蛋白等特性。需要建立基因库吗？未知目的基因序列的概念：PCR全部_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _体外，特定DNA片段，利用PCR扩增目的基因，知道目的基因序列，方法：_ _ _方法扩增A，跨性别(90-95):双链DNA模板通过热作用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _方法扩增，C，扩展(70-75):在Taq酶的作用下，合成与模板互补的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。氢键、单股DNA、双股、

13、DNA链、3。人工合成，根据已知的氨基酸序列，DNA，蛋白质的氨基酸序列，mRNA的核苷酸序列，结构基因的核苷酸序列，推测，推测，目的基因，化学合成，质粒，目的基因，限制酶处理，一个切口两个粘性末端，两个切口，目的基因过程，2，基因表达载体的构成核心，限制酶切割部位的选择必须保证目的基因，A，目的基因稳定存在于受体细胞中，并遗传给子成分，B，同时让目的基因表达并发挥作用，作为基因工程学科表达载体，只要包含目的基因就能完成任务吗？(威廉莎士比亚，基因，基因，基因，基因，基因，基因，基因，基因，基因，基因)，2，基因表现载体的作用，3。基因表现向量的构成：他们的作用是什么？A，目的基因，B，启动子

14、，C，终结器，D，标记基因，3，如果目标基因是从基因组库中获得的，那么目标基因本身已经包含了启动子，终结器，因此在构建表达向量的时候，不需要添加启动子，终结器。目的基因从部分基因库中获得，目的基因本身没有启动子，终止者，因此，在构建表达体时，需要添加启动子，终止者。4，断代酶法和双节酶法，断代酶法是用相同的限制性酶切割含有目的基因的DNA片段和载体，形成相同的粘性末端，用DNA连接酶重组DNA。集体酶切后，目的基因前后各有互补的粘性端，因此两个牙齿互补的粘性端引起碱基互补性对，使目的基因前后连接，形成自我连接、自我循环化。同一质粒在DNA连接酶的作用下也前后相连，形成自我连接。(威廉莎士比亚，哈姆雷特，DNA连接酶，DNA连接酶，DNA连