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文档简介
1、血清ALT活性测定,吴占波、陈旻赉、刘仲春、陈军武,实验目的,生理作用 单位意义 测定方法 临床意义,卡门原理,ALT 丙氨酸+a-酮戊二酸 丙酮酸+谷氨酸 NADH+H 乳酸脱氢酶 NAD +乳酸 1ml血清 340nm波长 1.0cm比色 25 C 1min 光密度下降0.001,实验原理,ALT 丙氨酸+a-酮戊二酸 丙酮酸+谷氨酸 OH 丙酮酸+2,4二硝基苯肼 丙酮酸2,4二硝基苯腙+H2O 反应30min 在520nm,试剂,ALT底物液 PH=7.4磷酸缓冲液 丙酮酸标准液 2，4-二硝基苯肼溶液 0.4mol/LNaOH,实验操作,1.绘制标准曲线 2.酶活性测定,混匀，放置1
2、0分钟，以蒸馏水调零，用520nm波长比色，读取各观密度。各管的光密度An减去0管（A0），以光密度差值（An-A0）为纵坐标，活性单位为横坐标。,酶活性测定：去两只表明测定管T及对照管C,测定前将底物液在37 C水浴中预温5min,混匀，放置10min，用520nm波长比色，读数，用AT-AC差标准曲线，及待测血清中ALT的酶活性 参考值 525卡,临床意义,在肝脏疾病时，ALT的浓度会升高，机体各组织都有，肝脏中丙氨酸代谢最旺盛，含量最多发病时活性和含量均升高,注意事项,赖氏法标准曲线只到97卡门氏单位，启活性与吸光度有良好的线性关系，超过时，应将血清稀释测定 A-酮戊二酸也能与2,4-二硝基苯肼产生苯腙，两种吸光度在520nm出吸光度差异大，空白管的吸光度应不超过0.015,思考题,1终止法 2赖氏与卡门的联
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