蛋白质连接技术课件

1、蛋白质连接技术,1,学习交流PPT,蛋白质交联系指将小分子物质（如药物、半抗原等）或大分子物质(如酶、蛋白毒素等)以共价键的方式连接于蛋白质分子，以制备人工抗原、酶标抗体、载体释放药物、抗体导向药物和免疫毒素等。,2,学习交流PPT,交联方法,游离氨基 游离羧基 苯基 酚基 巯基 羟基 咪唑基 吲哚基 胍基,3,学习交流PPT,重氮化法： 蛋白质 连接分子 酚羟基的邻位、咪唑环、吲哚环 含芳香胺的化合物,副反应多，故一般限于人工抗原的制备,4,学习交流PPT,戊二醛法：连接两个伯胺,最温和的交联反应之一，可在440温度范围，pH6.08.0的缓冲水溶液中进行，但是缓冲组份中不得含有氨基化合物，

2、本交联方法易形成相同蛋白间的连接；产物的均二性较差。因此，多用于酶标抗体的制备。,5,学习交流PPT,过碘酸盐氧化法：,蛋白质 连接分子 氨基 邻二醇,比较温和，可在常温和中性pH的条件下进行,6,学习交流PPT,混合酸酐法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羧基,7,学习交流PPT,碳二亚胺法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羧基,由于碳二亚胺的缩合反应没有选择性；易形成蛋白分子间的自身聚合，产生非均一性产物；先将含羧基的药物或半抗原分子与EDC反应，活化羧基后，再加入蛋白反应物，可以减少蛋白分子交联,8,学习交流PPT,活泼酯法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羧基,9,学习交流PPT,多元酸酐法：,蛋

3、白质 连接分子 伯氨基 氨基、羟基,10,学习交流PPT,二异氰酸酯法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 氨基,11,学习交流PPT,偶氮苯甲酸法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 苯基,12,学习交流PPT,O羧甲基羟胺法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 酮基,13,学习交流PPT,对-肼基苯甲酸法：,14,学习交流PPT,叠氮化法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羧酸甲酯衍生物,15,学习交流PPT,氯乙酸钠法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羟基,16,学习交流PPT,亚胺酸酯法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 氨基,17,学习交流PPT,卤代硝基苯法：,蛋白质 连接分子 氨基、羟基、巯基 氨基、羟基、巯基,18,

4、学习交流PPT,Mannich反应法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 酮、酚类,19,学习交流PPT,苯醌法：,蛋白质 连接分子 氨基、羟基、巯基 氨基、羟基、巯基,20,学习交流PPT,E11man试剂法：,两分子蛋白的连接,E11man试剂即55二硫2，2双硝基苯甲酸(DTNB)，该试剂可以与巯基作用,21,学习交流PPT,马来酰亚胺基类活泼酯法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 巯基,22,学习交流PPT,SPDP试剂法：,异型双功能交联剂N-羟基琥珀亚胺基-3(2-吡啶基二硫)丙酸酯(SPDP),蛋白质 连接分子 伯氨基 巯基、氨基,23,学习交流PPT,苯丁酸氮芥衍生物法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 氨基,24,学习交流PPT,卤代乙酰衍生物法：,连接基团：氨基、巯基,25,学习交流PPT,双马来酰亚胺试剂法：,连接两个巯基,26,学习交流PPT,三氯三嗪试剂法：,蛋