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文档简介

1、实验五 细菌的芽孢染色法,主讲教师：雒晓芳,实验目的,学习并掌握芽孢染色法 初步了解芽孢杆菌的形态特征,实验原理,芽孢：芽孢又叫内生孢子，是某些细菌生长到一定阶段（环境中缺乏营养及有害代谢产物积累过多时），在细胞内形成一个圆形或椭圆形厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。 芽孢的存在和特点是细菌分类与鉴定的重要形态学指标； 是衡量各种消毒灭菌手段的重要指标。,芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。 芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用一弱碱性染料，如孔雀绿或碱性品红在加热条件下进行染色时，此染料不仅可以进

2、入菌体，而且也可以进入芽孢，进入菌体的染料可经水洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如沙黄）或衬托溶液（如黑色素溶液）处理，则菌体和芽孢易于区分。,实验器材,菌种：枯草芽孢杆菌 染色剂：5孔雀绿水溶液，0.5番红水溶液 器材： 接种环，酒精灯，载玻片， 擦镜纸、显微镜等。,操作步骤,1、涂片：将培养24小时左右的枯草 芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。 用接种环挑取试管底部菌种于洁净载玻片上，涂成薄膜，然后将涂片通过火焰3次温热固定。,细菌涂片的制备过程,孔雀绿染色 加热(5-10min) 水洗脱色 染液切勿干涸 番红复染 (35min) 水洗 镜检 芽孢呈绿色，芽孢囊及营养体为红色,注意事项,1菌液要浓； 2选用适当菌龄的菌种； 3加热染色时必须维持在染液微冒蒸汽状态,实验结果,游离芽孢,芽孢,菌体,枯草芽孢杆菌,巨大芽孢杆菌,六、实验报告,1绘图 枯草芽孢杆菌的芽孢形状、 大小、 着生位置及染色结果

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