药典动态与药品制剂质量研究及原始记录常见问题讨论+--余立大连.ppt

1、药典动态与药品制剂质量研究及原始记录常见问题讨论,余立 ,建立标准时要考虑的问题,Growth,2008 2007 2006,2005 2004 2003,2002 2001 2000,常见研究误区以及供参考的经验和体会,新版药典动态对药品制剂质量研究的影响,研发原始记录中常见问题及改进建议,主要讨论内容,辅料、其他成分干扰,杂质研究更偏重降解产物,剂量均匀性,药品制剂研究的特点,制剂学质量特点,1,4,3,2,药用辅料的增修订情况及要求,1、新增附录附录 药用辅料 对药用辅料进行定义、分类，对其生产、贮存、应用等提出原则性要求 2、正文收载的药用辅料 共收载132个品种（新增62个、修订52

2、个） 05版收载的三氯甲烷为二类毒性有机溶剂，删除 安全排在首位（毒性杂质、微生物重金属污染） 3、注射用辅料质量、未收载的药用辅料 附加标准，与药用成分的质量协调性,辅料对测定的干扰,1、鉴别 （IR,UV,化学反应） 2、有关物质 3、溶出度 4、含量测定,药典附录变化提示 钠盐的鉴别反应,重金属检查法： pH测定法： 不溶性微粒检查法： 可见异物检查法： 渗透压摩尔浓度：,药典附录变化提示 锌盐的鉴别反应,重金属检查法： pH测定法： 不溶性微粒检查法： 可见异物检查法： 渗透压摩尔浓度：,重新做考察:取样量,辅料干扰,延伸-环境友好,辅料影响的排除-有关物质检查,前沿色谱峰，易排除 少

3、峰，可定位，能排除 多峰，难定位，不能排除,辅料对测定的干扰,辅料对测定的干扰,1、避免使用 （辅料或方法） 2、不排除可以（默认或校正） 3、排除辅料干扰方法要明确、易重现、具 可操作性、配混合液 4、保证特定杂质（最具代表性降解产物） 检出效果-不得已的最后一招,辅料对测定的干扰,溶出度 不排除可以默认（2.0） 修正（溶出测定值、限度） 自身对照法,制剂通则变化几个重点提示,修订的12种制剂通则（共20种） 片剂 注射剂 眼用制剂 酊剂 胶囊剂 丸剂 颗粒剂 糖浆剂 气雾剂 粉雾剂 喷雾剂 凝胶剂 鼻用制剂 搽剂 涂剂 涂抹剂,片剂制剂通则变化几个重点提示,1）含片定义：系指含于口腔中缓

4、慢溶化（解）产生（持久）局部或全身作用的片剂 含片的溶化性照崩解时限检查法（附录 A）检查，除另有规定外，10分钟内不应全部崩解或溶化。 2005年版：含片照崩解时限检查法（附录 A）检查，除另有规定外，30分钟内应全部崩解。 质量标准正文中： 其他 应符合片剂项下有关的各项规定（附录 A）。,片剂制剂通则变化几个重点提示,2）分散片的【分散均匀性】：检查法：取供试品6片，置250ml烧杯中，加1525的水100ml，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛。 2005年版： 取供试品2片，置201 的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛。,口服固体制剂溶出度,使用范围：崩解速度不能代

5、表溶出速率 溶出条件选择常见错误：为溶出而溶出，吸收部位不匹配，分辨力不强 测定方法选择的误区：向含量测定靠拢。精密、准确是相对的,新版药典有关溶出度的变化,小杯法正在被淘汰！ 体外模拟，灵敏度高的测定方法，比色池调整 沉降篮使用与否要求标准写明！ 检验者判断不一，使用与否差异大，研发决定 “可” “应” “照”,溶出仪器装置的选择,首选篮法和桨法，小杯法是最后的方法，沉降篮使用与否由研发者决定 不推荐使用非法定或非标准溶出（释放度）装置 如果剂型特殊，必须采用专门的溶出装置，应提供详细的认证，充分评价其必要性和质量可控性，质量可控性包括其他质控实验室的可操作性，研究人员在选择溶出试验方法时应

6、考虑这个因素。 总之，应有非常充足的理由！,溶出介质的选择,通常，应使用水相的溶出介质。不需严格模拟体内胃肠道环境（如胃液或肠液的组成），但应基于药物的理化性质，在口服后制剂可能经历的体内环境的范围内，尽可能合理地选择试验条件。 篮法和桨法的溶出介质体积应在5001000ml，现质量标准中常用900ml。但1000ml的体积更规整、易于操作、有利对照品溶液的设计并方便计算。,溶出介质的选择,溶出介质的选择,水、盐酸溶液、醋酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液 日本橙皮书、各种体质和状态、漏槽条件 用水作溶出介质时应谨慎处置，PH值和表面张力会因水的来源不同而改变，在试验过程中也可能由于药物的影响或者溶解的

7、二氧化碳而有所改变。因此，只有其变化对药品溶出特性的影响进行相应验证并表明不受其影响后，才可用水作溶出介质。,四、推荐的溶出介质,pH值在1.02.2范围内推荐使用盐酸溶液 pH值在3.8左右推荐使用醋酸盐缓冲液 pH值在7.2 8.0范围内推荐使用磷酸盐缓冲液 更高pH值应充分阐述依据,溶出介质的选择,三、试验条件,对于难溶性药物，建议应首先对药物的成盐形式或晶型等进行研究，预期获得更佳的药物特性。在特殊的情况下，可以考虑加入： 表面活性剂-聚山梨酯2080、十二烷基硫酸钠等 （0.5%） 有机溶剂（沸点、毒性，5% ） 酶（活性表示） 对这些添加剂进行评价（浓度，耐用性）,溶出介质的选择,

8、三、试验条件,篮法的搅拌速度一般：50100rpm 桨法的搅拌速度一般：5075rpm。 小杯法的搅拌速度一般：3550rpm FIP指导原则认为桨法75rpm更能代表仪器的可靠搅拌能力,溶出条件的选择,眼用制剂通则变化重点提示,1）定义：系指直接用于眼部发挥治疗作用的无菌制剂。 2）基本分类等文字修改 3）【渗透压摩尔浓度】【无菌】均为必检项目 删去了【微生物限度】检查 产品的工艺处方设计、生产环境的升级、供检样品的数量都要随之改变,注射剂品种收载及增修订品种数量,未修订品种,2005年版收载346个（248注射液98粉针）,注射剂品种增修订项目,增订HPLC鉴别：64个品种 增订TLC鉴别

9、： 11个品种 增订IR鉴别： 6+1个品种(+1原有) 增订细菌内毒素检查：86个品种 热原改细内：27个品种 增加降压物质的品种：3个 增加过敏反应的品种：4个 增加异常毒性的品种：9个 增订渗透压：25个品种 增加颜色或溶液的颜色的品种：9个 增加澄清度或溶液的澄清度的品种：7个 头孢类增订高分子聚合物的品种：6个（老品种） 增订5-羟甲基糠醛的品种：7个,注射剂制剂通则变化重点提示,1）除另有规定外，静脉输液应尽可能与血液等渗。 之前为静脉输液的一般要求，新版要求此项为静脉输液品种必设必检项目，包括氯化钠注射液 （例外：葡萄糖注射液不检） 【渗透压摩尔浓度】 除另有规定外，静脉输液及椎

10、管注射用注射液按各品种项下规定，照渗透压摩尔浓度测定法（附录 G）检查，应符合规定。,【渗透压摩尔浓度】的表述形式,例1：己酮可可碱葡萄糖注射液（等渗） 渗透压摩尔浓度 取本品，依法测定（附录 G）毫渗透压摩尔浓度应为260320mOsmol/kg。 例2：甘油果糖氯化钠注射液（高渗） 渗透压摩尔浓度 取本品，依法检查（附录 G），本品的渗透压摩尔浓度比应为6.57.5。,渗透压摩尔浓度检查项的研究与标准制订,注意仪器的线性范围 浓溶液可以适当稀释但结果不能简单乘以稀 释倍数 出具报告要注明稀释情况！ 小容量注射液增订渗透压的目的？ 胶体渗透压 滴眼液的渗透压,注射剂制剂通则变化重点提示,2）

11、注射剂所用的原辅料应从来源及工艺等生产环节进行严格控制并应符合注射用的质量要求（热原或细菌内毒素、无菌等应符合要求）。 纯度要高、杂质要少、生物负荷要低 从源头控制杂质的数和量、染菌的数和量、热原或细菌内毒素,Click to edit title style,杂质控制,微粒控制,安全性 控制,注射剂所用的原辅料应从来源及工艺等生产环节进行严格控制并应符合注射用的质量要求。,标准 增项,杂质谱的比较,供注射用原料质控重点应在制剂申报资料中体现！,供注射用原料可见异物检查,头孢他啶： 取本品5份，每份3.0g，加1%碳酸钠溶液（经0.45m滤膜滤过）溶解，依法检查（附录 H），应符合规定。 头孢

12、地嗪钠： 取本品5份，每份2.0g，分别加微粒检查用水溶解，依法检查（附录 H），应符合规定。,有些品种如碱性药物与玻璃容器久置起反应，产生白点、白块和玻璃屑 有些品种如甲硝唑等与重金属发生反应产生不溶物 有些品种如喹诺酮类药物对金属设备产生腐蚀，易有金属屑 有些品种如胰岛素等提取的生化大分子易产生蛋白沉淀 有些品种如头孢噻肟钠等成盐不完全，溶解度太低，产生白点、白块,引发不合格的部分原因,控制生产环境和过程中的污染-外源异物 考察药物与容器的兼容性-内源异物 考察活性成分的稳定性以及与溶剂/添加物的稳定性-内源异物 药品的质量源于设计 是什么？从哪里来？为什么去不掉？安全性如何？限度多少合适

13、？,可见异物检查的目的,供注射用原料不溶性微粒检查,头孢他啶： 取本品3份，加1%碳酸钠溶液（经0.45m滤膜滤过）溶解制成每1ml中含30mg的溶液，依法检查（附录 C），每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000个，含25m以上的微粒不得过600个。 头孢曲松钠： 取本品3份，加微粒检查用水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法检查（附录 C），每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000个，含25m以上的微粒不得过600个。,供注射用的原料药增加不溶性微粒检查以保证制剂能符合注射剂的要求 由于光阻法测定结果仅与一定浓度范围内样品溶液成正比，故标准给出了不溶性微粒检查供试品溶液浓度

14、制剂最多有11个规格，均按每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000粒，含25m以上微粒不得过600粒；,强化不溶性微粒等项目控制,强化不溶性微粒等项目控制,供注射用原料不溶性微粒检查,可见异物/不溶性微粒检查,原始记录问题 不详细 无趋势 缺方法摸索及分析 原始记录建议,注射剂制剂通则变化重点提示,3）供注射用的非水性溶剂，应严格限制其用量，并应在品种项下进行相应的检查。 除植物油外，其他还有乙醇、丙二醇和聚乙二醇等 2010年版药典中收载了几十个非水性溶剂注射剂，仅有几个在标准中增订了非水性溶剂的含量测定,注射剂制剂通则变化重点提示,比如：依托咪酯注射液为依托咪酯加1，2-丙二醇制成的灭

15、菌水溶液。标准中增订“1，2-丙二醇”检查项，采用GC法测定含量，规定“每1ml中含1，2-丙二醇应为315mg385mg”。 硝酸甘油注射液为硝酸甘油的灭菌无水乙醇溶液。标准中增订：“乙醇量”检查项。按一部附录 M方法测定，规定“应为90.0% 110.0%（ml/ml）”,增设有效项目指标-甲氧基苯胺值,含不饱和脂肪酸的品种增加甲氧基苯胺值检查多烯酸乙酯（P272） 含有不饱和脂肪酸的药物在生产和贮藏过程中易被氧化，初级氧化产物一般不稳定，又可进一步生成醛类等化合物，而甲氧基苯胺值（也称p-茴香胺值）就是ISO推荐的一种对此类降解产物进行评价的手段，欧洲药典附录2.5.36收载了此测定方法

16、。药物的甲氧基苯胺值越高，说明其劣变程度越严重。 测定原理：甲氧基苯胺与醛反应生成醇胺，醇胺脱水生成的醛亚胺可采用紫外-可见分光光度法在350nm波长处测定。,增设有效项目指标-甲氧基苯胺值,注意： 甲氧基苯胺试剂为无色结晶，具有一定毒性，使用时应避免接触皮肤，一旦失误，需用水冲洗15分钟以上。甲氧基苯胺的冰醋酸溶液不稳定，需当天配制使用。以异辛烷作空白做基线校正时，如果测得的甲氧基苯胺冰醋酸溶液的吸光度超过了0.2，则需重新配制试剂。 供试品溶液中加入0.25的4-甲氧基苯胺冰醋酸溶液后应注意避光，在350nm波长处的吸光度随时间的延长缓慢增加，需准确放置10分钟后测定，尽量减小误差。 本试

17、验受水分影响较大，样品及试剂中水分的存在会导致反应不完全，测定值偏低，当样品中水分含量超过0.1%时，可按10g样品加12 g无水硫酸钠的比例脱除水分后测定。另外，应取用新开启包装的供试品。,注射剂制剂通则变化重点提示,4）配制注射剂时所用附加剂使用浓度不得引起毒性或明显（过度）的刺激。 注射剂所用辅料，在标签或说明书中应标明其名称，抑菌剂还应标明浓度；注射用无菌粉末，应标明注射用溶剂（加有抑菌剂的注射剂，在标签中应标明所加抑菌剂的名称与浓度；注射用无菌粉末，应标明所用溶剂）,例如：盐酸林可霉素注射液中添加苯甲醇 人类红血球悬浮液接触到浓度低于80 mM （约为8.6512 mg/ml）的苯甲

18、醇时，在37，60分钟内极少或不会发生溶血。当苯甲醇浓度高于80 mM 时，溶血作用则会增加。 对于体内醇类脱氢酶水平低下者、因基因多态性而显性表达醇类脱氢酶2（ADH2）为3个等位异构体ADH21; ADH22; ADH23者均很容易因血浆中苯甲醇的浓度蓄积增高并使其毒性随之增加。,注射剂中添加物（如防腐剂）的控制,人类红血球悬浮液接触到浓度低于80 mM （约为8.6512 mg/ml）的苯甲醇时，在37，60分钟内极少或不会发生溶血。当苯甲醇浓度高于80 mM 时，溶血作用则会增加。 对于体内醇类脱氢酶水平低下等个体很容易因血浆中苯甲醇的浓度蓄积增高并使其毒性随之增加。,注射剂中添加物（

19、如防腐剂）的控制,体外试验显示：凡是含有超过9.45mg/ml苯甲醇的盐酸林可霉素注射液在加入到2%普通级家兔血红细胞混悬液中后，在2.5小时3小时内，至少会引起血红细胞变性。4小时后则会出现溶血，尤以含有20mg/ml苯甲醇的盐酸林可霉素注射液为甚，凡是未加苯甲醇者则均不会出现红细胞变性和溶血现象。,注射剂中添加物（如防腐剂）的控制,所有抑菌剂都具有一定的毒性，制剂中抑菌剂的量应为最低的有效剂量，且最终包装容器中的抑菌剂有效浓度应低于对人体的有害浓度。 中国药典2010版首次在附录中收载了“抑菌剂效力检查法指导原则”，用于测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的活性，以评价最终产品的抑菌效力，同时也用

20、于指导生产企业在制剂研发阶段进行抑菌剂的筛选。 为保证添加到制剂中的抑菌剂的量在规定范围，2010年版药典一些品种参照USP等国外药典一般将其含量控制为其处方量的80%120。,注射剂中添加物（如防腐剂）的控制,美国FDA继1982年发布了禁止给新生儿使用苯甲醇或应调整配方的警示之后，又于2008年12月在其工业指南中要求生产厂商必须依照规定，将苯甲醇等非活性成分按其在处方中作用的显著性的顺序列出并明确标示于药品标签上。 2010年版药典中盐酸林可霉素注射液（二部P729）增订苯甲醇检查项，规定“每1ml中含苯甲醇不得过9.45mg”。,注射剂中添加物（如防腐剂）的控制,注射剂制剂通则变化重点

21、提示,5）容器用胶塞要有足够的弹性和稳定性， 倒置试验结果显示：多个头孢类抗生素粉针品种可与丁基胶塞中成分相互作用形成不溶性物质 比如：注射用头孢唑啉钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢拉定 温度越高，溶液浑浊越快，溶液的澄清度超过号就易引起过敏反应,包材释放物（BHT对头孢曲松钠澄清度的影响）,包材释放物头孢曲松钠溶液的澄清度过敏,溶液澄清度不合格样品中皮肤被动过敏试验的阳性率(31.6%)远远超出合格样品的过敏试验阳性率(0%)。 过敏反应主要集中在浊度浓于2 号标准比浊液的样品中，澄清度介于1 号和2 号标准比浊液之间的样品均未引起过敏反应。因此，溶液的澄清度检查规定“不得比1 号浊度标准液

22、更浓”是必要的、合理的、有科学依据的。,2009年湖北所评价性抽验结果,包材释放物头孢曲松钠溶液的澄清度过敏,2003年10月欧盟药品评价管理局（EMEA）起草了直接接触塑料包装材料指导原则（GUIDELINE ON PLASTIC IMMEDIATE PACKAGING MATERIALS），并与2005年12月1日发布。该指导原则根据风险级别，对于直接接触原料药或制剂的塑料包材应进行哪些研究，如何在申报资料中呈现，提供了指导意见,2009年湖北所评价性抽验结果,注射剂制剂通则变化重点提示,6）除另有规定外，容器应足够透明，以便内容物的检视。 因为注射剂出厂检验可见异物会有漏检，或某些品种在

23、出厂后还会产生内源性可见异物，需要临用前在自然光下进行目视检查（避免阳光直射），如有异物，不得使用。,注射剂制剂通则变化重点提示,7）必要时应增设相应的安全性检查，如异常毒性、过敏反应、溶血与凝聚、降压物质、热原或细菌内毒素等 因为有些药物成分复杂、组分结构不清晰（如多组分抗生素动物来源提取的生化药等）、采用化学手段难于监控杂质 异常毒性：有可能污染生物毒性物质的品种（发酵） 过敏反应：有可能污染异源蛋白或未知过敏反应物质的品种 降压物质：有可能污染组胺、类组胺样物质的品种（腐败）,注射剂安全性检查,增设安全性监控项目,用化学手段不能控制组成、杂质无法控制的生物来源品种均增加了异常毒性、过敏反

24、应等动物试验：如硫酸鱼精蛋白等,硫酸鱼精蛋白,鱼精蛋白主要存在于鱼类的成熟精巢组织中，与DNA紧密结合在一起，以核精蛋白的形式存在。它是一种小而简单的球形碱性蛋白质，分子量在1万以下，由30个左右的氨基酸组成，其中2/ 3以上是精氨酸，几乎不含芳香族氨基酸。 吸光度 参照BP2008/EP6.0增订。根据本品组成，如果纯化步骤将核酸和杂蛋白均去除的话，在260280nm的波长范围内吸光度应很小，但考察结果远远超过BP2008/EP6.0所规定的0.1。,增设有效项目指标加强安全性监控,结合药品的制法和工艺特点，以及杂质的特殊性设立特色有针对性检测项目。 人尿制品增加乙肝表面抗原检查：如尿激酶、

25、尿促性素、绒促性素、乌司他丁等 重组品种增加菌体蛋白残留量、外源性DNA残留量、生物活性检测，如重组人生长激素、重组人胰岛素等。 对含有皂甙的植物提取注射剂等增加溶血与凝聚检查：如去乙酰毛花苷注射液等。,按照凡例要求，在标准中增订【制法要求】,来源于人尿或动物组织，采用提取工艺制备的供注射用的原料药或直接与伤口接触的制剂应在质量标准中增加【制法要求】，重申其生产过程的安全性要求。 供其他剂型用原料（如口服制剂）暂未在质量标准中制订【制法要求】，而由凡例作统一规范。,【制法要求】的表述形式,例1：肝素钠（动物组织提取） 本品应从检疫合格的猪或牛肠粘膜中提取，生产过程均应符合现行版药品生产质量管理

26、规范要求。生产工艺要经病毒灭活验证，并能去除有害的污染物，生产过程中应确保不被外来物质污染。 例2：尿促性素（人尿提取） 本品应从健康人群的尿中提取，生产过程应符合现行版药品生产质量管理规范要求。本品在生产过程中需经适宜的工艺方法处理，以使任何病毒如肝炎病毒和人免疫缺陷病毒等灭活。 例3：凝血酶冻干粉（直接与伤口接触的制剂） 本品应从检疫合格的牛或猪血中提取，生产过程应符合现行版药品生产质量管理规范要求。,2-乙基己酸 -内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用2-乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录2010年版药典二部（附录 L）； 如:头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多

27、酯钠、氨苄西林钠等。,2-乙基己酸 勘误： -内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用2-乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录2010年版药典二部（附录 L）； 如:头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄西林钠等。 勘误：,高聚物 凝胶色谱法（2010年版新增的19个标准）,高聚物 2010版：品种增加,方法多元化 1、 自填柱和商品玻璃柱：填料常用葡聚糖凝胶G-10（Sephadex G 10）；短柱子的使用，减少分离时间 2、 商品凝胶柱TSK-GEL G2000SWXL ：头孢地嗪（北京所） 3、ODS柱，聚合物-氨苄西林钠舒巴坦钠（浙江所) 4、柱切换（中检所

28、），实现凝胶色谱与反相色谱的统一,高聚物盐酸头孢替安聚合物分析方法的比较,Sephadex G-10系统,TSK-Gel G2000swxl系统,0.8ml/min,头孢羟氨苄高分子杂质分析图谱,Sephadex G-10系统,TSK-Gel G2000swxl系统,0.8ml/min,1 - 头孢羟氨苄；2 - 高分子杂质,标准统一、规范、明确、严谨典型项目-无菌检查方法,无菌检查是药物安全性风险控制的重要项目之一，但具体检查方法以前标准中均不给出，由检验者自己摸索。抗生素阳性菌选用不注意抗菌谱，存在试验的有效性、一次成功率等问题 对每个品种均要求经过验证，确定样品使用的最适宜方法（直接接种

29、法？薄膜过滤法），最佳溶解方式、最佳冲洗液、冲洗方式、敏感的阳性对照菌等操作关键因素，并将上述内容按统一规范格式在质量标准中单独立项表述详细。,供注射用原料无菌检查,供注射用原料无菌检查,头孢呋辛钠： 取本品3份，加1%碳酸钠溶液（经0.45m滤膜滤过）溶解制成每1ml中含30mg的溶液，依法检查（附录 C），每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000个，含25m以上的微粒不得过600个。 头孢曲松钠： 取本品3份，加微粒检查用水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法检查（附录 C），每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000个，含25m以上的微粒不得过600个。,无菌检查方法规范表述

30、方式举例,氧氟沙星氯化钠注射液： 无菌 取本品，经薄膜过滤法处理，用0.1%无菌蛋白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于500ml），每管培养基中加入0.1mol/L硫酸锰溶液1ml，以大肠埃希菌为阳性对照菌，依法检查（附录 H），应符合规定。 乙酰谷酰胺注射液： 无菌 取本品，经薄膜过滤法处理，用0.1%无菌蛋白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于100ml），以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依法检查（附录 H），应符合规定。,注射剂制剂通则变化重点提示,纯度要高、杂质要少、生物负荷要低 从源头控制杂质的数和量、染菌的数和量、热原或细菌内毒素 重点品种为营养性、无抑菌性、制剂有注射剂型 注射剂用原料注重数量

31、口服原料也要限定菌属种类（沙门氏菌）,原料药微生物限度检查,注射剂制剂通则变化重点提示,胰岛素（制剂为注射剂） 取本品0.2g,依法检查（附录 J），每1g中含细菌数不得过300个。 胰酶（制剂为口服制剂，来源于动物提取） 取本品,依法检查（附录 J），每1g供试品中细菌数不得过10000个，霉菌和酵母菌总数不得过100个。并不得检出大肠埃希菌；每10g供试品中不得检出沙门菌。,原料药微生物限度检查,增设有效项目指标加强安全性监控,成分复杂、杂质无法控制但质量与颜色相关度高的品种增加溶液的颜色，如糜蛋白酶等。,溶液颜色检查的目的,溶液 颜色,自身 性质,纯度,杂质 含量,-简易、直观、快速、综

32、合的对有色杂质进行检查,稳定性差,质量与颜色联系紧密的,安全性要求高,用仪器定量测杂质困难,注射剂 用原料,仅在紫外 区查杂质,成分复杂,变质就变色,检查颜色的品种,适宜进行溶液的颜色检查的原料,建立方法时要考虑的问题,溶剂,浓度,稳定性,临床安全性需要 工艺生产能力 同类产品水平,溶液的 颜色,制订限度时要考虑的问题,主成分 纯度,杂质的 含量,稳定性 数据,临床安全性需要 工艺生产能力 同类产品水平,颜色的 限度,应用色差计转换进口药注册标准-举例,溶液的颜色 取本品0.5g，加水10ml溶解后，溶液应无色；如显色，与同体积的比色液（取棕红色贮备液1.8ml加8.2ml水，混匀）比较（中国

33、药典2010年版二部附录 A第一法），不得更深。,色差计法应用举例,说明：企业标准按EP检查，规定“与B5号标准比色液（EP第5版2.2.2溶液的颜色）比较不得更深”。因EP标准比色液从三原色开始就与中国药典不同，如按此检查会有困难，故采用色差计进行了对比测定，结果EP的B5号标准比色液的色差值（E*=3.58）与中国药典BR3号（E*=3.19）和BR4号（E*=4.46）的中值（3.82）较为接近，约相当于BR3.5号。因BR3号是取棕红色贮备液1.5ml加8.5ml水，BR4号是取棕红色贮备液2.0ml加8.0ml水配制而成，所以本次复核将棕红色贮备液1.8ml加8.2ml水配制了专用比色液，该比色液的E*为3.64，与EP B5号标准比色液的色差值几乎一致，