课题2　月季的花药培养 (2)

1、课题2 月季的花药培养,课题2 月季的花药培养,课题目标： 说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径， 说出影响花药培养的因素， 学习花药培养的基本技术， 尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 课题重点和难点：选取适宜的培养材料和培养基。,花的结构：花柄、花托、萼片、花瓣、 和,雌蕊,雄蕊,柱头 花柱 子房,花药 花丝,雄蕊 雌蕊 萼片 花托 花柄,花瓣,一、基础知识,1.被子植物的花粉发育,(1)被子植物雄蕊由 和 两部分组成。,花药,花丝,(2)花粉是由花粉母细胞经过 而形成，因此，花粉是 的生殖细胞。,减数分裂,单倍体,小孢子母细胞（2n）,时期（n）,单核 期（n）,

2、双 核 期,细胞核（n）,细胞核（n）,细胞（n）,细胞（n）,个精子(n),分裂,分裂,单核 期（n）,分裂,减数,四分体,居中,靠边,有丝,生殖,有丝,花粉管,生殖,营养,2,结合教材内容填下列示意图,(3)被子植物花粉的发育要经历小孢子 、 和 等阶段。,四分体时期,单核期,双核期,注意：两个精子和一个营养核的基因型相同。,拓展：发育结果,2.产生花粉植株的两条途径:,途径一：花粉通过胚状体阶段发育为植株； 途径二：花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。,一、基础知识,两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。,人工种子是由外植体通过组织培

3、养而获得的胚状体，然后加上人造胚乳、人造种皮而制成。,3.影响花药培养的因素,(1)主要的影响因素：,材料的选择与培养基的组成,亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及 接种密度等对诱导成功都有一定的影响。,(2)其他因素：,从花粉来看，应当选择 （四分体期、 单核期、双核期、萌发期）的花粉,材料的选择 从花期来看，应当选择 （初花期、盛花 期、晚花期）的花药,从花蕾来看，应当选择 （完全未开放、 略微开放、完全盛开）的花蕾,初花期,单核期,完全未开放,一、基础知识,二、月季花药培养的实验操作,1.材料的选取,焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色),醋酸洋红法(最常用),(2)检查方法:P39

4、,一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。,(1)选择花药：,P39 思考：为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。,2.材料的消毒,用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。,花蕾,无菌水清洗,吸干表面水分,0.1的氯化汞溶液 2-4 min,无菌水清洗3-5次,70的酒精浸泡30s,二、月季花药培养的实验操作,A.剥取花药,B.接种花药,C.培养,D.分化培养基培养,E.鉴定和筛选,不要损伤花药？,要彻底除去花丝？,25,不需要光照。 20-30天

5、后长出愈伤组织或胚状体。幼小植株形成后才需要光照。,出现染色体倍性的变化，如何处理？,每个培养瓶接种 （710 ）个花药,花药长出愈伤组织还要转移到哪？,3.接种和培养,如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。,花药出现污染的原因： (1)消毒不彻底； (2)接种室污染； (3)人为因素的交叉污染等。,三、结果分析与评价,植物组织培养技术与花药培养技术的异同点：,外植体为体细胞，染色体数无需加倍。,取材为花粉，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育。必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。,月季的花药培养,被子植物花粉的发育：,产生花粉植株的两种途径：,影响花药培养的因素：,主要因素：材料