微生物学检验肠道杆菌概述.ppt

1、肠杆菌是一大群具有相似生物学特性的革兰氏阴性杆菌。与医学密切相关的肠杆菌科，正常菌群，埃希氏菌，变形杆菌，克雷伯氏菌，沙雷氏菌，柠檬酸杆菌，致病菌，致病性埃希氏菌，志贺氏菌，沙门氏菌，耶尔森氏菌，肠杆菌科的共同特征，形态学染色：均为革兰氏阴性杆菌，无孢子，有菌毛，多数有鞭毛，少数有荚膜培养特征：需氧和兼性厌氧；营养需求不高；光滑的菌落；生化反应：氧化酶；接触酶；硝酸盐还原试验大多数发酵葡萄糖的非致病菌分解乳糖，大多数致病菌不分解乳糖。抗原结构O抗原：化学成分为脂多糖；耐热性；物种特异性；颗粒凝集发生在与相应的抗体结合时；普通抗原会引起交叉反应h抗原：化学成分是蛋白质；耐热。表面抗原与相应抗体呈

2、絮状凝集：化学成分为多糖；耐热。能阻断O凝集、遗传变异：S-R变异、H-O变异临床意义：致病物质：菌毛、表面抗原、内毒素、肠毒素传播途径：肠道感染、肠道外感染引起的疾病：肠道致病菌引起的肠道传染病(细菌性痢疾、伤寒等)。)条件致病菌：医院感染的主要致病菌，常用培养基，选择性培养基：不锈钢板：含乳糖、中性红指示剂、胆盐、亮绿、硫代硫酸钠等的麦克板。中国蓝板含有乳糖、中性红指示剂、胆盐等。EMB平板含有乳糖、曙红和美蓝指示剂，它们都含有乳糖和酸碱指示剂：细菌分解乳糖产生酸，这降低了培养基的酸碱度，使指示剂呈酸性。分解乳糖的细菌是有色菌落，而不分解乳糖的细菌是无色菌落。它们含有不同的抑制剂，可以不同

3、程度地抑制革兰氏阳性菌和非致病菌，因此它们可以选择性地培养肠道致病菌。选择有生长现象的平板细菌，双糖铁培养基(KIA)，配方：蛋白胨，牛肉膏，氯化钠，硫代硫酸钠，硫酸亚铁，琼脂，酚红，乳糖1，葡萄糖0.1。用途：主要用于观察肠杆菌科细菌是否分解乳糖，葡萄糖是否产生酸和气体，H2S是否产生。起亚结果观察：发酵葡萄糖：底层为酸性反应(黄色)，斜面为碱性反应(红色)，如果葡萄糖发酵产生酸和气体，底层有气泡同时发酵葡萄糖和乳糖；底层和斜面是酸性反应(黄色)产生的H2S；培养基变黑；1.细菌没有接种；3.乳糖和葡萄糖分解产生酸和气体，硫化氢为阴性。2.分解乳糖和葡萄糖产生酸而不产生气体，这对于硫化氢(A

4、A)是负面的；4.分解乳糖，分解葡萄糖产生酸而不产生气体，这对于硫化氢(KA)是负面的；5.不要分解乳糖，分解葡萄糖产生酸而不产生气体，这对硫化氢(KA)是有利的。微生物学检查、标本采集肠道标本：新鲜粪便胃肠外标本：根据不同感染部位、检查程序、肠道细菌生化等采集不同标本。与其他科细菌的鉴定：初步分组，肠杆菌科属之间的鉴定，微生化反应系统的鉴定，将细菌的多种生化反应的二进制数结果转换成八进制码，并将其编为一本书，从编码键表中搜索确定细菌名称，010011001100，0100110011100，肠杆菌科，埃希氏菌等。大肠杆菌、蟑螂、埃希氏菌、福格森氏菌、埃希氏菌、赫尔曼氏菌、大肠杆菌、形态染色、

5、革兰氏阴性短杆菌，大部分都有鞭毛体、荚膜或微囊、菌毛，无孢子，培养特性、兼性厌氧营养要求不高，圆形光滑菌落特性SS平板红菌落麦克平板红菌落EMB平板紫黑色金属光泽菌落，生化反应、氧化酶试验()分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖等。(个别菌株分解乳糖较晚或不分解乳糖)KIA: aamiu: imvic:抗原结构，抗原类型：o，h，k抗原含义：大肠杆菌血清型表达：O:K:H实施例：O111:K58:H2胆盐和亮绿对该菌有抑制作用，但对氯霉素、链霉素和庆大霉素敏感，易产生耐药性。临床意义、致病物质：K抗原、菌毛、内毒素、肠毒素引起的疾病：肠外感染：机会性感染、泌尿系感染(常见)、胆囊炎、腹膜炎等肠道感染：由致

6、病性大肠杆菌引起。微生物学检查、标本采集：肠外感染：根据不同病变部位采集不同标本，如血液、尿液、分泌物等肠道感染：采集新鲜粪便、肠道感染、粪便、肠道弱选择性培养基、乳糖分解菌落、ETEC、生化反应、毒素测定、EPEC、EIEC EHEC、玻片凝集试验用O、K多价诊断血清生化反应和血清分型、试验程序、肠外感染、脓液、尿液、脑脊液等。革兰氏染色显微镜检查、血平板分离和培养、可疑菌落、生化反应氧化酶、起亚MIU、报告结果、血液、富集、菌落涂片染色、试验方法、肠胃外感染、标本血样首先富集，然后分离和培养。鉴定：菌落涂片生化反应氧化酶：(用非发酵菌鉴定)KIA:A/Mir:IMVIC尿菌落计数：100，

7、000毫升尿有诊断意义，试验方法：肠道感染，分离培养：粪便标本接种Mac或EMB平板，培养1824小时，并选择可疑菌落作进一步鉴定。生化反应：起亚、MIU和IMViC符合致病性大肠杆菌的鉴定，ETEC符合大肠杆菌毒素的检测和EPEC。生化反应符合大肠杆菌的血清学分类。首先，用多价诊断血清进行玻片凝集试验，如凝集，然后用单价诊断血清测定血清型，并鉴定EIEC。生化反应的特点(类似志贺氏菌)葡萄糖发酵产生酸不产生气体，不发酵或后期分解乳糖。多数菌株鉴定为动态阴性，志贺氏菌：毒性试验：豚鼠结膜血清型试验：O152，O124，EHEC鉴定，生化反应符合大肠杆菌血清型：有50多种，其中O157:H7O1573360H7不发酵山梨醇。它有