生理学方法及其.ppt

1、第六章第五节生理学方法及其在中医研究中的应用。人类生理学不仅是一门研究人类功能活动和规律的科学，也是一门实验科学。第一段的其余部分简要描述了生理学的发展历史。第二段主要谈及与中医的关系。如何用生理学方法研究中医。你能不能提出一个假设，比如辨证的标准、辨证分型、辨证论治及其机理，有没有什么办法？使用了什么生理方法？用生理学方法研究中医的必要性。生理学的主要方法引言部分介绍了现代生理学两大研究方法的分类，即急性实验和慢性实验：1。急性实验(包括体外组织和器官实验)的优点是人工控制条件，有利于排除其他因素，特别是详细观察和分析器官和组织的基本功能和生理特征，但缺点是动物与整体分离或受解剖或麻醉影响，

2、结果往往是确定的。例：以不同肿瘤组织为例，体外检测细胞膜上的某些生物泵功能，中药的调整，以及发生时间。慢性实验方法是在完全正常的动物体上观察和研究某种生命现象。用这种方法得到的数据更符合正常的生理活动，但实验难度大，要求高。例如：在危重病房长期监护，在人类之前对实验动物进行生理观察。以上两种实验方法可以取长补短。这样的例子会有很多。你能举一些例子吗？第二段介绍了另一种分类方法，即“根据生理研究的不同层次，可以分为三个层次：细胞层次、器官层次和整体层次。”这种划分也在于从表及里、从浅及深地解释研究过程。为了在医学实验中解释这个问题，经常需要重复做这个研究，从粗到细，然后从细到粗，直到问题被澄清。

3、观察消化道，如腹泻，你能举出不同的观察水平吗？有什么意义？另一个例子是呼吸系统，如哮喘。你能举出不同层次的观察吗？有什么意义？有什么方法，太多了！没有办法一一介绍，百分之一也很难。因此，在教材中推荐参考文献1-7中所列的专著，并通过专题搜索相关学术期刊。让我们一起看看。陈次青，生理学，人民卫生出版社，方福德等编著，1991年，现代医学实验技能全集(第二卷)，北京医科大学，北京协和医科大学联合出版社，1995年，主编，神经科学概论，北京医科大学联合出版社，北京协和医科大学联合出版社，徐，等编著，1993年，药理学实验方法，人民卫生出版社，周燕娇等编著，1994年。生理学方法和技术(第1-3集)。

4、科学出版社。梅编著，1984年和1987年。生理学方法和技术(第4集)。科学出版社。钟璞1986年编辑。现代中医的生理学基础。学院出版社。1991.每个人都感兴趣，可以借它。(1)生理实验中常用的仪器请注意，这里介绍的是主要用于生物电激发和检测的仪器。应该还有更多。1阴极射线示波器。该仪器是用于观察和测量电压、电流波形和数值的电子仪器。由于其低惯性、高灵敏度和宽测量频率范围，它是电生理学实验中显示微弱和快速变化的生物电不可缺少的工具。根据生物电的特点，示波器应具有高灵敏度、慢扫描速度(2s/cm1s/cm)和1兆赫兹的频率。这种设备非常经典。目前，它们中的许多已经被计算机化或直接与计算机连接，

5、用于以数字形式存储信号、处理信号和再现图像。2生物信号放大器。的电压一个好的生物电放大器应该具有以下特性：(1)宽频率响应范围(通带从0到100千赫)，(2)足够的放大能力，(3)高辨别率，(4)低噪声，和(5)高输入阻抗。电子刺激器。生物组织只在刺激条件下反应。在电生理学实验中，通常优选电子刺激器作为刺激源。由于电刺激不易损伤组织，因此可以定量准确地重复使用。方波脉冲的幅度、宽度和频率可以单独调节，刺激能量可以根据刺激参数计算，因此电生理实验需要电子刺激器。一般采用矩形波作为刺激脉冲，所需参数包括：(1)振幅(刺激强度)，(2)波宽(刺激动作时间)，(3)频率，(4)延时(触发脉冲和矩形波刺

6、激之间的一段时间)，以及(5)同步输出，用于触发示波器的外部触发扫描，也可用于触发其他需要与刺激同步的仪器开始工作。此外，电刺激隔离器需要连接在刺激器的输出端。因为在记录生物电时，由于刺激器输出的一端接地，刺激信号将被带入记录系统以掩盖生物电波形，而隔离器的使用可以减少刺激伪像。4多通道生理记录仪。多通道生理记录仪是一种能够同时观察、记录和处理脑电、心电、肌电图、血压、呼吸和肌肉收缩曲线等各种生理参数的综合性医用电子仪器。多通道生理记录仪一般由传感器、前置放大器、控制器、示波监视器、记录仪、支架和电源组成，其中国内常用的有2、4、8个记录仪。5生理数据处理器。生理数据处理器是一种基于微型计算机

7、的专用生物电数据采集和处理仪器，已被广泛用作生理实验的有力工具。主要用于测量各种生物电，如神经动作电位、心电图、脑电图、肌电图、各种诱发电位、血压、脉搏、呼吸等由传感器转换的生理参数电信号。它可以实时处理上述信号，并具有波形采集、叠加平均、数据分析、记忆示波等多种功能。它是教学和科学研究的有用工具。6膜片钳实验装置。除了一般的电生理仪器外，膜片钳实验的专用仪器包括膜片钳放大器、倒置显微镜、三维液压微机械手、微电极绘图仪、计算机及相关软件等。因为膜片钳实验中使用的大多数标本都是放在培养皿中的细胞，它们需要在显微操作器的帮助下在相差倒置显微镜下进行操作。膜片钳放大器通常包含一个标准差分放大器电路，

8、它以电位差的形式输出记录的电流。因此，膜片钳放大器的核心部分是高输入阻抗、低噪声、宽频带的高增益电流电压转换器。此外，还有频率提升部分、加法器、瞬时补偿和箝位放大器。膜片钳装置和检测信号，(2)生理实验中常用的方法1神经系统。电生理学是研究神经或神经肌肉功能状态的常用方法。特别地，细胞外记录方法利用可兴奋组织(如神经和肌肉)的生物电现象来观察组织细胞的正常功能、病理变化和药物的作用。细胞外记录法是将引导电极放置在神经和肌肉组织的表面上或附近，以引导神经和肌肉组织的电活动。当可激发的细胞被激发时，被激发的部分被去极化，而未激发的部分处于正常的极化状态。由于体积导体中两个部分之间的电势差，电流从一

9、个点流向另一个点，并且放置在电池表面上的电极将记录它们之间的电势差。在针刺镇痛原理的研究中，有人记录了猫外周神经单位电活动、脊髓白质单位电活动、脊髓电位、脑电图、脑诱发电位、脑干电位等。在“肾主耳”的研究中，使用了内耳生物电(听觉神经动作电位、内耳毛细胞麦克风电位)这些方法是常用的细胞外记录方法。随着生理学研究向细胞水平的发展，细胞内记录被采用，这是研究神经、肌肉和其他细胞的基本生物物理特性的有力手段。如果你想记录膜电位，你必须结合玻璃微电极技术，将电极插入细胞膜。这种方法称为细胞内记录法，用于测量神经元的膜电位、兴奋性突触后电位(EPSP)和抑制性突触后电位(IPSP)。膜片钳技术是近二十年

10、发展起来的一种理想的控制跨膜电势来研究细胞膜离子单通道的技术。随着膜片钳技术的应用，生理学研究已经进一步发展到微观分子水平。2循环系统。无创sad功能测量(包括心电图、心音图PCG、颈动脉脉搏追踪曲线CPT和心尖脉图ACG)、心室收缩功能测量、血管张力测量和脉图测量是研究“心主血管”和脉象的常用方法。用微循环显微镜系统观察甲襞微循环的方法是研究“血瘀证”的常用指标。下图显示了鼠尾血压检测系统。体外组织灌注和生理检测系统，3呼吸系统。肺功能可通过呼吸录像进行测量，包括胸腔内压力记录、胸部运动记录、呼吸肌活动和肌电图、呼吸气流速度测量等。例如，观察由于“肺气虚”引起的肺功能损害，这些方法经常被使用

11、。4消化系统。胃肠电图和胃肠运动波的记录方法能够反映胃肠功能，是研究“脾主运化”的常用指标；木糖吸收试验和唾液淀粉酶活性测定被认为是脾气虚证的客观指标。部分电生理检测系统二、用生理学方法研究中医的现状及实例第一段介绍了中医生理学研究的特殊性。第二段指出，中医药必须吸收现代科学技术的精华，包括将生理实验手段引入中医药研究。第三段简述了半个世纪以来中医生理学的研究进展。主要集中在针刺、针刺麻醉原理、听觉生理学、胃肠电生理学等方面。今后将主要介绍我校曾赵霖教授课题组在肾与耳关系方面的研究工作，以及广州中医药大学王建华教授课题组在脾运方面的研究工作。肾与耳的关系研究中医理论基础及研究背景：中医对肾的概

12、念涉及广泛的身体功能，包括生长、发育、生殖、泌尿、内分泌及水盐代谢。其中，肾与耳的关系非常密切，即“肾在耳中开始开放”。听力与肾脏密切相关。肾气充足导致听力灵敏，肾气不足导致耳鸣耳聋。临床治疗肾虚型耳鸣耳聋和链霉素致聋取得了一定的效果。肾阴不足，耳聋者，宜养肾阴，以精充耳；肾阳不足，耳孔耳聋，宜补元阳，益肾益耳。同时，现代研究表明，下丘脑-垂体-肾上腺皮质、甲状腺和性腺的生理功能体现了中医肾的本质。选题背景资料(一)。那么，在中医肾与耳的关系中，肾在结构和功能上究竟意味着什么呢？什么phy1.肾与耳关系的现代理论假说和实验物质基础，(1)醛固酮与肾和耳关系的临床研究表明，肾阳虚、肾阴虚患者尿液

13、中糖皮质激素的排泄发生变化，因此推测肾上腺皮质是中医肾功能的重要组成部分。在肾主水的概念中，除了肾脏的泌尿功能外，还包括水和盐代谢的调节机制，其中盐皮质激素起着重要作用。现代医学研究发现，肾脏和内耳中的某些细胞在生理功能、形态结构、酶含量和药物反应等方面具有相似的特征。尤其是抗生素(如新霉素、卡那霉素等。)对内耳有毒，对肾脏也有毒性作用。抑制肾功能的利尿剂(如尿酸和速尿)也能使人和动物耳聋，并对内耳生物电有明显的抑制作用。先天性肾功能不全(阿尔波特综合征)通常伴有先天性耳聋。听力损失经常发生在晚期肾功能不全患者中。选题背景资料(2)。由于肾和耳在疾病和药物反应中有许多共同特征，调节肾功能的物质

14、也可能在耳功能中起调节作用，即醛固酮，一种调节肾功能的盐皮质激素，可能在肾支配耳的机制中起重要作用。假设。为了证明这一假说，通过豚鼠动物实验，以声音引起的耳蜗麦克风电位CM(听毛细胞受体电位)和听神经动作电位N1为指标，在尿酸(耳毒性利尿剂)引起的内耳病理模型急性实验中，证明醛固酮能显著降低尿酸对内耳生物电的抑制作用。然而，螺内酯，醛固酮受体的竞争性拮抗剂，显著增强了尿酸对内耳生物电的抑制作用。其作用机制可能与醛固酮增加内耳细胞ATPase活性和促进细胞氧化过程有关。此外，用同位素示踪技术测定了3H-醛固酮在豚鼠耳蜗和其他身体组织中的含量、分布和衰减过程。结果表明，耳蜗基底膜(包括皮层器官)和

15、血管纹中3H-醛固酮含量高，衰减过程慢，其时间变化与小肠、肾脏等醛固酮靶组织相似，提示耳蜗组织中可能存在醛固酮受体，肾与耳关系密切。问题1)如何更进一步？2)醛固酮在其他组织中的分布和功能？(2)甲状腺激素与肾和耳的关系随着对肾本质的临床和动物实验研究的深入，提示下丘脑-垂体-甲状腺轴的功能与中医肾密切相关。例如，甲状腺功能减退症患者的临床表现与典型的肾阳虚一致，并且在肾虚患者的尸检中发现甲状腺功能减退症；肾阳虚动物模型还发现胸腺、肾上腺皮质、甲状腺等内分泌腺体重量减轻，组织退化，肾阳虚患者血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)含量降低。这些现象表明肾阳虚患者的甲状腺功能下降。动物实验也表明补肾和杨灿

16、的中药可以改善甲状腺机能减退动物的能量代谢。显然，甲状腺是中医肾精的内容之一。至于甲状腺和耳朵的关系，一个世纪以前就发现先天性和获得性甲状腺功能减退的患者都不同程度地伴有听力损失。病理解剖也证明先天性甲状腺功能减退症(克汀病)导致内耳和中耳发育障碍。因此，甲状腺激素是维持听觉功能的重要因素。所选主题的背景信息或科学基础。为了进一步解释甲状腺激素在中医肾耳关系中的作用，设想添加一些外源性甲状腺激素是否能增强内耳对某些耳毒性药物的抵抗力，从而导致耳聋。也就是说，它类似于在豚鼠实验中，用内耳生物电、内耳形态学和SDH活性，以及对尿酸(耳毒性利尿剂)的反应和调节，观察正常对照组、口服甲状腺组和甲状腺切

17、除术组的听神经电位和麦克风电位振幅的变化。实验结果表明，给予适当剂量甲状腺素的动物内耳阻力大于正常动物，而甲状腺切除术动物的阻力最大。尿酸能抑制听觉毛细胞中的琥珀酸脱氢酶。服用尿酸后，甲状腺素组酶活性最强，对照组次之，甲状腺切除术组最弱。研究表明，甲状腺素可以减轻卡那霉素和庆大霉素对听觉功能的损害。这两种抗生素均为氨基糖苷类抗生素，临床上常引起耳聋。(3)缺铁与肾、耳的关系临床观察发现，有肾虚症状的耳聋患者血清铁含量低于无肾虚症状的患者，且降低程度与耳聋程度成正比；因此，铁可能是肾向耳开放的生化基础，肾通过含铁酶参与内耳细胞的呼吸和生物氧化过程来实现。肾虚导致铁代谢紊乱和耳功能抑制。补肾药物防治耳聋与“肾主