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文档简介

1、22动物细胞工程学22.1动物细胞培养和核移植技术,课程标准简述动物细胞培养和体细胞克隆。 课标解读1 .简述动物细胞培养的过程和条件。 2 .动物体核移植技术和动物克隆概述。 1动物细胞工程学、动物细胞培养、动物细胞培养、动物细胞培养、细胞融合,2 .动物细胞培养(1)的概念从动物体内提取相关组织并分散,然后放入适当的培养基使这些细胞和谐。 (2)条件无菌无毒环境:培养液和所有无菌处理。单细胞、生长、增殖、培养用具、生长促进因子、血清、血浆、36.5、7.27.4、细胞代谢、pH、(3)应用于病毒疫苗、干扰素等生物制品生产的基因工程:常用于基因工程技术。 应用于检验,判断某种物质的毒性。 用

2、于抗癌药物的筛选等的研究。 单克隆抗体、动物细胞、受体细胞、有毒物质、生理、病理、药理、思维活化1动物细胞培养为什么选择幼龄动物组织和胚胎作为培养材料? 动物细胞培养需要脱分化吗? 提示幼龄动物组织和胚胎细胞分化程度低,增殖能力强,易于培养。 动物细胞培养不需要经过去分化过程。 由于高度分化的动物细胞发育能力减弱,丧失了完整的个体发育能力,动物细胞也与植物组织和细胞培养时的脱分化过程不相似。 植物组织培养与动物细胞培养的比较,尤其是植物组织培养最终产生新的个体,警告显示万能性的动物细胞培养会产生大量的细胞,不形成新的个体,因此不能表现万能性。 一般来说,动物细胞的体外培养需要满足以下条件()

3、无毒环境无菌的环境合成培养基需要加血浆温度接近动物体温,不需要CO2的动物细胞的体外培养要求环境无菌、无毒,培养液中需要添加一定量的抗生素。 合成培养基中需要加入血清、血浆等天然成分的温度、pH分别为36.50.5、7.27.4。 O2是细胞代谢所必需的,CO2维持培养液的pH值。 答案d,1概念是将动物的一个细胞的东西转移到去掉细胞核的东西中使之发育为一个,最终使之发育为动物个体。 2分类包括移植和移植,其中移植容易成功。 动物体细胞核移植技术与克隆动物、细胞核、卵母细胞、重组、新胚胎、胚胎细胞核、体细胞核、胚胎细胞核、3应用前景(1)加快家畜的进程,促进优良家畜群的繁殖。 (2)保护濒危物

4、种。 (3)转基因克隆动物可以生产许多医用蛋白质。 (4)转基因克隆动物的细胞、组织和器官可以作为异种移植的供体。 (5)人核移植经过诱导分化,形成相应的组织、器官后,可用于组织器官移植。 (6)研究胚胎的发育和老化过程,追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。 遗传改良、生物反应器、胚胎干细胞、4存在问题(1)成功率非常(低/高)。 (2)大多数克隆动物仍然存在问题。 (3)克隆动物食品的安全性存在争议。 低、健康、思维活化2在动物体核移植中应如何选择受体细胞? (1)供体细胞一般选择传代十几岁以内的细胞。 培养的动物细胞一般继代到1050代左右,部分细胞的核型可能发生变化,其细胞遗传物质可能发生

5、突变,但10代以内的细胞一般可以保持正常的二倍体核型。 (2)受体细胞一般选择m中期去核的卵母细胞,因为这个时期的细胞体积大,操作容易,具有促进细胞核万能表达的物质和营养条件等优点。 1原理动物细胞核的万能性和细胞膜的流动性。 2条件和原因(1)体核移植技术选择m中期的卵母细胞作为受体细胞。因为m中期卵母细胞体积大,操作方便,含有促进细胞核万能表达的物质和营养条件。 (2)核移植胚胎动物的核遗传物质均来源于有重要利用价值的动物提供的体细胞,供体细胞的核在转移到受体细胞之前,必须去除或破坏受体细胞的核遗传物质。 (3)培养的动物细胞一般传代到1050代左右,部分细胞核型可能发生变化,其细胞遗传物

6、质可能发生突变,但10代以内的细胞一般可保持正常的二倍体核型。 因此,在体核移植中,为了保证供体细胞的正常遗传物质,多使用传代10代以内的细胞。 (4)核移植时,一般不选择生殖细胞作为供体细胞。 生殖细胞与正常体细胞相比核遗传物质减半,以3过程、4高产奶牛的克隆为例,(1)克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同,但完全不同的生物性状不仅受遗传物质的影响,还受环境的影响。 在个体发育的过程中遗传物质有可能会发生变异。 (2)核移植过程中细胞核仅来自一个个体,因此核遗传物质与供体同样无性繁殖,不改变生物体的基因型。 【牢固2】世界上第一只克隆羊“多利”的培育步骤如下图所示,请看图回答以下问题。

7、(1)在图中写出所指的生物工学名:实施细胞工学时,多数必要的受体细胞采用动物卵泡的原因是:“多利”的颜色是“多利”。 请根据遗传学的原理进行判断。 继植物组织培养之后,成功培养了克隆绵羊,动物细胞的细胞核也具有。 (5)请举一个例子,说明克隆绵羊培育成功的实际意义。 动物细胞工程学与遗传学原理相结合,以加强问题的综合性和灵活性。 解决这个问题需要从动物细胞工程学、基因的来源和表达过程进行分析,求得答案。 用于克隆羊“多利”培养的生物工程技术是细胞核移植和胚胎移植。 多利羊的性状主要由细胞核控制,即性状与白面羊相似。 答案(1)细胞核移植胚胎移植(2)卵泡体积大、操作方便卵泡营养物质多,发育可直

8、接表达性状(3)白色“多利”全细胞核基因保存白面羊(4)万能性(5)濒危物种,繁殖优良品种,医学克隆器官,【例1】 (1)在动物细胞培养过程中,贴壁细胞分裂生长到细胞表面时,细胞就会停止分裂生长,这种现象称为细胞。 此时,形成在瓶壁上的细胞层数为 为了将贴墙的细胞与瓶壁分离,必须用酶进行处理,可以使用的酶是 动物细胞培养,(2)随着细胞继代次数的增加,大部分细胞分裂停止,出现的现象,但是极少数的细胞可以连续增殖,其中有些细胞可以根据遗传物质的变化而变成;(3)使用某种大分子染料对细胞进行染色时,甚至连死细胞都被染色原因最好是检查某些毒物能否改变细胞染色体的数量,用显微镜观察细胞在期间分裂的细胞

9、。 (5)细胞培养过程中,通常在_的条件下保存细胞。 因为在这样的条件下,细胞中的活性降低,细胞的速率降低。(6)细胞培养形成的皮肤组织移植给患者后发生排斥现象。 这是为了以移植的皮肤组织为目的进行攻击。 思考指南:深入分析细胞增殖过程中存在接触抑制现象,需要胰蛋白酶处理后分瓶培养的细胞培养过程中,部分细胞的遗传物质发生变化,细胞分裂次数增多,活细胞的细胞膜具有选择性渗透性,大分子染料不能进入细胞内部,因此不能着色。 答案(1)相互接触,抑制单层(或单层)胰蛋白酶(2)的老化,减少死亡不死性的降低;(3)因为活细胞的膜具有选择渗透性,大分子染料不能进入活细胞内,活细胞不能着色(或死细胞的膜不能选择渗透性胃蛋白酶作用的合适pH约为2,因为pH大于6的话胃蛋白酶就会失去活性。 胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.28.4。 大多数动物细胞培养的适宜pH为7.27.4,胃蛋白酶在这个环境中没有活性,而胰蛋白酶在这个环境中活性高,因此胰蛋白酶适合细胞培养时的消化。 (2)在动物细胞培养中使用胰蛋白酶2次:第1次处理用胰蛋白酶切断的组织,使其分散到各个细胞中,第2次使贴壁细胞从瓶壁脱落。 (3)初代培养和继代培养的分界点是分瓶的继续培养。 图例2右图为某哺乳动物的生殖过程图,准确为() a个体2是克隆动物,c是高度分

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