荧光效率仪使用方法.ppt

1、汉迪培亚和生物酶HP3使用方法崔国书，1，快速叶绿素荧光诱导动力学曲线，1。简介含有癌适应绿色植物或叶绿素的部分组织突然暴露在可见光下，植物绿色组织变暗的红色，强度不断变化的荧光，随时间变化的荧光曲线被称为叶绿素荧光诱导动力学曲线，O点J点I点P点，植物释放的荧光强度随时间变化，从暗适应暴露在光下，荧光强度先上升，然后下降。一般来说，暴露在光下时最低的荧光定义为O点，荧光的峰值定义为P点，快速叶绿素荧光柔道动力学曲线是指从O点到P点的荧光变化过程，主要反映了Weis的原超光化学反应和光合作用结构的结构和状态等变化，下降的阶段主要反映了光合作用代谢的变化，随着光合作用代谢速度的上升，荧光强度逐渐

2、下降。连续激发荧光计(例如Handy-PEA)，主要通过短时间照明后荧光信号的瞬时变化反映了激活癌反应前PSII的光化学变化，分辨率相当高，因此可以在O-P上升过程中捕获更多荧光变化信息(例如O-P变化中的其他两个拐点(J点和I)。照明后，10 s到5 min的时间可以及时记录荧光信号。绘制快速叶绿素荧光柔道动力学曲线时，为了更好地观察J点和I点，得到了O-J-I-P柔道曲线。植物快速叶绿素荧光诱导曲线包含了很多关于PSII反应中心原超光化学反应(Force et al，2003)的信息。通过Lazr，2006)曲线荧光参数分析，可以了解植物发育时期光合结构的变化。Strasser和Stras

3、ser(1995)通过基于生物膜能量流计算能量流和能量比，测量给定物流状态下样品材料的内部变化，构建了高度简洁、化学化的能量流模型图，以更好地反映动态曲线与测试的样品材料的关系。根据能量流模型，天线色素(Chl)吸收的能量(ABS)的一部分以热和荧光(F)的形式消散，另一部分由反应中心(RC，JIP-test中RC指向活动反应中心)捕获(TR)在此基础上开发的数据处理JIP-test提供了有关测试的样例材质的大量信息。快速叶绿素荧光柔道动力学曲线包含丰富复杂的信息。第二，Handy-PEA使用说明，1 .验证HPEA主机是否有足够的电源，然后连接探针。2.从菜单中选择协议选项(屏幕ID#12)

4、。必须有5个空协议位置和1个默认协议位置。按OK键选择默认协议。3.按上下按钮选中“Duration setting(时间设置)”，然后按OK键确认。输入所需的时间(选择范围：1300秒)，然后按OK键退出。使用相同的方法，将光源的强度设定为3000mol.m-2.s-1。4 .安装的深色适应剪辑，对刀片进行足够的深色适应。将刀片卡入黑暗的适应剪辑，关闭适应剪辑的金属阴影，并暗适应10分钟以上。5 .将探针放置在深色自适应剪辑的圆形槽中，使探针与深色自适应剪辑紧密接触，防止光线进入。用手按探针和癌适应夹，拉开适应夹的金属遮光。6。按探针一侧的遥控器按钮或从菜单中选择测量功能进行测量。7.仪器测

5、量完成后(约1秒钟)，记录测量数据的编号，然后单击“确定”。选择是否使用上下光标保存数据，保存完数据后，单击OK转到下一个度量。三、资料传输和保存，1 .将装置连接到计算机，然后单击on/off打开装置。2.打开双击资料传输软件，显示下一张图片，单击输入图片，在HPEA上资料传输，如果要输入的数据是第100-200次，则必须在“First file”中输入100，在“Last file”中输入200，然后单击“Transfer”。发送完成，单击“关闭”，保存数据，保存档案，自定义档案名称，单击“确定”，完成保存数据，在对话框中输入描述数据的文字。字符不超过250个字符。如何打开保存的文件？打开

6、传递软件，单击，在文件夹中查找目标档案，打开，单击确定，打开档案，查看数据。4，BiolyzerHP3使用说明，打开双击BiolyzerHP3分析软件，单击关闭，单击照片，选择档案，注意，此处可能会出现错误！如果按“是”(如下所示)，将发生以下错误：测量数据具有异常值，从传输软件HPEA中删除异常值即可。使用HPEA传输软件(HPEA传输)打开出错的文件，选择异常值，在“Cut selected lines”上单击鼠标右键，然后再次保存数据。打开文件后，单击下图中的“大脑”图标，工具栏功能增加，更改为，选择要处理的数据，单击“工具”以保存数据，单击下图显示下一张图片，单击上图红色圆圈中的下拉箭

7、头，选择“MS-Excel ff”使用Excel选择文件要进一步查看数据之间的差异，请选择其他模式来处理数据。您可以选取红色圆的样式。单击红色圆圈中的按钮可显示O-J-I-PA，单击右上角的“Plot settings”可进行某些参数设置。例如：单击X轴和Y轴范围、红色圆圈中的图标可以创建下图，您可以获得大量数据。5，应用案例，李鹏民，高慧远，Reto J. Strasser (2005)。快速叶绿素荧光柔道动力学分析在光合作用研究中的应用李鹏民、高辉元、东晶、王空军、张吉王(2007年)。玉米差异对叶子的原草光化学反应日的变化差异作物学报，33(8): 1375-1379孙山，王昭民，王家熙更多的应用节目实例可以根据需要自行讨论。结语，这些是对荧光效率计的简单介绍，很多功能在使用过程中需要开发和利用。具有信息量大、操作简单、容易重复的特点，是深入研究光合作用原初期应变的强大而方便的工具。工具书，force l，critchley c，van rensen jjjs . 2003 . new fluo rescence parameters for monitoring photo synthesis in plants.783360 1733 Krause