7章芳香胺类药物的分析.ppt

1、1,第七章 芳香胺类药物的分析,2,芳胺,苯乙胺类药物 芳氧丙醇胺类药物,芳烃胺,芳香胺类药物,氨基或胺直接和苯环相连,胺通过碳链或氧杂碳链和苯环相连,3,芳胺类 药物,对氨基苯甲酸酯类,酰胺类,第一节 芳胺类药物的分析,4,R1 R2 苯佐卡因 H C2H5 盐酸普鲁卡因 H CH2CH2N(C2H5)2HCl 盐酸丁卡因 CH3(CH2)3 CH2CH2N(C2H5)2HCl 盐酸普鲁卡因胺 H CONHCH2CH2N(C2H5)2HCl,一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质,局麻药,抗心律失常药,芳氨基，对位有取代,苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺：芳伯氨基 四种：酰胺

2、键或酯键 侧链：叔N原子,5,主要性质,芳伯氨基特性：重氮化-偶合，与芳醛缩合，易 氧化变色等。盐酸丁卡因除外 水解特性：酯键或酰胺键易水解，生成对氨基 苯甲酸。盐酸丁卡因生成对丁胺基苯甲酸 弱碱性：R2侧链有叔胺氮原子，有弱碱性，可 与生物碱沉淀剂生成沉淀，可在非水溶液中进 行滴定。苯佐卡因除外。 其它特性：外观，状态，溶解性等,苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因、盐酸普鲁卡因胺,6,生物碱是一类存在于生物（主要是植物）体内、对人和动物有强烈生理作用的含氮的碱性物质。生物碱的分子构造多数属于仲胺、叔胺或季胺类，少数为伯胺类。它们的构造中常含有杂环，并且氮原子在环内。生物碱常常是很多中草药中的

3、有效成分，例如，吗啡，阿托品，长春新碱，喜树碱，肾上腺素、 麻黄碱 等。,生物碱或生物碱的盐类水溶液，能与一些试剂生成不溶性沉淀。这种试剂称为生物碱沉淀剂。该反应可用以鉴定或分离生物碱。常用的生物碱沉淀剂有：碘化汞钾（HgI22KI）试剂（与生物碱作用多生成黄色沉淀）；碘化铋钾（BiI3KI）试剂（与生物碱作用多生成黄褐色沉淀）；碘试液、鞣酸试剂、苦味酸试剂，分别与生物碱作用，多生成棕色、白色、黄色沉淀。,7,芳胺类 药物,对氨基苯甲酸酯类,酰胺类,第一节 芳胺类药物的分析,8,二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质,盐酸布比卡因,对乙酰胺基酚,醋氨苯砜,盐酸利多卡因,水解后显芳伯氨基特性；水

4、解产物易酯化,碱性；与重金属离子,生物碱沉淀剂发生沉淀反应,酚羟基的特性,芳伯氨基被酰化，在芳环对位有取代,三氯化铁,9,主要性质,水解后显芳伯氨基特性：盐酸利多卡因，盐酸布比 卡因较难水解 水解产物易酯化：对乙酰胺基酚和醋氨苯砜水解后 生成醋酸，在硫酸介质中与乙醇酯化，发出醋酸乙 酯的香味。 酚羟基的特性：对乙酰氨基酚可与三氯化铁发生呈 色反应。 弱碱性：利多卡因和布比卡因侧链有叔胺氮原子，有弱碱性，可与生物碱沉淀剂生成沉淀，可在非水溶液中进行滴定。对乙酰胺基酚和醋氨苯砜无此性质。 与重金属离子发生沉淀反应：盐酸利多卡因和盐酸 布比卡因可与铜或钴离子生成配位化合物沉淀,对乙酰胺基酚醋氨苯砜

5、盐酸利多卡因盐酸布比卡因,10,鉴 别 试 验,重氮化-偶合反应,与三氯化铁反应,与重金属离子反应,与铜或钴离子：盐酸利多卡因和盐酸布比卡因可与铜或钴离子生成有色配位化合物沉淀，该沉淀可溶于氯仿。,羟肟酸铁盐反应：盐酸普鲁卡因胺,与汞离子反应：盐酸利多卡因,水解产物反应,制备衍生物测熔点,UV光谱,IR光谱,三、芳胺类药物的鉴别试验,11,1.重氮化-偶合反应重氮化后，与碱性-萘酚偶合生成有色偶氮染料,对于分子结构中有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物。,R1 R2 苯佐卡因 H C2H5 盐酸普鲁卡因 H CH2CH2N(C2H5)2HCl 盐酸丁卡因 CH3(CH2)3 CH2CH2N(C2H5

6、)2HCl 盐酸普鲁卡因胺 H CONHCH2CH2N(C2H5)2HCl,盐酸丁卡因在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基乳白色沉淀，与具芳伯氨基的同类药物区别,对乙酰胺基酚,醋氨苯砜,12,2. 与三氯化铁发生呈色反应,对乙酰胺基酚,蓝紫色,13,3.与重金属离子反应,(1)与铜或钴离子：盐酸利多卡因可与铜或钴离子生成有色配位化合物沉淀，该沉淀可溶于氯仿。与盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因及苯佐卡因相区别,亮绿色,14,(2)羟肟酸铁盐反应：盐酸普鲁卡因胺,(3)与汞离子反应：盐酸利多卡因,羟肟酸,羟肟酸铁,浓H2O2,FeCl3,紫红色,硝酸,硝酸汞,黄色,对氨基苯甲酸酯类显,红色,橙黄色,

7、或,浓H2O2,FeCl3,15,4.水解产物反应,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,NaOH,碘试液,CH3I,普鲁卡因,16,5.制备衍生物测熔点,(1)三硝基苯酚衍生物,三硝基苯酚利多卡因，熔点228232,三硝基苯酚布比卡因，熔点194,(2)硫氰酸盐衍生物,白色，熔点131,17,6.UV光谱,7.IR光谱,用适当的溶剂溶解并稀释成一定浓度后，测定该溶液的最大吸收波长或最大吸收波长处的吸收系数,18,四 芳胺类药物的特殊杂质检查,1. 对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查,(1) 合成路线,(2) 检查项目,乙醇溶液澄清度与颜色：检查产品中引入的铁粉及对氨基酚的有色氧化产物,有关物质：以对氯苯乙酰胺为

8、对照品，用TLC法检查各种中间体，副产物及分解产物。,对氨基酚：乙酰化不完全或水解产生。毒性较大并使产品产生颜色 检查原理：碱性条件下，对氨基酚与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配合物，产品无此反应。 限度0.005%,铁粉,对氨基酚，对氯乙酰苯胺，O-乙酰基对乙酰氨基酚，等,19,2.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,用TLC法，以对氨基苯甲酸为对照品，检查对氨基苯甲酸,水解产生对氨基苯甲酸，其进一步脱羧成苯胺，再被氧化成有色物，使注射液变黄。疗效下降，毒性增加。,在制备注射液过程中受灭菌温度、时间、溶液pH值、贮藏时间、光线、金属离子等影响，发生水解。,20,单选题,E,C,B,21,对应题,

9、C,A,B,A,多选题,AD,22,比色法,直接测定：苯佐卡因，盐酸普鲁卡因及其注射液，盐酸普鲁卡因胺及其片剂和注射液等,水解后测定：醋氨苯砜及其注射液,非水溶液滴定法：盐酸丁卡因，盐酸利多卡因和盐酸布比卡因,UV法：对乙酰氨基酚原料及其片剂，胶囊，栓剂，注射液，以百分吸收系数法计算含量。,快速荧光测定法,HPLC法：对部分制剂及体内药物分析,五 芳胺类药物的含量测定,亚硝酸钠滴定法,23,直接测定：苯佐卡因，盐酸普鲁卡因及其注射液，盐酸普鲁卡因胺及其片剂和注射液,水解后测定：醋氨苯砜及其注射液,1.亚硝酸钠滴定法,(1)适用药物：结构中有芳伯氨基或水解后有芳伯氨基,(2)测定原理：,24,(

10、3)测定主要条件：,a 加入适量KBr(中国药典规定加入2g)加快反应速度,加入适量KBr后：,第一步：速控步骤。快慢与被测药物中芳伯氨基的游离程度密切相关。 芳伯氨基碱性较弱，在一定强度酸性溶液中成盐比例较小，即游离芳伯氨基多，重氮化反应速度就快；反之，芳伯氨基碱性较强，在一定强度酸性溶液中成盐比例较大，游离芳伯氨基少，重氮化反应速度就慢。但测定的药物固定后，这个因素就没办法改变，只能改变NO+的浓度，这可通过加催化剂来改变。HNO2与HBr的反应平衡常数比HNO2与HCl的大300倍，故在供试液中使NO+的浓度大大增大，从而加速了重氮化反应的速度,25,注意：酸度过大，阻碍芳伯氨基游离；使

11、亚硝酸分解,加入过量盐酸(芳胺药物与盐酸的mol比：1：2.56): 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物影响测定结果,b 加入过量盐酸加速反应,c 室温条件下滴定（1030）,温度低，重氮化反应慢；温度高，反应快，但同时使重氮盐分解，亚硝酸逸失,d 滴定管尖端插入液面下滴定,重氮化反应为分子反应，速度较慢，故滴定不宜过快。 为避免滴定过程中亚硝酸挥发和分解，滴定时将滴定管尖端插入液面下约2/3处，一次将大部分亚硝酸在搅拌下迅速加入，使其尽快反应。然后将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再缓缓滴定，至终点。,26,(4)指示终点的方法：,a 永停滴定法(中

12、国药典)：,b 外指示剂法：KI-淀粉糊剂,27,2.非水溶液滴定法,(1)适用药物：侧链有叔胺氮的药物，盐酸丁卡因，盐酸利多卡因(注射液是HPLC法)，盐酸布比卡因及其注射液,侧链有叔胺氮，显弱碱性，将供试品溶于冰醋酸中，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定。,(2)溶剂：冰醋酸 指示剂：结晶紫或萘酚苯甲醇 滴定液：高氯酸滴定液(0.1mol/L),实质：强酸滴定较弱的酸的盐,28,注意：滴定产生盐酸，为使反应向右进行，滴定前加入醋酸汞试液，使成为氯化高汞，除去氢卤酸的影响；将供试品溶于冰醋酸中，用高氯酸滴定液滴定。,29,3.分光光度法,(1)适用药物：对乙酰氨基酚原料及其片剂，胶囊，栓

13、剂，注射液。 对乙酰氨基酚在0.4%NaOH溶液中，在257nm有最大吸收。以百分吸收系数法计算含量。人唾液中对乙酰氨基酚含量也可用该法测定,比(亚硝酸钠滴定法)永停滴定法灵敏度高，操作简便,取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml ，置100ml 量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录 A），在257nm 的波长处测定吸光度，按C8H9NO2 的吸收系数（1%1cm）为715 计算，即得,30,4.比色法,5.快速荧光测定法,6.HPLC法： (盐酸利多卡因注射液) 对部

14、分制剂及体内药物分析,利用芳伯氨基的重氮化-偶合反应，生成有色偶氮染料，在可见光范围内测定其吸光度。 但专属性低，干扰物多，凡能重氮化的有机化合物如磺胺类、对氨基酚类、氨基苯甲酸类均有干扰。 多用于盐酸普鲁卡因及其注射液的常规分析,31,第二节 苯乙胺类药物的分析,一 苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质,R2为H或烃基,R1为带各种取代基的苯环,R3为H或CH3,肾上腺素 去甲肾上腺素 盐酸克仑特罗 硫酸沙丁胺醇 盐酸麻黄碱,R1 R2 R3 HX,H,H,32,弱碱性：侧链仲氮原子的存在使其有弱碱性。,酚羟基：具有酚羟基的药物，可与重金属离子配位呈色，易氧化变色，在碱性溶液中更易变色。,光

15、学活性：多数药物有手性碳原子。,其它：UV特征吸收，盐酸克仑特罗的芳伯氨基等。,33,二 苯乙胺类药物的鉴别试验,1.与三氯化铁反应：具有酚羟基的药物，可与三氯化铁配位呈色，加入碱性溶液，立即氧化成紫色或紫红色。,肾上腺素：取本品约2mg ，加盐酸溶液(91000)23 滴溶解后，加水2ml 与三氯化铁试液1 滴，即显翠绿色；再加氨试液1 滴，即变紫色，最后变成紫红色。,重酒石酸去甲肾上腺素,盐酸去氧肾上腺素,盐酸异丙肾上腺素,盐酸多巴胺,三氯化铁,翠绿色,碳酸氢钠试液,蓝色,红色,三氯化铁,紫色,三氯化铁,三氯化铁,翠绿色,新制5%碳酸氢钠试液,红色,紫色,墨绿色,1%氨溶液,紫红色,34,

16、2.与甲醛-硫酸反应： 肾上腺素类药物与甲醛在硫酸中反应，生成具有醌式结构的有色化合物。,重酒石酸去甲肾上腺素,盐酸去氧肾上腺素,盐酸异丙肾上腺素,肾上腺素,红色,淡红色,玫瑰红,橙红,深棕红,棕色,暗紫色,35,3.氧化反应：因酚羟基的存在。 易被碘，过氧化氢，铁氰化钾等氧化剂氧化呈现不同的颜色。,在该条件下，肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素被氧化产生明显的红棕色或紫色。利用该反应区别重酒石酸去甲肾上腺素,盐酸异丙肾上腺素 取本品10mg，加水10mL溶解后，取溶液2mL，加盐酸滴定液(0.1mol/L)0.1mL, 再加(0.1mol/L)碘溶液1mL，放置5 分钟，加0.1mol/L硫代硫酸钠

17、溶液4mL，即 显淡红色。,重酒石酸去甲肾上腺素 取本品约1mg ，加酒石酸氢钾的饱和溶液10mL溶解后，加碘试液1mL，放置 5分钟后，加硫代硫酸钠试液2mL，溶液为无色或仅显微红色或淡紫色（与肾上腺素或异丙肾上腺素的区别）。,pH3.56,36,4.UV和IR吸收,5.与亚硝基铁氰化钠反应(Rimini试验)： 重酒石酸间羟胺分子中有脂肪伯氨基。加水溶解后，加亚硝基铁氰化钠试液、丙酮数滴与碳酸氢钠少量，60的水浴加热1min即显红紫色,盐酸麻黄碱 取本品约10mg，加水1mL溶解后，加硫酸铜试液2 滴与20氢氧化钠溶液1mL，即显蓝紫色；加乙醚1mL，振摇后，放置，乙醚层即显紫红色，水层变

18、成蓝色。,6.双缩脲反应,37,三 苯乙胺类药物的特殊杂质检查,1.酮体检查 肾上腺素(4种)及盐酸甲氧明,方法：UV分光光度法，用HCl或水溶解成一定浓度，在指定波长处测定吸光度，不得大于一定值。,2.有关物质检查,只有盐酸去氧肾上腺素和硫酸沙丁胺醇有此项检查 方法：TLC法，高低浓度对照法。,生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质,38,紫外分光光度法检查酮体的条件及要求,39,四 苯乙胺类药物的含量测定,非水溶液滴定法,溴量法,比色法,提取酸碱滴定法,HPLC法,40,有11种苯乙胺类药物的原料药是用该法测定含量。 常用测定条件：冰醋酸为溶剂，加入醋酸汞试液消除氢卤酸干扰，若碱性较弱，终点不明显则加醋酐使突跃明显。 以结晶紫为指示剂（盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲醇），盐酸苯乙双胍和盐酸克仑特罗采用电位法指示终点。滴定液为高氯酸滴定液,1.非水溶液滴定法,例：重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定 盐酸克仑特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰； 由于碱性较弱，电位法指示终点 硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂,41,2.溴量法 重酒石酸间羟胺和盐酸去氧肾上腺素及其注射液。 测定原理： 结构中酚羟基的邻对位活泼氢与