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文档简介
1、第二章 基因结构及其对基因操作的影响,一 基因的概念 二 DNA的结构 三 基因结构及其对基因操作的影响,DNA基因发展简史,1847年Schleiden 和 Schwann提出“细胞学说” 生命的基本单位。 1864-1910年 孟德尔、摩根提出遗传单位,形状与基因相关联。 1936年 Sumner 证实酶是蛋白质。 1944年 提出了DNA是遗传信息的载体。 1953年 Watson和Crick提出DNA双螺旋结构。 1954年Crick提出遗传信息传递规律(中心法则) 1958年Meselson提出DNA半保留复制。 1965年Jacob和Monod提出操纵子(operon)模型,DNA
2、遗传信息从mRNA到蛋白质。 1969年美国科学家Nirenberg破译了DNA遗传密码。 1980年Sanger设计出测定DNA分子内核苷酸序列的方法。 1993年Mullis发明了PCR仪 2000年-2002年测定人类基因组核苷酸序列为30亿bp,基因为3万多个,一 基因的概念,(一)基因:通常也叫“顺贩子”,是遗传的基本单位,它携带着某种RNA分子或蛋白质分子的遗传信息。从本质上,基因是一段具有特殊功能的连续的脱氧核糖核苷酸序列,是构成巨大遗传染色体的组成成份。,一 基因的概念,(二)基因是什么 著名的肺炎球菌实验 1928年,英国 Griffith S型肺炎球菌:有荚膜,菌落表面光滑
3、 R型肺炎球菌:没有荚膜,菌落表面粗糙,一 基因的概念,结果说明:加热杀死的S型肺炎球菌中一定有某种特殊的生物分子或遗传物质,可以使无害的R型肺炎球菌转化为有害的S型肺炎球菌 这种生物分子或遗传物质是什么呢? 纽约洛克非勒研究所 从加热杀死的S型肺炎球菌将蛋白质、核酸、多糖、脂类分离出来,分别加入到无害的R型肺炎球菌中 结果发现,惟独只有核酸可以使无害的R型肺炎球菌转化为有害的S型肺炎球菌。 结论:DNA是生命的遗传物质,更有说服力的噬菌体实验,195年,Hershey和Chase 病毒(噬菌体) 放射性同位素35S标记病毒的蛋白质外壳,32P标记病毒的DNA内核,感染细菌。 新复制的病毒,检
4、测到了32P标记的DNA,没有检测到35S标记的蛋白质, DNA在病毒和生物体复制或繁殖中的关键作用。,二 DNA的结构,(一)DNA的组成与结构 碱基:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C) 核糖:脱氧核糖 磷酸,DNA双螺旋模型,(二) DNA的复制,DNA的半保留复制 DNA合成的同位素示踪实验 1958,Meselson和Stahl 大肠杆菌 15NH4CI为唯一氮源的培养液中生长若干代 被15N标记的大肠杆菌转入14NH4CI为唯一氮源的培养液中 完成第一代和第二代繁殖时,分离DNA,密度梯度超速离心 被15N标记的亲代双链DNA(记作15N/15N)密度大,在下部
5、;14N/14N密度小,在上部;15N/14N在15N/15N和14N/14N之间,证实半保留复制的实验,DNA的半保留复制,DNA的复制发生在细胞周期的S期,在解旋酶的作用下,首先双螺旋的DNA可以同时在许多DNA复制的起始位点局部解螺旋并拆开为两条单链,如此在一条双链上可形成许多“复制泡”,解链的叉口处称为复制叉。,DNA的半保留复制,DNA的复制总是由5 向3 方向进行 DNA的半保留复制保证了所有的体细胞都携带相同的遗传信息,并可以将遗传信息稳定地传递给下一代。,半 保 留 复 制,A=T G=C,三 基因结构及其对基因操作的影响,启动子是指确保转录精确而有效地起始的DNA序列 终止子
6、位于基因3端,给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列 DNA转录和RNA翻译,即遗传信息从基因流向RNA又流向蛋白质的过程总称为基因表达 转录的起始是基因表达的关键阶段,是RNA聚合酶与启动子的相互作用。启动子的结构影响它与RNA聚合酶的亲和力,从而影响基因表达水平。,三 基因结构及其对基因操作的影响,(一)原核基因及其产物的共线性 基因决定蛋白质的序列组成,是由密码子对应特定氨基酸所决定的。当一个基因的核苷酸序列与其产物的氨基酸序列是一一对应时,则表明它们是共线性的。在原核生物中,基因与其产物是共线性。,三 基因结构及其对基因操作的影响,(二)真核基因及其产物的非共线性 20世纪70年代以
7、来,在真核生物中发现了间断基因(interrupted gene),后来发现这种间断基因在真核生物中普遍存在,也就是后来所说的基因间存在着内含子(intron)。 内含子指真核生物基因中不能翻译成蛋白质的DNA片段,但可被转录。当两侧序列(外显子转录的)RNA被剪接在一起时,就将内含子转录的RNA从整个转录物中除去。外显子是指能够翻译成蛋白质的任一间断的基因片段,一个基因可有多个外显子。但是内含子并不是一成不变的,具有相对性。对一个DNA片段来说,在某个基因中是内含子,但在另一个基因中却可作为外显子。,三 基因结构及其对基因操作的影响,(三)基因的重叠性与基因的可变性 DNA序列与蛋白质序列的对应关系不是单一的
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