火腿肠中亚硝酸盐含量的测定修正版PPT课件

火腿肠中亚硝酸盐含量的测定-分光光度法15级 24班 B组杨泽奇 檀雨钊 贺仁杰 覃正前 杜 坤组员分配资料查找：檀雨钊 覃正前 杜坤方案设计：檀雨钊 杨泽奇PPT制作：杨泽奇 贺仁杰PPT陈述：小组全体成员实验目的 1熟悉可见分光光度计的使用方法。 2掌握火腿肠中的亚硝酸盐的含量测定的原理和方法。 3熟悉吸收曲线绘制的方法。亚硝酸盐的作用与测定意义 火腿肠是一种富含蛋白质，风味独特，方便实惠而深受人民喜爱的肉制品。在加工过程中添加适量的亚硝酸盐与火腿肠中的某些成分作用，从而使火腿肠呈现良好的色泽，因此亚硝酸盐称为发色剂。在火腿肠工业生产中，原料内的红色是由肌红蛋白及血红蛋白所呈现的感官性状。亚硝酸盐是氮循环的中间产物，不稳定， 如果摄取过多的亚硝酸盐，可使血红蛋白变成高铁血红蛋白，失去输氧能力，引起肠原性青紫症，中枢神经系统缺氧而受损，呼吸困难，循环衰竭，并造成血管扩张，血压下降，特别是亚硝酸盐被还原成亚硝酸胺后，是一个已确定的致癌物质。所以强制检验火腿肠生产企业中的加入亚硝酸盐与其含量具有非常重要的作用。我国卫生标准 GB2760张规定：火腿肠肉制品中亚硝酸盐的残留量应 0.15g/kg。实验原理-陈述人：杨泽奇本实验采用盐酸 -萘乙二胺法，其原理是用 70 蒸馏水从 样品中提取亚硝酸根离子 ,再经亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白质、除去脂肪后；即过滤得到的清夜中的亚硝酸盐在弱酸条件下与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物后，与萘乙二胺偶联生成红紫色的偶氮染料，并通过绘制吸收曲线得到最大吸收波长，将产物在最大吸收波长下用分光光度计测量其吸光度，并与标准曲线比较从而得到清夜中的亚硝酸盐含量。其反应式如下：实验试剂与仪器仪器：可见分光光度计，分析天平，水浴锅，比色皿（1cm），比色管（ 50ml），容量瓶（ 100ml），吸量管（1ml、 5ml、 10ml）、烧杯、胶头滴管、洗耳球，研体，漏斗，铁架台等试剂： 0.05mg/ml亚硝酸盐标准液 ,6mg/ml对氨基苯磺酸，6mg/ml盐酸 -萘乙二胺，饱和硼砂溶液，亚铁氰化钾溶液，乙酸锌溶液01样品处理称取 3g捣碎且搅拌均匀的火腿肠与 50ml烧杯中，加入饱和硼砂溶液 7.5ml，以玻璃搅匀，以 70 左右的蒸馏水约 100ml将其全部洗入 250ml的容量瓶中，置于沸水浴中加热 15 min，取出冷却至室温，一边振荡一边加入5ml亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入 5ml乙酸锌溶液以沉淀蛋白质。加入蒸馏水定容至刻度，摇匀，静置 30min。除去上层皮脂肪，清夜用滤纸过滤，弃去初滤液 30ml，收集滤液备用步骤02亚硝酸盐氮标准溶液的配制取 10.00ml眼硝酸盐氮标准储备液，置于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度。得到0.005mg/ml亚硝酸盐氮标准溶液步骤03系列标准溶液配制在一组编号 16的 50ml的比色管中，分别加入 0、 0.50、 1.00、 1.50、2.00和 2.50ml亚硝酸盐氮标准液，用蒸馏水稀释至 25ml刻度，分别计入1.00ml对氨基苯磺酸，密塞混匀，静置 5分钟。分别加入 1.00ml醋酸钠和 a-萘胺，稀释至 50ml刻度，静置 10分钟步骤04吸收曲线的绘制以 1号溶液做空白调零，对 4号有色溶液于 470nm570nm波长范围内，每隔 10