第一章制片方法及准备工作

植物显微技术计划学时： 48 讲课 16 实验 32 主要参考书：1.王灶安主编 植物显微技术 2.曾小鲁主编 实用生物学制片技术 3.郑国錩主编 生物显微技术 4.黄承芬，杜桂森编著 生物显微制片技术 5.郑若玄编著 实用细胞学技术 6. 李和平主编 植物显微技术 内容简介植物制片的方法及准备工作石蜡法制作原理与方法其他制片方法植物显微化学制片半薄切片和超薄切片显微镜的主要光学部件及性能各类显微镜简介几种显微技术的应用显微摄影技术研究论文题目：1 几种常绿植物（海桐、洋玉兰、冬青卫矛、桂花、黄杨等）叶片解剖结构研究2 几种药用植物（地黄、黄精、丹参、乌头、麦冬等）肉质根解剖结构特征及其增粗生长机理研究3 变态器官萝卜、胡萝卜、生姜、莲藕等解剖结构研究4 松属植物（雪松、白皮松、油松、华山松等）表皮特征及叶片解剖结构研究5 蔷薇科李属植物（日本樱花、晚樱、红叶李、碧桃）腺体结构特征研究第一章 植物制片的方法及准备工作 植物制片的方法 切片法 用切片刀或刀片将各种组织切成薄片制成玻片标本的方法。 1.徒手切片法 2.石蜡切片法 （切片厚度 8-10 m）3.火棉胶切片法 4.冰冻切片法 5. 滑走切片法 6.半薄切片法 （切片厚度 1-2m）7.超薄切片法（切片厚度 50-60nm） 非切片法 将小形植物体或较大植物体的一部分或其组织，不用刀切成薄片而制成玻片标本的方法。 1.整体装片法 2.涂片法 3.压片法 4.平铺法 5.离析法6.扫描电镜样品制备 制片前的准备工作 l 制片用的主要设备1、显微镜 2、石蜡包埋工具恒温箱 用于浸蜡、烤片及染色加温等。包埋箱 (熔蜡箱 ) 用于浸蜡、包埋。温度调节在 60 。3、切片工具 旋转切片机滑走切片机 冰冻切片机 超薄切片机1、旋转切片机2、滑走切片机2、滑走切片机4、冰冻切片机5、超薄切片机6、切片刀及其附件 7、自动磨刀机 8、染色工具染色缸 立式染色缸卧式 染色缸染色皿9、载玻片和盖玻片 载玻片的规格 7626mm，厚度： 1 1.2 mm。盖玻片的规格 方形 ： 1818 mm， 2020mm， 2222mm，2424mm。长盖玻片 : 5024 mm或 60 24mm。厚度： 0.13 0.17mm。盖玻片规格小型真空泵10、真空泵用于抽出材料中的气体。11、 电热温台 将要配制的酒精 浓 度（ %） 量取 95%酒精的量（ ml）应 加蒸 馏 水的量（ ml）30 30 6550 50 4570 70 2580 80 1585 85 1090 90 5l常用溶液的配制 各级酒精浓度的配 制低浓度溶液的配制1%番红水溶液的配制： 1g番红溶于 100 ml蒸馏水中。0.1%固绿酒精溶液的配制： 0.1g固绿溶于 100 ml95%的酒精溶液中。 第二章 石蜡法制片原理与方法材料的 选择 、采集与分割 取样前应注意的问题 1.研究正常结构时，应选择健全而具有代表性的部位取材；采取病理材料时，除取其病变的部位外，还应从病变的中央部分向四周，连同正常组织一起采取，以利观察分析。2.采取标本前，要根据制片的要求，选择并配制固定液，取材后应立即投入固定液，以防组织自溶和腐败。 3.切取材料时，刀必须锐利，动作要快但要仔细，切割时切勿拉锯式的来回切取，镊取时须轻夹轻放，尽量不损伤材料。4.材料尽可能新鲜，并切成所需的大小。这样有利于固定液的透入。5取材时要详细记录日期、采集地点、标本名称、时期