rh(d)血型鉴定(试管法)操作程序

Rh（D)血型鉴定（试管法）操作程序 1、目的 建立 Rh(D)血型操作规程，确保血型鉴定准确性和规范性。 2、适用范围 适用于试管法进行 Rh(D)血型鉴定试验操作程序 3、试剂 3.1 厂家： 上海血液生物医药有限公司 3.2 产品有限期：24 个月 3.3 试剂规格： 10ml 支 3.4 试剂稳定性：试剂未开启：2-8避光保存，稳定至包装盒上的效期。 3.5 试剂开启后请注明日期并签名，效期按厂家说明书要求。 4、质控操作 按照输血相容性检测室内质控操作程序执行，质控通过后填写血库 IQC 检测反应记单 5、检测原理 目前发现的人类红细胞上 Rh 抗原有 C、c、D、E、e5 种，Rh 血型形成的天 然性抗体极少，主要是免疫性抗体，已知有抗 D、抗 E、抗 e、抗 C、抗 c 抗体 等五种。抗 D 抗体是 Rh 血型系统中最常见的抗体。Rh 抗体有完全抗体和不完 全抗体两种完全抗体在机体受到抗原刺激初期出现，一般属 IgM 型，机体再次 受抗原的刺激则产生不完全抗体，如果五种不完全抗体血清(抗 D、抗 E、抗 e、抗 C、抗 c)做鉴定，可将 Rh 血型系统分为 18 个型别，在临床上因 D 抗原的 专业领域：血库 文件编号： 版本及修订后： 启用日期： Rh（D)血型鉴定（试管法） 操作规程 编写者： 审批者： 抗原性最强，出现的频率高，临床意义较大，故一般只做 D 抗原的血型鉴定， 如仅用抗 D 血清进行鉴定，则凡带有 D 抗原者称为 Rh 阳性，不带 D 抗原者称为 Rh 阴性。 6、标本处理 6.1 核对信息，将检查申请单信息与样本条码信息进行核对，信息一致方可进 行下述操作。 6.2 标本收集 EDTA-K2 抗凝血 2ml 6.2.2 标本出现溶血、乳糜血，为不合格样品，不能用于检测。 6.3 标本制备 6.3.1EDTA 抗凝血 2ml,离心 1000g/3min,分理出血球与血浆待用。 6.3.2 制备 5红细胞悬液，取 50ml 血球+1000ul0.9生理盐水。 7、操作步骤 7.1 取洁净试管一支，表明抗 D 用滴管滴加 Rh(D)IgMh 试剂 50ul,并向管中滴加 待检着 5红细胞悬液 50ul,混匀： 7.2 摇匀后用血库专用离心机 500g,离心 60 秒，观察结果： 7.3 将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或 溶血）现象，如果肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以低倍镜观察结 果。 7.4 结果判读 反应强度 凝 集 4+ 强反应，单一凝集块，无游离红细胞 3+ 强反应，几个大的凝集块 2+ 很多小的凝集块中混有大的凝集块，无游离红细胞 1+ 在游离红细胞背景下有很多小的凝集块 +/- 肉眼可观察游离红细胞下小的凝集块，光镜下课观察到很多小的 红细胞凝集块 - 镜下未见凝集块，红细胞均匀分布 7.5 判断结果应仔细核对后填写手工、半自动血型血清学原始记录，避免 第 3 页 共 3 页 电子报告与原始记录不符。 8、注意事项 8.1 试管、滴管、玻片应清洁干燥，防止溶血。 8.2 操作方法应按规定，一般先加血清，然后加红细胞悬液，一便容易核实是 否漏加血清 8.3 有些红细胞，如自身免疫溶血病人和新生儿溶血病患儿的红细胞常被免疫 球蛋白致敏，利用本操作规程的方法检测较为困难，容易造成假阳性结果。应 根据病人临床诊断和其他实验室试验确定病情后，利用放散试验进行定型。 8.4 为保证试验准确性，检测前的红细胞可用生理盐水洗 13 次去除吸附在红 细胞表面的血型物质（以溶解的红细胞基质、可溶性抑制物、血浆蛋白及抗凝 剂等成分）若连续两次洗涤后上清液仍不完全清澈，这种红细胞不宜使用 8.5 检测后标本置于 2-6标本专用冰箱中保存至少 7 天。 8.6 注意缗钱样凝集与凝集的区别。 8.7 若患者确定为 Rh(D)血凝阴性，及时通知其主管医生，根据其主管医生医嘱， 及时联系血站为其进行备血。 9、