a期乳腺癌组织中的表达及其临床意义

134 例青年局部晚期乳腺癌组 织中 HMGA2 和 Ki-67 的表达及 其临床意义 摘要 目的 探讨人乳腺癌组织中 HMGA2 和 Ki-67 的表达及其临床意义。方 法 采用 S-P 免疫组化方法，检测 134 例乳腺癌组织中 HMGA2 和 Ki-67 的表 达水平，并结合患者的相关临床资料进行分析。结果 乳腺癌组织中 HMGA2 和 Ki-67 的阳性表达率分别为 59.26%、50%；HMGA2 和 Ki-67 在有胸壁粘连 中阳性表达率分别为 83.3%、66.67%；在有胸壁粘连中阳性表达率分别为 19.40%、23.67%。结论： HMGA2 和 Ki-67 与乳腺癌的发生、发展有关，联合 检测有助于客观评价乳腺癌的生物学行为，从而指导临床治疗和预后判断。 关键词 乳腺癌；同源盒基因；细胞黏附因子 134 cases of locally advanced breast cancer youth HMGA2 and Ki- 67 expression and its clinical significance Abstract Objective to investigate the human breast cancer tissue HMGA2 and Ki-67 expression and clinical significance. Methods S-P immunohistochemical method detected 134 cases of breast cancer HMGA2 and Ki-67 expression levels, combined with the patients clinical data were analyzed. Results HMGA2 in breast cancer and Ki-67 positive expression rate was 59.26%, 50%; HMGA2 and Ki-67 in chest wall adhesions positive expression rates were 83.3%, 66.67%; chest wall adhesions in a positive expression rates were 19.40%, 23.67%. Conclusion: HMGA2 and Ki-67 with breast cancer occurrence and development, joint detection helps to objectively evaluate the biological behavior of breast cancer in order to guide clinical treatment and prognosis. Key words breast cancer; homologous gene; cell adhesion molecule. 世界卫生组织最新数据统计公布，乳腺癌发病率逐年上升，在我国乳癌发 病率跃居女性恶性肿瘤的第二位，且发病年龄较欧美国家偏小，甚至很多青年 患者发病时即为局部中晚期。局部晚期乳腺癌是指原发病灶直径大于 5cm(T3) 或有皮肤或胸壁粘连固定，区域转移的腋窝淋巴结互相融合或锁骨上淋巴结转 移 1、2 。 早发现，早诊断，早治疗是提高乳腺 癌 10 年生存率的重要前提，根据国 内外文献报道，高迁移率蛋白 HMGA2 和 Ki-67 与乳腺癌复发转移的相关性越 来越受到关注本实验采用免疫组化观察 HMGA2 和 Ki-67 在乳腺癌组织中的 表达，并探讨两者在乳腺癌疾病预后和肿瘤转归之间的作用。 l 材料与方法 11 一般资料 选取甘肃省肿瘤医院 2007 年 1 月至 2008 年 7 月，在我院行乳腺手术的组 织标本 134 例，患者均为女性。年龄在 3145 岁，中位年龄 40 岁。其中乳腺原 位癌 40 例，乳腺浸润癌(浸润性导管癌或单纯癌)68 例，乳腺良性增生组织 26 例。肿瘤原发灶与胸壁粘连固定 36 例，无胸壁粘连固定 72 例。 12 方法 所有组织标本用 4%甲醛固定，石蜡包埋，制成厚 4um 连续切片若干张进 行免疫组化染色。实验用 HMGA2 单抗，KI-67 多抗均购自 Sigma 公司，S-P 试 剂盒购自福建迈新公司，用已知阳性切片做阳性对照，用磷酸盐缓冲液(PBS)代 替第一抗做阴性对照，实验步骤均按照试剂说明书进行。染色结果判定均经过 两位以上病理科医师采用双盲法阅片，依据细胞核染色程度以及阳性细胞所占 比例采用双评分半定量法进行评定。 13 统计学处理 采用 SPSS18.0 进行统计分析，HMGA2 及 Ki-67 表达水平与各临床因素间 分析，采用检验 X2 检验或者 Fisher 精确检验法。 2 结果 21 不同病理类型中 HMGA2 及 Ki-67 蛋白表达结果 HMGA2 及 Ki-67 在乳腺增生组织中没有表达。乳腺导管内癌组织中阳性 率为 18，比乳腺增生组织中明显增高(P0.01) ，肿瘤基质中未见明显 HMGA2 的表达。而浸润性癌 HMGA2 的表达比增生组织及导管内癌显著升高(P0.05)， 而且间质中可见成纤维细胞内有阳性物表达。见表 l。 表 1 HMGA2 和 Ki-67 在不同乳腺组织中阳性表达 组 别 n HMGA2 n(%) Ki-67n(%) 乳腺增生组织 26 0 0 乳腺导管内癌 40 18（ 45%） 14（35%） 乳腺浸润癌 68 46（67.6%） 40（58.8%） 与增生组比较：P0.01，与导管内癌比较：P0.05； 23 肿瘤原发灶与胸壁粘连固定和无胸壁粘连固定 HMGA2 和 KI-67 的表达 在与胸壁粘连固定和无胸壁粘连固定的乳腺癌组织 HMGA2 及 KI-67 的表 达均有显著性差异(P005)。见表 2。 表 2 HMGA2 和 KI-67 在有无胸壁粘连乳腺组织中阳性表达 组 别 n HMGA2n() Ki-67n() 有胸壁粘连固定 36 30（ 83.3%） 24（66.7%） 无胸壁粘连固定 72 14（ 19.4%） 17（23.6%） 与有胸壁粘连固定组比较：P0.05 3 讨论 乳腺癌术后 5 年生存率仅为 5060%，大约一半的患者治疗后出现局部复 发远处转移，晚期乳腺癌患者平均存活时间仅 1830 个月，乳腺癌是乳腺导管 上皮细胞在各种内外致癌因素的作用下，失去正常特性而异常增生，以致超过 自我修复的限度而发生癌变的疾病。研究表明 3，先天异常基因和后天致癌因 素导致乳腺癌的发生发展和转归，但迄今为止，乳腺上皮细胞恶变的分子机制 和乳腺癌发病机理仍在艰难探索中。随着社会进步和医学不断发展，乳腺癌的 相关特异基因研究用以临床诊断和疾病靶向治疗越来越多。 高迁移率族(hishmobility group，HMG)蛋白由 HMGI/Y、HMGI/HMG2 和 HMGl4/HMGl7 这 3 个超家族组成，为便于检索和研究， 2000 年又被重新命名 为 HMGA(HMGI/Y)、HMGB(HMGl/HMG2)和 HMGN(HMGl4/HMGl7)。其中， 高迁移率族蛋白 A(highmobility groupA，HMGA) 家族包括 HMGAla、HMGAIb 和 HMGA2，其共同特征是可以通过结构中包含的 AT-hooks 结合域与 B 型 DNA 中富含 AT 的区域进行结合，继而改变染色质的结构，调节相关基因的表 达，从而影响胚胎形成、组织发育和肿瘤发生等过程。HMGA 是位于细胞核上 染色体小分子结合蛋白，在越来越多的人类恶性肿瘤中表现高含量。 HMGA2 是二十世纪 80 年代末新发现的成员，在细胞内的正常功能除已知 的与胚胎发育有关外，其他的尚未完全明确。但由于编码基因位于许多肿瘤细 胞染色体断裂点的簇集区，其异常表达与肿瘤的关系在国际上已日益引起关注。 人的 HMGA2 基因位于 12 号染色体的 q15 区，长 lO kb。1997 年 Piere 等 4利 用 RNA 印迹分析检测 HMGA2 在乳腺组织中的表达，并发现其在浸润性乳腺 癌高度表达，在正常乳腺或良性乳腺病变中几乎不表达，HMGA2 的表达高低 与肿瘤的恶性程度相关。在 21 例级乳腺癌病例中，有 17 例存在 HMGA2 的 高表达，而 16 例 I级者仅有 3 例表达，说明 HMGA2 的表达水平和乳腺癌 的组织学分级密切相关。许多恶性肿瘤组织及转移灶中明胶显表达明显增强 。 本实验数据表明 HMGA2 表达可能与乳腺癌的预后转归密切相关。基质中 的表达以浸润性癌明显，HMGA2 在有胸壁粘连固定组的乳腺癌中的表达比无 胸壁粘连固定组的病例明显升高，差异有显著性，这说明 HMGA2 与乳腺癌组 织的 基质浸润及胸壁侵袭密切相关。如果切断 HMGA2 的表达可能在一定程度上减 少乳腺癌的复发、转移。 Ki-67 是一种存在于增殖细胞核基质内的抗原，细胞有丝分裂期中 G。期 无表达，M 期表达最高，染色强度均匀恒定，半衰期短 (仅 1 h)，背景干扰少。 不仅能够反映肿瘤细胞增殖活性，而且能够有效提供增殖细胞的数量。因此， Ki-67 的检测已被广泛用于反映肿瘤细胞增殖速度和预测肿瘤预后 1113。本实 验结果表明，ki-67 蛋白的阳性表达部位为细胞核，染色十分清晰，便于形态学 研究。 本实验结果表明：乳腺癌组织中 HMGA2，KI-67 表达增强，肿瘤细胞脱 落能力提高，降解细胞基质膜及细胞外基质的能力增强，使肿瘤细胞在浸润侵 袭过程中突破上皮细胞的基底膜，血管基底膜及细胞黏附程度更高，从而导致 肿瘤细胞局部浸润和远处转移更为频繁。由此可知，降低 HMGA2 与 KI-67 的 表达将会减少乳腺癌的复发转移，改善预后。 参考文献： 1沈镇宙，邵志敏乳腺肿瘤学，P269 P271 2ScoR PFraser,James KJDiss，AthinaMyrto Chioni ，et a1VoltageGated Sodium Channel Expression and Potentiation of Human Breast Cancer MetastasisClin Cancer Res，2005，l l：53815389 3Rogalla P，Drechsler K，Kazmierczak B。et 以 Expression of HMGI-C，a member of the high mobility group protein family，in a subset of breast cancer：relationship to histolosic gradeJMoi Care，1997；19(3)：153-6 4 Waas ET，Lomme RM，De Gront J，et al Tissue levels of active matrix raetalloproteinase-2 and-9 in colorectai cancerJ BrJ Cancer，2007；86 (12) ：1876-83 5Franchi A，Maron S，Emenuela M，et al Expression of matrix metallopro-teinase l，2 and 9 in carcinoma of the head and neckJ Cancer，2006；95(9)：190210 6Van Frappen PO，Ryan A，Carroll M，et al A modelfor co-expression pat-tern analysis of cancer genes implicated in angiogenesis and tumor cell invasion in cervicalJ Br J Cancer 2007；89(2)：539-44 7Giamieri E，Mancini R， Pisani T，et alMshz 2，Msh 1，Fhit，p53，Bel-2 and Bax expression in invssive and in situ squamons cell carcinoma of the uterine cervixJ Clin Cancer Res，2000；6(9)：3600-6 8 Sheu BC，Lien HC，Ho HN，et alIncreased expression and activation of gelatinolytin matrix metalloproteinases is associated with the progression and recurrence of human cervical cancer J Cromer Res，2006；63 (11)：6537-42 9Chen HQ，Zhang XP， Chen