GB 15984-1995 霍乱诊断标准及处理原则

中华人民共和国国家标准霍乱诊断标准及处理原则5984一1995of of 发病急、传播快、波及面广、危害严重的甲类传染病，也是当今三种国际检疫传染病中最严重的一种。根据中华人民共和国传染病防治法和中华人民共和国传染病防治法实施办法的规定，制定本病的诊断标准及处理原则。1主题内容与适用范围本标准规定了霍乱的诊断标准，对病人、疫点、疫区的处理原则等，并推荐了对霍乱的病原学检查、血清免疫学检查、霍乱弧菌的鉴定和分型方法以及对病人的补液疗法等。本标准适用于全国各级卫生防疫、医疗保健机构对由01群和。139群霍乱弧菌引起的霍乱的诊断和处理2诊断原则根据夏秋季节霍乱流行期间的疫区内，凡有腹泻，伴有呕吐，从粪便或吐泻物检出01群或。139群霍乱弧菌或血清检查对01群或。139群霍乱弧菌的抗体有明显升高者予以诊断。病人的临床症状可由轻度到重度不等。剧烈腹泻，水样便(黄水样、清水样、米潜样或血水样)，伴有呕吐，迅速出现严重脱水，循环衰竭及肌肉痉挛(特别是胖肠肌)的首发病例，在病原学检查尚未肯定前。同餐、同住或护理者等)，并发生泻吐症状而无其他原因可查具有上述项目之一者诊断为疑似霍乱。便培养01群或。139群霍乱弧菌阳性;霍乱流行期间的疫区内，凡有霍乱典型症状(粪便培养01群和0139群霍乱弧菌阴性，但无其他原因可查者;双份血清抗体效价测定，如血清凝集试验呈4倍以上或杀弧菌抗体测定呈8倍以上增长者;次粪便培养检出01群或0139群霍乱弧菌前后各5天内有腹泻症状者。临床诊断:具备b。确诊病例:具备家技术监督局1995一12一15批准1996一07一01实施5984一19954临床分型标准4门轻型仅有腹泻症状，极少伴呕吐，大便一天少于10次，大便性状为软便、稀便或黄水样便，个别患者粪便带粘液或血，皮肤弹性正常或略差，大多数患者能照常进食及起床活动，脉搏、血压、尿量均正常。神表现淡漠，有音哑，皮肤干而缺乏弹性，眼窝下陷，有肌肉痉挛，脉搏细速，血压(收缩压)儿童 9. 33 70，成人12 - 9. 3390 0，尿量每日400水程度相当体重儿童为5写成人为4%4. 3重型腹泻次数一日20次以上，极度烦躁甚至昏迷，皮肤弹性消失，眼窝深凹，明显发给，严重肌肉痉挛，脉搏微弱而速，甚或无脉，血压(收缩压)儿童6. 6750成人9. 3370测不到等循环衰竭的表现，尿量每日50水程度儿童相当于体重10%以上，成人8%性霍乱)为一较罕见类型，起病后迅速进入休克状态，无泻吐或泻吐较轻，无脱水或仅轻度脱水，但有严重中毒性循环衰竭。5治疗原则5.，按甲类传染病隔离治疗。危重病人应先就地抢救，待病情稳定后在医护人员陪同下送往指定的隔离病房。确诊与疑似病例应分开隔离。口服补液为主。口服补液治疗方法可参考附录. 3中、重型脱水病人，须立即进行静脉输液抢救，待病情稳定、脱水程度减轻、呕吐停止后改为口服补液。输液治疗方法可参考附录予抗菌药物治疗以减少腹泻量和缩短排菌期。可根据药品来源及引起流行的霍乱弧菌对抗菌药物的敏感性，选定一种常用抗菌药物，连服3天常用抗菌药物及剂量可参考附录1停服抗菌药物后，连续二天粪便培养(如无粪便，可用肛拭子从直肠取粪便)未检出霍乱弧菌者解除隔离。无大便培养条件，自发病日起，住院隔离不得少于七天。便培养连续七天阴性，每周培养胆汁一次，连续两次阴性者可解除隔离，但尚需进行流行病学观察了疫点疫区处理疫点疫区的划定及处理的目的在于及时发现和管理传染源，切断传播途径，迅速控制疫情。对从首例病人检出的埃尔托型霍乱弧菌应及时做噬菌体一生物分型。如为流行株要及时划定疫点、疫区，并按下列规定处理。如为非流行株，按一般腹泻病菌处理。了门疫点、与病人、疑似病人或带菌者同一门出入的住户或与其生活有密切关系的若干户为范围。据疫点的地理位置、水系分布、交通情况、自然村落等特点来划定。一般在农村以一个5984一1995村或几个村、一个乡或毗邻乡，在城市以一个或几个居委会或一个街道为范围。疫情报告:责任疫情报告人发现病人、疑似病人或带菌者时，城镇于6村于12最快的通讯方式向发病地的卫生防疫机构报告，并同时报出传染病卡。人、疑似病人和带菌者要立即就地隔离治疗。转送病人时对途中污染的物品、地面和运送病人的工具要随时消毒处理。好随时消毒和终末消毒。对病人、疑似病人和带菌者的吐泻物和污染过的环境、物品、饮用水进行消毒。疫点内所有人员，自开始处理之日起每日验便一次。第一次采便应在服药前进行。根据药敏试验情况和药物来源选择一种抗菌药物，连服2天常用抗菌药物及服用剂量参考附录E。传染源隔离后，疫点内所有人员验便连续两次阴性，无续发病人或带菌者出现时可予以解除。如无粪检条件，自疫点处理后5日内无新病例出现时亦可解除。食卫生和集市贸易管理、做好粪便管理、改善环境卫生及时发现传染源，止传播。5984一1995附录充件)样便采取1形便采取指甲大小的粪量，亦可用直肠棉拭或采便管由肛门插入直肠内3 52标本的送检采得的标本应立即接种于培养基。不能立即检查的，要放入碱性蛋白陈水或文腊二氏保存液或插入本与保存液比例约为1:1直接分离培养:急性期病人水样大便标本在增菌培养的同时可取其粘液絮片或用棉拭子直接接种在选择性培养基上。目前常用的强选择性培养基有庆大霉素琼脂,4号琼脂和有粪便标本都应接种碱性蛋白陈水培养基，放37 菌膜下表层取一接种环培养物，划线接种于强选择性琼脂平皿。分离培养基上挑取可疑菌落与01群霍乱弧菌多价诊断血清及0139群霍乱弧菌诊断血清做玻片凝集试验。玻片凝集用血清的效价一般应为1:400。如可疑菌落在血清中很快(一般在10内)出现肉眼可见的明显凝集，在生理盐水中不凝集者判为阳性。可疑菌落较多时，应挑选5个以上的菌落逐个进行玻片凝集检查，必要时，取原划线菌落边缘透明部分再做玻片凝集，均为阴性时方可报告未检出01群及。139群霍乱弧菌。对首发病例菌株需送上一级实验室做进一步鉴定或复查。附录考件)查抗体的成分为抗菌抗体为进行血清学诊断，需要采取病人的双份血清，在发病第115查血清中抗菌抗体常用凝集试验和杀弧菌试验，杀弧菌试验比凝集试验敏感。生理盐水对倍连续稀释待检血清，每管含稀释血清0. 5标准菌在营养琼脂上的162%福尔马林生理盐水制成约含18亿菌/当于细菌标准比浊管浓度)的悬液，每稀释血清管加0. 5将菌悬液加入。匀，置37C 3放冰箱(40C)或室温过夜，观察最后结果。生理盐水对照不出现自然凝集，能使菌凝于管底成伞状，上清半透明者判为十+，以能使菌呈+凝集的血清最高稀释度判为血清凝集效价。第二份血清效价比第一份血清增长4倍或以上者有诊断意义。采用改良微量法，检测程序如下:2,3,5配制:用无菌蒸馏水配制。W/V)溶液，加热溶解，置灭菌棕色瓶中，4取标准01群及。139群霍乱弧菌为指示菌，分别连续在营养琼脂平板上分离2次，选取光滑型菌落2取小量接种于57培养6h，取。5984一1995种于57培养2h，用分光光度计测定492D)值，调整1为原液。将原液作1:50稀释后与1:10补体等量混合，即为补体指示菌混悬液。经洗涤处理、无水乙醇浸泡50. 025菌磷酸盐缓冲盐水将待测灭活血清一滴(0. 025入每排的第1孔，每孔稀释血清加入补体指示菌悬液一滴，加盖，在微型振荡器上振荡137孔加入含0. 01 %15大滴)，混匀后，继续置37孔内无颜色变化的血清最高稀释度为被检测标本的杀弧菌抗体滴度，第二份血清效价比第一份血清升高8倍或以上者有诊断意义。附录考件)型使用小川型及稻叶型的单价血清作玻片凝集反应。稻叶型单价血清不凝集者为小川型。2在小川型单价血清不凝集，在稻叶型单价血清凝集者为稻叶型。3在小川型、稻叶型单价血清均呈明显凝集者为彦岛型。0开始对倍连续稀释01群霍乱多价血清，每管含稀释血清0. 5当于细菌标准比浊管浓度)的悬液，每稀释血清管加入。将菌悬液。5匀，置37C 3放4或室温过夜，观察最后结果。生理盐水对照不出现自然凝集，能使试验菌出现+凝集的血清最高稀释倍数为凝集滴度，凝集滴度达到或超过血清原效价一半的即可确定为01群霍乱弧菌。对一次流行的首批病例菌株和玻片凝集反应不典型的菌株应做本试验。古典型和埃尔托型的鉴别1按表 .，1曰100/(+)+一(十)一(+)+(一)一+(一)一+，一5984一1995注:括弧内为少数菌株结果。项试验与噬菌体分型在同一平皿上进行，1. 5%普通琼脂加热溶化，待冷却至50 0每毫升培养基加入50单位多粘菌素B，摇匀后倾注平皿，凝固后备用。在平皿背面用玻璃笔划出若干方格。将被检菌2干后放37培养过夜，观察结果。被检菌不生长或生长不足10个菌落为敏感，记录为+号。清洁平皿内划出方格，用直径4被检菌18生理盐水中制成浓厚菌悬液。再用接种环各加一滴经洗涤三次的2. 5%鸡血球生理盐水悬液，充分摇匀，肉眼观察结果。球呈均匀分散状态者为阴性。埃尔托型为阳性，古典型一般为阴性d. 被检菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白陈水，373天。然后取出1 6荡5s，加入40%氢氧化钾液。2振荡5s，去掉棉塞置室温。在性者在试剂加入后逐渐出现浅褐色。古典型为阴性，而埃尔托型多为阳性。被检菌24试管装8养物1%绵羊红血球(生理盐水洗3次，最后1次离心速度为2000r/心10匀后放3 2放4验应有已知溶血株、不溶血株和肉汤管做对照。达半数血球溶解者为溶血阳性。为证明为不耐热溶血素，可将被检菌的培养物加热560C 30典型不产生可溶性溶血素，埃尔托型有些产生，有些不产生不耐热的可溶性溶血素。埃尔托型霍乱弧菌分成32个噬菌体型(表3+十斗+十+斗+十+一一+一+一十+6789托11121314155984一1995续表十+十+十+通琼脂平皿的背面，用玻璃笔划出9个方格，再将被检菌224匀后倾注于琼脂平皿上。待干后，于第11010/第6,7格分别滴加第0/常规稀释液(10/第8,9格滴埃尔托型霍乱弧菌的溶原噬菌体两个代表株(溶原性菌株的18560C 30作为对溶原噬菌体敏感性的测定。待干后放37察结果。依据被检菌对表4. 溶原噬菌体的敏感性、山梨醇发酵试验和溶血试验等四个生物学性状，将埃尔托型霍乱弧菌分成12个生物型(表表物学性状生物型溶原性对溶原噬菌体的敏感性山梨醉试验溶血试验+一+-+-+一+-+八朽5984一19952. 2溶原性测定:从埃尔托型霍乱弧菌复愈型抗链霉素株7 通琼脂培养基，待凝固后，于平皿底的背面用玻璃笔划出16方格，并注明被检菌号。将40. 7%普通半固体琼脂培养基加热融化，待冷至50加入链霉素200。单位及指示菌0. 3匀，倾注于上述已凝固的琼脂平皿底层上。待凝结后，将被检菌的18接种环分别滴加在指示菌平皿的每个小格内，待干后放37现不透明的磨玻璃样噬斑或裂解区，边缘有明显的、窄的、不圆整的裂解环者为阳性。2. 3对溶原噬菌体敏感性的测定:在噬菌体分型的平皿上，滴加埃尔托溶原噬菌体代表株(溶原性菌株的18560C 307 0现不透明噬斑者为阳性，表明被检菌株对溶原噬菌体敏感，即为复愈型菌株，不出现噬斑者可能是溶原株，也可能是非溶原株。0. 1 5整0或9.。之后，加。解后分装小试管，每管30. 06取被检菌21种于山梨醇发酵管(0),37培养3行株发酵迟，培养基呈粉红色，为(一);非流行株发酵快，培养基呈黄色，为(十)。使用0山梨醇发酵管时，培养4一54. 2. 5溶血试验:同3噬菌体一生物分型区分两类菌株标准将噬菌体分型与生物分型结合起来，即噬菌体一生物分型，可将埃尔托型霍乱弧菌区分为流行株和非流行株两类菌株。噬菌体1中噬菌体1la,菌体61为常见的非流行株，如8i,9k,30菌体132型一生物型埃尔托霍乱疫情处理时按噬菌体一生物分型结果区别对待，考件)荐使用下列口服补液盐(方。葡萄糖20g(或白糖40g),氯化钠3. 5g、碳酸氢钠2. 5g(化钾1. 5g，加水1000含 90 K 20 30萄糖111 上各药成分可先行配好，装入小袋，临用时加水配制。市场上已有口服补液盐成品出售，使用时按说明兑水。2口服补液原则轻型患者，最初4表无条件测大便量，可根据病人能喝多少，就给服多少。中、重型患者经静脉快速输液，使血压回升，呕吐停止后，即可口服补液治疗。5984一1995表于4个月423个月24岁)15岁体重，量, 11400 400600 600800 800200 2200)只有当不知道病人的体重时才用年龄来估算需的重(x 75mL/L)541溶液，或生理盐水。541溶液的配方为:1000酸氢钠4g,氯化钾1g(内含1349K 13 48用时每1000萄搪20防低血搪。在基层单位为方便应用，可按。化钠550酸氢钠3000 %氯化钾l 萄糖140度脱水以口服补液为主，如有恶心呕吐不能口服者，可予静脉输液3000含糖的541溶液或5%葡萄塘盐水加入氯化钾2每分钟3吐停止后改为口服补液。4008 初2电解质溶液(7补充适量的钾)2 000血压、脉搏恢复正常后，可减慢输液速度为每分钟5 继续用541溶液。原则上应于入院8院后的继续损失量和每天生理需要量(成人每天约2 以后按排出多少补充多少的原则补液。补液量完成后，如呕吐停止但仍有腹泻，可改为口服补液。400 12 由静脉推注含搪541溶液1 000每分钟4O需20后按每分钟20 30000至休克纠正为止。以后相应减慢速度，补足入院前累计丢失量后即按每天生理需要量加上排出量的原则补液。若呕吐停止可继以口服补液疗法。腹泻即应补钾，对严重腹泻脱水引起休克、少尿的患者应早期应用含钾量不甚高的541溶液。快速补液时如每小时超过2 酸中毒严重则应酌情另加碳酸氢钠纠正。用于中毒性休克患者，或重型患者经输液疗法，估计液体已补足，但血压仍低或测不出者。可以用氢化考的松100地塞米松20在另一输液瓶用异丙基肾上腺素0. 5多巴胺20阿拉明20 0 切观察，随时调速。如液量不足，可重复如上配制，直至使血压维持在休克水平以上。应用异丙基肾上腺素时应注意，如心率在130次/2. 2儿童补液方法张液:a. 2:1液一0. 9氯化钠N :酸氢钠(或166. 7b. (或166. 7b. 1:1加碱液=。化钠液250萄糖250张液:3:2:1液=100. 9 %氯化钠液:1. 4 %碳酸氢钠(或166. 72- 常用口服补液疗法。不能口服者可用静脉输液，人院后24生理盐水与500葡萄糖液2，1比例给予，每分钟1 2应注意补钾。b，中、重型:患儿重度脱水，需立即静脉补液，输液量在6间分两阶段进行