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专 业: 临 床 医 学 班 级: 实验小组: 第三实验室第一小组 小组成员:邓荒 各种因素对家兔血液凝固的影响 各种因素对家兔血液凝固的影响 邓荒 (XX 医学院临床医学,贵州 XX 123456) 【摘要】 目的 探究各种因素对血液凝固的影响及机制。方法 对新鲜家兔血液分别做置于室温、低温、加 肺组织浸液、棉花、加肝素、加草酸钾、用竹签搅动处理,观察记录其凝血时间并与不做任何处理的血液凝固时间 进行对比,分析凝血时间的变化。结果 草酸钾、肝素、低温处理的血液凝固时间较室温长,放少许棉花、肺组织 浸液处理后的血液凝固时间较室温短,用竹签搅动过的血液不再凝固。结论 草酸钾、肝素、低温可抑制血液凝固; 增加粗糙面、组织因子可促进血液凝固;纤维蛋白是血液凝固过程中所产生的不可少的物质。 【关键词】 血液;血液凝固因子;肝素;草酸钾 Various factors on the impact of blood coagulation in rabbits TANG Jun, LI Ya-Qi, LU Chi-Shuang, WU Chang-Min-Jie, LIU Ye, LI Jun,WANG Dan, ZHOU Jun, RAN Jun- Hao, ZHU Nan. Clinical 09 G Class,XX Medical College,XX 123456,Guizhou,China 【Abstract】 Objective To explore the various factors on blood coagulation and its mechanism. Methods Fresh rabbit blood were done at room temperature, low temperature,plus heparin, potassium oxalate, stirred with a bamboo handle, and observed and recorded the clotting time of blood with no treatment clotting time compared to analyze changes in clotting time. Results The potassium oxalate, heparin, low-temperature processing of blood clotting time longer than the room temperature, put a little cotton, the lung tissue after infusion of blood clotting time shorter than the room temperature, stirred with a bamboo stick through the blood does not and then solidified. Conclusion The potassium oxalate, heparin, low temperature can inhibit blood coagulation; increase the rough surface, tissue factor can promote blood coagulation; fiber protein is produced by the process of blood coagulation in the essential material. 【Key words】 Blood; Blood Coagulation Factors; Heparin; Potassium oxalate 血液凝固参与生理性止血的过程,是机体重要 的保护机制之一。血液凝固的关键过程是血浆中溶 胶状态的纤维蛋白原转变成凝胶状态的纤维蛋白。 多聚体纤维蛋白交织成网,将大量血细胞网罗其中 形成血凝块。血液凝固是一系列复杂的酶促反应过 程,需要多种凝血因子的参与。本次实验将观察各 种因素对血液凝固的影响并探究血液凝固的机制。 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物 家免两只,贵阳医学院动物 实验中心提供。 1.1.2 实验药品 25%氨基甲酸乙酯溶液,肝 素(8 U/ml) ,2%草酸钾溶液,生理盐水,肺组织浸 液(取兔肺剪碎,洗净血液,浸泡于 34 倍量的生 理盐水中过夜,过滤收集的滤液即成肺组织浸液, 存冰箱中备用) 。 1.1.3 实验仪器 免手术台,哺乳动物手术器 械,动脉夹,动脉插管(或细塑料导管),注射器( 5 ml,10 ml) ,试管 6 支,小烧杯 2 个,试管架, 竹签 1 束(或细试管刷),秒表,三角尺 3。 1.2 方法 XX 医学院机能实验学探索性实验论文 第 3 页/共 4 页 1.2.1 动脉插管 行家兔右颈总动脉插管术 1, 准备放血。 1.2.2 试管处理 取 6 支试管,编号。1 号试 管置于室温作为对照组,将 2 号试管置于冰水中, 3 号试管滴加肺组织浸液 0.1 ml,4 号试管中放入 少许棉花,5 号试管滴加 8U/ml 肝素 0.1 ml,6 号 试管滴加 2%草酸钾 0.1 ml。 1.2.3 放血 由动脉插管依次向 6 支试管放血, 每管 2ml,血液进入试管起开始计时,每隔 15s,将 试管倾斜 30 度,观察血液是否流动,血液突然停止 时,终止计时,从开始计时至终止计时的时间为血 液凝固时间。 1.2.4 烧杯处理 准备 100ml 的烧杯 2 个,编 号。分别放血 10ml,同时计时, 1 号烧杯作为对照 不做任何处理。2 号烧杯用竹签朝一方向搅动血液, 待竹签上出现凝血块时,停止计时,记录凝血时间, 并观察去纤维蛋白的血液是否凝固。 2 结 果 草酸钾、肝素、低温处理的血液凝固时间较室 温长,放少许棉花、肺组织浸液处理后的血液凝固 时间较生理盐水短,详见表 1。 烧杯 1 中血液不做任何处理,正常凝血。烧杯 2 中不断用竹签搅动血液,1h 后竹签上缠绕有白色 丝状物,血液不再凝固,详见表 1。 表 1 某些因素对家兔血液凝固影响 注:实验室室温 7 3 讨 论 3.1 血液凝固机理 血液凝固的化学本质是溶胶 状态的纤维蛋白原转变成凝胶状态的纤维蛋白,催 化此反应的主要是凝血酶。而正常血液中以无活性 的凝血酶原形式存在,在一定条件下被激活而成为 凝血酶。凝血酶原激活物是由活化的凝血因子和磷 脂胶粒和钙的形式复合物,因此凝血因子的活化是 导致血液凝固的触发机制,据触发凝血过程的形式 不同,又有内源性和外源性凝血之分。内源性凝血 是指因心血管内膜受损或血液抽出机体外接触异物 表面而触发的,仅有血管内凝血因子参与的凝血过 程;外源性凝血则指有损组织释放的组织凝血活素 所参与的凝血过程 2。 3.2 低温对凝血的影响 将血液置于冰块中,凝 血时间较室温长。因此,本次实验证明低温可抑制 凝血作用。其机制为凝血酶发挥作用需要适宜的温 度,温度适宜时,凝血酶活性高,血凝速度快。温 度较低时凝血酶活性低,血凝速度慢。 3.3 肺组织浸液对凝血的影响 肺组织浸液含组 织因子,而组织因子在凝血过程中起促进作用。组 织因子是一种脂蛋白复合物,含有大量磷脂。当它 进入血浆后。血浆中的钙离子将因子连接于组织 因子的磷脂上,形成复合物,后者可使凝血因子 试管号 影响因素 凝血时间(min:s) 1 室温 19:23 2 置于冰水中 48:13 3 肺组织浸液 0.1 ml 1:00 4 少许棉花 4:26 5 8U/ml 肝素 0.1 ml 52:39 6 2%草酸钾 0.1 ml 61:48 烧杯 1 加血 10 ml 不加任何处理 正常凝血 烧杯 2 加血 10 ml 用竹签不断搅动 竹签上缠绕有白色丝状物,血液不凝固 活化为,并与 Ca2+、因子 V 和血小板磷脂相互 作用而形成凝血酶原激活物,然后通过与内源性凝 血系统后阶段相同的途径,完成凝血的化学反应 3。 因此,肺组织浸液可促进血液凝固,本次实验中加 入肺组织浸液 0.1ml 后血液凝固时间明显缩短。 3.4 棉花对血液凝固的影响 实验中在血液中放 入少许棉花后血液凝固时间较室温缩短。棉花给血 液凝固提供了一个粗糙的表面。粗糙表面可引发血 小板集聚,而相对光滑的表面可阻止纤维蛋白和血小 板聚集的粘附。 3.5 肝素对血液凝固的影响 实验中肝素延长了 凝血时间,机理如下。肝素在体内、体外均有强大 抗凝作用。静脉注射后,抗凝作用立即发生,这与 其带大量负电荷有关,可使多种凝血因子灭活。这 一作用依赖于抗凝血酶(antithrombin ,AT ) 。AT 是凝血酶及因子 、 等含丝氨酸的蛋白酶的抑 制剂。它与凝血酶通过精氨酸-丝氨酸肽键相结合。 形成 AT 凝血酶复合物而使酶灭活,肝素可加速 这一反应达千倍以上。肝素与 AT 所含的赖氨酸 结合后引起 AT 构象改变,使 AT 所含的精氨酸 残基更易与凝血酶的丝氨酸残基结合。一旦肝素 AT 凝血酶复合物形成,肝素就从复合物上解离, 再次与另一分子 AT 结合而被反复利用。AT - 凝血酶复合物则被网状内皮系统所消除。抑制凝血 酶活性的作用与肝素分子长度有关。分子越长则酶 抑制作用越大 4。 3.6 草酸钾对凝血的影响 在众多的凝血因子中, 凝血因子是 Ca2+,而其他的凝血因子均属蛋白类。 Ca2+可与草酸盐、柠檬酸盐、氟化钠等生成螯合物 而除去,使凝血酶源不能激活,从而产生抗凝效果。 3.7 竹签搅动对血液凝固的影响 实验中用竹签 不断搅拌血液 1 h 后,即使停止搅拌,血液也不再 凝固。而在竹签上可见白色丝状物,该物质即为不 溶性的纤维蛋白。血液凝固的实质就是血浆中的可 溶性纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白的过程。 纤维蛋白交织成网,把血细胞和血液的其他成分网 罗在内,从而形成血凝块。用竹签搅动后不容性的
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