球菌、大肠杆菌、厌氧菌

第九章 球菌 球菌：革兰氏阳性球菌主要介绍葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌； 革兰氏阴性球菌主要介绍脑膜炎双球菌、淋球菌。 化脓性细菌能感染人体并引起化脓性炎症的细菌 第一节 葡萄球菌属 分布非常广泛。病原性葡萄球菌是最常见的化脓性细菌，医务人员的带菌率 70% vs 正常 30%。主要包括三个菌种：金黄色葡萄球菌（s.aureus)、表皮葡萄球菌(s.epidermidis)及腐生葡 萄球菌(s.saprophyticus)。 一、金黄色葡萄球菌 （一）生物学特性 1、形态染色：单个菌体呈球形，呈葡萄串状排列，直径平均 1 m，G+菌，无鞭毛，无芽孢； 2、培养特性：营养要求不高，普通培养基即可生长，中等大小 S 型菌落，并因种不同出现金 黄色、白色、柠檬色脂溶性色素，金萄菌溶血毒素在血平板上形成 溶血。 2、 生化反应：产酸不产气 触酶阳性 致病菌株分解甘露糖。 3、 抗原结构 SPA：存在于细胞壁上的表面抗原，可与 IgG 的 Fc 段结合，可进行协同凝集，并具有抗吞 噬等生物学活性。 荚膜：有利于黏附和抗吞噬。 多糖抗原（磷壁酸抗原）：黏附。 5、分类: 根据 DNA 同源性：葡萄菌属分 38 种。 根据色素和生化反应：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。 根据凝固酶：凝固酶阳性菌株、阴性菌株。 6、抵抗力 是无芽胞细菌中最强的。 对热、干燥、消毒剂、UV 等因素均有较强抵抗力 耐盐，在 1015%NaCl 培养基中生长（选择） 对碱性染料(龙胆紫)敏感 对青霉素、金霉素、红霉素等抗生素均高度敏感，但对青霉素的耐药菌株 90% (易产生耐药性，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为医院感染最常见致病菌。) （二）致病性 致病物质 酶类：凝固酶等酶类：凝固酶等 表面结构：粘附素、荚膜、肽聚糖和表面结构：粘附素、荚膜、肽聚糖和 SPA 等。等。 外毒素：葡萄球菌溶素、杀白细胞素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素外毒素：葡萄球菌溶素、杀白细胞素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1、肠毒素等、肠毒素等 1、 凝固酶凝固酶（coagulase）：能使人或兔血浆发生凝固的酶类。 游离、菌体外、试管法；结合、菌体上、玻片法。 致病机制： 血浆中液态的纤维蛋白原固态的纤维蛋白沉积于细菌表面，可阻碍吞噬细胞吞噬，即使 被吞，也不易被杀死； 可屏蔽血清中杀菌物质 使感染易于局限化和形成血栓 决定了金黄色葡萄球菌引起化脓性感染时的感染特点：病灶局限、不易扩散、而且脓汁粘稠。 常作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标 2 2、葡萄球菌溶素（、葡萄球菌溶素（staphylolysinstaphylolysin）：）：、 四种溶素。 溶素(蛋白质）为主要致病因子，攻击机子，溶红细胞，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤 维细胞、血管平滑肌细胞等有损伤。 3 3、杀白细胞素（、杀白细胞素（panton-valentinepanton-valentine，PVPV）：）：破坏中性粒细胞和巨噬细胞。 4 4、肠毒素（、肠毒素（enterotoxinenterotoxin）：）：约 1/3 临床分离的金黄色葡萄球菌可产生，可引起急性胃肠炎。 耐热，10030min，可抵抗胃肠蛋白酶水解。 超抗原。 刺激呕吐中枢，导致以呕吐为主要症状的毒素性食物中毒。 5 5、表皮剥脱毒素（、表皮剥脱毒素（exfoliativeexfoliative toxintoxin，exfoliatinexfoliatin）：）： 是蛋白质、由噬菌体群金黄色葡萄球菌产生具有抗原性，甲醛脱毒制成类毒素，引起烫伤样 皮肤综合征（staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS） 6 6、毒性休克综合征、毒性休克综合征-1-1（toxictoxic shockshock syndromesyndrome toxin1toxin1，TSST-1TSST-1）：）： 超抗原，约 20%金黄色葡萄球菌产生。可导致发热、对内毒素的敏感性增加、休克甚至多个器 官系统功能紊乱等毒性休克综合征（toxic shock syndrome, TSS） 。 7 7、耐热核酸酶、耐热核酸酶：由致病性葡萄球菌产生，耐热，能较强的降解 DNA 和 RNA。耐热核酸酶是 测定葡萄球菌有无致病性的重要指标之一。 纤维蛋白溶酶（葡激酶）：纤维蛋白溶酶（葡激酶）：激活纤维蛋白酶原使之成为纤维蛋白酶，导致血浆纤维蛋白的溶 解，有利于病菌的扩散。 透明质酸（扩散因子）透明质酸（扩散因子）：降解结缔组织的透明质酸。 脂酶脂酶：分解脂肪。 触酶：触酶：分解过氧化氢。 所致疾病 1、 化脓性感染：局部感染；全身感染（败血症、脓毒血症） 2、 毒素性疾病：食物中毒；假膜性肠炎（菌群失调症） ；烫伤样皮肤综合征；毒性休克综合 征 （三）免疫性：人类对葡萄球菌具有一定天然免疫力。 皮肤黏膜受伤或宿主免疫力降低时，易感染。 恢复后可获得一定免疫力，但难以防止再次感染 （四）微生物学检查：标本的采集直接涂片镜检分离培养鉴定（致病性葡萄球菌 的鉴定依据：产生血浆凝固酶、耐热核酸酶、金黄色色素、溶血素、发酵甘露醇。 ） （五）防治 预防很重要，医务人员的带菌率高达 70% ，是院内交叉感染的重要传染源；注意个人卫生、 公共卫生，不滥用抗生素；治疗应选择敏感药物；自身菌苗的脱敏疗法。 二、凝固酶阴性葡萄球菌二、凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase negative staphylococcus，CNS） 过去认为不致病，但目前已成为医源性感染的常见菌，而且耐药菌株为金葡更为多见。 CNS 十余种与致病有关，最多是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。 常引起泌尿系统感染、细菌性心内膜炎、败血症及术后感染。 第二节 链球菌属（streptococcus） 链球菌属分类 分布广泛；大多数不致病 病原性链球菌：化脓性链球菌（A 群链球菌）和肺炎链球菌等。 化脓性炎症、毒素性疾病、超敏反应性疾病（风湿热、肾小球肾炎）等。 类别溶血现象类型致病性 甲型溶血性链球菌菌落周围有 12mm 宽的草绿色溶血环 溶血多为条件致病菌 乙型溶血性链球菌 菌落周围有 24mm 宽的界限分明、完全透 明的无色溶血环 溶血致病力强 丙型链球菌不产生溶血素，菌落周围无溶血环 溶血 无致病性 根据抗原结构的分类 细胞壁多糖抗原C 抗原分群：A、B、C 等 20 群，对人致病的 90%属 A 群。同一群又分若干 型， 如： A 群根据 M 型抗原分成约 100 型。 根据氧的需要分类 需氧链球菌及兼性厌氧链球菌：致病 厌氧链球菌：条件致病菌 一、A 群链球菌 （一）生物学特性 1、形态染色：单个菌体呈球形，G+，链状排列，无芽胞，无鞭毛，有菌毛，幼龄时有荚膜； 与葡萄球菌比较，菌体略小，在其卵圆端连接 ； 2、培养特性：营养要求较高，普通培养基生长不良，需加入血液、血清、葡萄糖等； 血清肉汤易形成长链，呈沉淀生长 血平板 灰白色，半透明细小 S 型菌落，有 溶血。 3、 生化反应：触酶 而葡萄球菌 菊糖发酵、胆汁溶解而肺炎链球菌 4、 抵抗力：不强。青霉素首选，极少产生耐药性。 （二）致病性 1、致病物质 （1）细胞壁成分 脂磷壁酸（脂磷壁酸（LTALTA）增强细菌对细胞的黏附（表面受体）增强细菌对细胞的黏附（表面受体） M M 蛋白：粘附，抗吞噬和抗吞噬细胞内的杀菌作用；蛋白：粘附，抗吞噬和抗吞噬细胞内的杀菌作用； 与心肌和肾小球基底膜有交叉抗原，可致风湿性心内膜炎和肾小球肾炎。与心肌和肾小球基底膜有交叉抗原，可致风湿性心内膜炎和肾小球肾炎。 F 蛋白：粘附和抗吞噬 （2）侵袭性酶：透明质酸酶(hyaluronidase)：分解细胞间质的透明质酸。 链激酶(streptokinase, SK)：使血液中溶纤维蛋白酶原转变为溶纤维蛋白酶，溶 解血块或阻止血浆凝固。 链道酶(streptodornase, SD)：DNA 酶。降解高度黏稠性的 DNA，使脓液稀薄。 胶原酶 (collagenase)：溶解胶原纤维。 引起化脓性感染特点：脓汁稀薄，感染容易扩散外毒素类 （3）链球菌溶血素：根据对 O2 的稳定性分为 SLO 和 SLS。 SLO：含有-SH 蛋白质，对 O2 敏感，还原后具有溶血作用 1 破坏红细胞、白细胞、血小板，对心肌、神经细胞也有毒性作用 抗原性强，23 周出现抗“O”抗体，维持数月至 1 年，其效价1：400 可做为新近感染或风湿活动指标 SLS：小分子糖肽，对 O2稳定；血平板上 溶血；无抗原性 2 (4) 链球菌致热外毒素（streptococcal pyrogenic exotoxin, SPE）又称红疹毒素或猩红热毒素 溶原性菌株产生 人类猩红热的主要致病物质 2、所致疾病 化脓性感染：皮肤及皮下：丹毒；其他系统：扁桃体炎 中毒性疾病：猩红热 超敏反应性疾病：风湿热、急性肾小球肾炎炎 （三）免疫性：（三）免疫性：A 群链球菌感染后，机体可获得对同型链球菌的特异性免疫力，各型之间无交 叉免疫力。可反复感染 微生物学检查：标本采集涂片镜检分离鉴定 血清学试验抗链球菌溶血素 O 实验（ASO） ASO 试验可作为风湿热的辅助诊断指标（效价1:400） 。 防治： 治疗首选青霉素 G ，避免链球菌完全可减少风湿热和肾小球肾炎的发病。 二、肺炎链球菌 1、形态染色 G+菌，菌体呈矛头状，成对排列，钝端相对，锐端相背，有荚膜，无芽胞，无 抗 O 试 验 鞭毛。 2 、培养 要求较高，在血平板上产生草绿色溶血环（ 溶血）与甲链相似，有自溶现象。 3 、与甲链的鉴别方法 菊糖分解（+） 、胆汁溶菌（+）Optpchin 实验（+） 。 4、 测定 C 反应蛋白 C 多糖存在于该菌细胞壁上的特异性多糖，能被人血清中的 C 反应 蛋白（CRP）所沉淀，CRP 正常人只含微量，急性炎症时剧增，故可用 C 多糖测定 CRP。 5、抵抗力 较弱 6、致病性 肺炎链球菌是一种条件致病菌，可以引起大叶性肺炎 及继发感染 7、免疫性：出现抗肺炎链球菌荚膜多糖的特异性抗体，二次感染少见 三、其他医学相关链球菌 B 群链球菌（GBS）无乳链球菌 GBS 正常寄居阴道与直肠，带菌率 30% 新生儿感染（经产道或呼吸道）败血症及脑膜炎死亡率高。 D 群链球菌肠球菌 条件致病菌，为医院感染的重要致病菌，常见尿路感染。 甲型溶血性链球菌 条件致病菌，可引起亚急性细菌性心内膜炎 变异链球菌与龋齿发病有关。 第三节 肠球菌属 人肠道中正常菌群之一； 医院内感染医院内感染的主要致病菌，在需氧 G+球菌中，仅次于金葡菌。 致病菌：粪肠球菌粪肠球菌 (Enterococcus faecalis) 微生物学检查-肠球菌专用琼脂平板(Bile esculin agar) 注意耐药性耐药性 致病物质: 黏附素, 细胞溶素, 等. 医院感染的重要病原菌, 引起尿路感染, 腹腔盆腔感染, 败血症等. 治疗: 因其耐药严重, 应根据药敏结果选择抗生素. 第四节 奈瑟菌属 （Neisseria） 革兰阴性双球菌，专性需氧 致病的有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，其余为人类呼吸道正常菌群。 淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔粘膜。 一、脑膜炎奈瑟菌 生物学性状 形态染色： G ，呈肾型，成双排列，有荚膜及菌毛 培养特性 营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板，形成光滑透明 “露滴样”菌落。 专性需氧，510%CO2，37（40 30均不生长） 易产生自溶酶 抵抗力：很弱 致病物质: 荚膜，菌毛，蛋白酶, LOS 所致疾病流行性脑脊髓膜炎(流脑) 传播源: 人是唯一宿主，5-15% 正常人鼻咽带菌，流行期 70-80%. 传播途径：飞沫传播，经呼吸道感染 潜伏期：2-3 天 临床类型 普通型：高热、出血性皮疹、脑膜刺激症状 爆发型：内毒素休克、DIC，24h 之内死亡 慢性败血症型：少数成人病程迁延数日 前两种以儿童多见(易感人群) 免疫性: 体液免疫为主。 微生物学检查与防治 标本 病人：脑脊液、血液、皮疹液 带菌者：鼻咽拭子 标本保温保湿送检，最好床边接种 直接涂片镜检：脑脊液离心沉淀，血斑刺破，有诊断价值 分离鉴定 快速诊断 防治：控制传染源，切断传播途径，提高免疫力、接种疫苗、治疗首选青霉素 G。 二、淋病奈瑟菌（gonococcus） 淋球菌 俗称淋球菌（俗称淋球菌（gonococcus）,人类淋病的病原菌。人类淋病的病原菌。 引起泌尿生殖系统化脓性感染。引起泌尿生殖系统化脓性感染。 淋病是我国目前发病率最高的性传播疾病（淋病是我国目前发病率最高的性传播疾病（sexually transmitted disease ，STD） （一）生物学特性 1、形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似， G，双球菌， 咖啡豆状，有荚膜和菌毛，无芽胞， 无鞭毛。 脓汁标本中急性病人：细菌位于中性粒细胞内；慢性病人：细菌位于细胞外。 2、培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长， 形成灰白色细小 S 型菌落。 3、生化反应：氧化酶（+） ，只分解葡萄糖，不分解麦芽糖等其它糖类 4、抗原及分类：以外膜蛋白抗原分 16 个血清型 5、抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似） 。 （二）致病性 致病物质：菌毛（决定有无致病性） 、荚膜、外膜蛋白、脂寡糖等 所致疾病淋病（化脓性炎症） ， 人是唯一宿主，性接触传播，潜伏期 2-5 天，新生儿淋菌性结膜炎（脓漏眼） 。 （三）微生物学检查与防治：分泌物涂片镜检，分离培养。青霉素，头孢三嗪(Ceftriaxone)治 疗有效。 第十章 肠杆菌科 是一大群生物学性状相似的革兰氏阴性短小杆菌，有的为致病菌，多为肠道内正常菌群， 可引起医院感染。 肠杆菌科的共同特点： 形态结构 G小杆菌，钝圆杆菌，无芽孢，多数有鞭毛及菌毛 培养特性 需氧或兼性厌氧 营养要求不高，普通培养基可生长，菌落相似，形成灰白色中等大小 S 型菌落。 肠道选择培养基： 生化反应 活跃，常用于鉴别肠道杆菌 抵抗力不强，60 30min 即可灭活 抗原结构复杂 菌体（O）抗原 鞭毛（H）抗原 表面（K、Vi）抗原 易出现各种变异 第一节 大肠杆菌（埃希菌属） 一、生物学性状 形态染色 符合肠杆菌特点，周毛菌，有菌毛 培养特性 符合肠杆菌特点 EMB紫黑色有金属光泽 乳糖发酵菌落 S-S桃红色 生化反应 IMViC（+-） 抗原 O 抗原（ O1-O173） H 抗原（H1-H56） K 抗原（K1-K100） 血清型表示法：O：K：H 二、致病性 （一）致病物质 除内毒素、荚膜肠杆菌科共有的毒力因子外，大肠埃希菌具有独特的毒力因子有： 黏附素具有高度特异性 吸附、定植、致病 外毒素（由 ETEC 产生的肠毒素） （1）不耐热肠毒素（LT） ，分 LT-I 和 LT-两型 蛋白质对热不稳定，与霍乱肠毒素相似 A 亚单位毒素活性成分 机制 B 亚单位与肠上皮细胞受体（GM1 神经节苷脂）结合 B 单位与受体结合导致 A 进入细胞内激活腺苷酸环化酶，后者使 ATP 变成 cAMP，导致 小肠液过渡分泌，肠腔内积聚大量液体，导致腹泻。 （2）耐热肠毒素（ST） ，分 STa、STb 两型，为低分子多肽，对热稳定，机制为激活细胞鸟苷 酸环化酶，使 cGMP导致腹泻。 LT 和 ST 同时存在，致病性更强。 （二）所致疾病： 1、肠道外感染（内源性感染） 化脓性感染定位转移 腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、 败血症、新生儿脑膜炎等 泌尿道感染病原菌来自病人肠道（上行性） 占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等） 2、肠道感染胃肠炎（腹泻） ， （外源性感染） 肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）： 婴幼儿、旅游者腹泻，与霍乱功能相似 肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）： 成人腹泻，与菌痢相似 肠致病性大肠埃希菌（EPEC）： 婴儿腹泻（水样腹泻） 肠出血性大肠埃希菌（ EHEC，O157）： 出血性结肠炎， 溶血性尿毒综合征（HUS） 肠集聚性大肠埃希菌 （EAEC）： 婴儿腹泻（持续性） 三、微生物学检查法 标本涂片、染色分离培养鉴定 肠道外感染：尿路感染时每 ml 尿含菌10 万，有诊断价值。 肠道内感染：用选择鉴别培养基，分离培养+生化反应+血清分型+毒素测定+核酸检测等 卫生细菌学检查：卫生学标准：每 1000ml 水中大肠杆菌3 个，每 100 ml 瓶装汽水、果汁中， 大肠杆菌5 个。 第二节 志贺菌属（痢疾杆菌） 一、生物学性状 1、形态染色：符合肠杆菌特征，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区别 点。 2、培养特性肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落 3、生化反应 葡萄糖（+） 、乳糖（-） （宋内志贺菌迟缓发酵乳糖） 、H2S-、尿素（-） 、动力（-） 4、抗原分类根据 O 抗原分 4 群，40 余型 A 群痢疾志贺菌（10） B 群福氏志贺菌（13） C 群鲍氏志贺菌（18） D 群宋氏志贺菌（1） 5、 抵抗力 比其它肠杆菌弱，尤其对酸敏感 二、致病性与免疫性 （一）致病物质 1、侵袭力 黏附肠黏膜上皮细胞 通过型分泌系统向细胞内分泌蛋白，导致细菌的内吞，穿透上皮细胞并 扩散、传播 内毒素强烈内毒素，作用于局部并可吸附入血引起全身症状 外毒素A 群（、型）产生志贺毒素（ST） ，阻断蛋白质的合成。 所致疾病细菌性痢疾 传染源：病人、带菌者 传播途径：经口 临床类型：急性菌痢；中毒性菌痢；慢性菌痢 免疫力 不牢固，易再感染 三、微生物学检查与防治 分离鉴定 毒力实验 快速诊断 四、防治原则 更有效的疫苗还在研制中，此菌极易出现耐药性，依药株。 第三节 沙门菌属 是肠杆菌科中最复杂的菌属，有 2000 种以上血清型 对人类有致病性 肠热症伤寒沙门菌，甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌 食物中毒鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌 败血症猪霍乱沙门菌最常见 一、生物学性状 1、形态染色：符合肠杆菌特点，多为周毛菌，有菌毛。 2、培养特性：EMB、SS 上呈无色透明乳糖不发酵菌落。 3、生化反应：乳糖（-） ，葡萄糖（+） ，多数 H2S+，动力+，尿素（-） 4、抗原结构 O 抗原特异性低、稳定、分群（组） H 抗原特异性高，不稳定，分型 Vi 抗原（毒力抗原）不稳定，可阻止“O”凝集 5、抵抗力 不强 二、致病性与免疫性 （一）致病物质 1、侵袭力 菌毛吸附 型分泌系统穿入细胞，扩散 Vi 抗原微荚膜（抗吞噬） 2、内毒素 3、外毒素个别（鼠伤寒沙门菌）产生，与 ETEC 肠毒素相似。 （二）所致疾病 肠热症 临床过程 潜伏期 2W 发病期：高热、肝脾肿大、皮疹、WBC等全身中毒症状，此期血液（80%） 、骨髓 （90%（+）有大量细菌。随着病情的发展，全身症状持续加重，此期血、骨髓中仍有菌，但 粪便（60%） 、尿（20%） 、皮疹液中可查到细菌， 由于型变态反应并发症发生， 血液抗体达到阳性标准肥达反应 恢复期：第四周末，体温下降，症状消失，恢复期带菌 1 年（粪便仍阳性） ，血液抗体仍高 2、胃肠炎（食物中毒） 潜伏期短，6-24h，起病急，病程短 2-4 天，发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻 3、败血症 经口感染，经肠道入血，败血症症状明显而肠道症状不明显 4、带菌者 健康带菌者，恢复期带菌者 5、免疫性 肠热症，病后免疫牢固，其它可重复感染 三、微生物学检查与防治 标本采取 肠热症：1W 取血，2W 取粪便，3W 取尿液，13W 取骨髓液 食物中毒：粪便、呕吐物、可疑食物 败血症：血 带菌者：粪便 分离鉴定：增菌（血、骨髓）EMB、SS生化反应血清鉴定 血清学诊断肥达反应（Widal） 原理：用已知伤寒沙门氏菌 O 抗原及 H 抗原，以及引起副伤寒的沙门氏菌 H 抗原与待检血清 作凝集试验，测定待检血清中有无相应抗体及其效价。 （TO、TH、PA、PB） 。 方法：试管凝集法（定量） TO1：80，TH1：160，PA、PB 均1：80 才有意义 动态观察：双份血清抗体四倍升高有诊断意义 临床意义 O 抗体（IgM） ， H 抗体（IgG） O 、H 抗体均升高，患伤寒的可能性大 O 、H 抗体不升高，患伤寒的可能性小 只有 H 升高，则可能是预防接种过或非特异性回忆反应， 只有 O 升高而 H 不高，则可能是感染早期或其他沙门菌的交叉反应。 第四节 其他菌属 克雷伯菌属（7 个种） 肺炎克氏菌（3 个亚种）的肺炎亚种，俗称肺炎杆菌，与人类感染有关 G-球杆菌，无动力，有较厚的荚膜，多有菌毛 抵抗力低下者易感，常引起医院内感染，如肺炎、支气管炎、泌尿道感 染等 变形杆菌 G-杆菌，有多形性，周身鞭毛，运动活泼，在普通培养基上呈扩散性生长，称为迁徙生长现象 迅速分解尿素，尿素（+）为本菌特征，乳糖（-） 外斐试验（Weil-Felix）： 本菌某些特殊菌株如 X19、X2、XK 的 O 抗原与某些立克次氏体有共同抗原成分， 临床上应用 OX19、OX2、OXK 代替立克次氏体抗原与斑疹伤寒或恙虫病患者血清做凝集试 验，以辅助诊断立克次体病 为条件致病菌 原发感染食物中毒 继发感染尿路感染（仅次于大肠埃希菌） 、创伤、腹膜炎、败血症等 第十三章 厌氧性细菌 厌氧菌是生长和 代谢不需要氧气，利用发酵而获取能量的一群细菌。 厌氧性芽胞梭菌（外源性感染致病菌） 根据芽胞有无 无芽胞厌氧菌（内源性感染条件致病菌） 第一节 厌氧芽孢梭菌属 一、破伤风梭菌 （一）生物学特性 1、 形态染色：革兰阳性，细杆状，周毛菌，芽胞正圆形，位于菌体顶端，大于菌体宽度，呈 鼓槌状。 2、 培养特性：专性厌氧，在血平板上呈扩散生长，有溶血。 3、 抵抗力：强，芽孢在干燥的土壤和尘埃中可存活数年。对青霉素敏感。 （二）致病性与免疫性 破伤风梭菌经创口感染，感染发生与否与伤口的条件有关，重要的条件是伤口形成厌氧微环境： 伤口窄而深，混有泥土及异物；坏死组织多，局部缺血；伴有需氧菌或兼性厌氧菌的混合感染。 致病物质破伤风痉挛毒素（外毒素） 为神经毒素，毒性强（iug） ，与脊髓前角运动细胞及脑干细胞有高度的亲和力，破伤风痉挛毒 素可与中枢神经抑制性突触前膜的神经节苷脂结合，阻断抑制性介质的释放，导致神经持续兴 奋，骨骼肌强直性痉挛，肌张力。 所致疾病破伤风 潜伏期：7-14 天，长短取决于伤口与 CNS 距离 临床表现：肌肉强直性收缩，牙关紧闭、吞咽困难、苦笑面容、角弓反张等，阵发性抽搐等， 严重者因呼吸肌痉挛窒息死亡。 免疫力不牢固。 （三）微生物学检查与防治 典型的症状和病史可以诊断。 预防：及时清创，防止形成厌氧微环境。 注射疫苗：白百破三联疫苗，对可能引发破伤风的外伤，紧急注射抗毒素，对发病的大 量使用抗毒素，同时使用抗生素。 二、产气荚膜梭菌 （一）生物学性状 G+粗大杆菌，无鞭毛，有荚膜，芽胞椭圆形，位于次极端 ，宽度小于菌体。不严格厌氧，营 养要求不高，繁殖快（1 代 8min） 。血平板双层溶血环（内环 溶血、外环 溶血） 。生化代 谢活跃，分解多种糖、产酸产气， “汹涌发酵”，在牛奶培养基中分解乳糖产酸，使其中的酪蛋 白发生凝固，同时产生大量的气体，可将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，气势凶猛。根据其主要毒 素的抗原性分 A、B、C、D、E5 个型，A 型为主。 （二）致病性 1、致病物质 能产生十余种外毒素，有的是酶类。 毒素（卵磷脂酶）增加血管通透性，溶血、坏死作用，最重要 毒素组织坏死 毒素增加胃肠壁通透性 毒素坏死 2、所致疾病 1）气性坏疽（产气荚膜梭菌为主） 创伤感染、伤口条件与破伤风相似，潜伏期短 8-48h，局部组织坏死，产生大量气体，组织气 肿（捻发音） ，压迫神经末梢，剧烈疼痛并伴有恶臭，最后大块肌肉坏死，毒素入血（毒血 症） ，全身中毒症状，休克、死亡（30%） 。 2）食物中毒 较轻，1-2 天自愈。 （三）微生物学检查与防治 微生物学检查 由于气性坏疽发病急剧、后果严重，病原学诊断十分重要 直接涂片镜检：革兰大杆菌，白细胞少形态不典型，伴有杂菌。 分离培养鉴定 动物试验 防治原则无类毒素特异性预防 及时清创、扩创，切除坏死组织，必要时截肢，大剂量青霉素，气性坏疽多价抗毒素和高压氧 舱法联合使用。 三、肉毒梭菌 （一）生物学特性 革兰阳性粗短杆菌，芽孢呈椭圆形，粗于菌体，位于次极端，使细菌呈网球拍状，有鞭毛，无 荚膜。严格厌氧，芽孢抵抗力强，肉毒毒素不耐热，100 度 1 分钟破坏。 （二）致病性 致病物质肉毒毒素：是一种强烈的神经外毒素，是目前已知毒素中毒力最强者，对人的致 死剂量是 0.1g。 肉毒毒素作用机制（嗜神经毒素）：作用部位位于外周神经肌肉神经接头处，可以 阻止乙酰胆碱的释放，运动神经末梢功能失调，导致肌肉松弛性麻痹（软瘫） 。 所致疾病 1）毒素性食物中毒（肉毒中毒） 食入被肉毒梭菌芽孢污染的食物，芽孢发芽繁殖，产生毒素，导致食物中毒。国外以罐头、香 肠、腊肠、发酵豆制品等制品为主，潜伏期短，临床表现：无胃肠道症状，为神经末梢麻痹症 状、乏力、头痛，包括眼肌（复视、斜视、眼睑下垂） ；喉肌（吞咽困难、咀嚼不灵、语言障 碍）膈肌（呼吸困难、死亡率高 20-70%） 。 2） 婴儿肉毒病 3） 创伤感染中毒 （三）微生物学检查与防治 检测毒素动物试验 加强相关食品的卫生监督和管理，发病后尽早注射肉毒多价抗毒素 四、艰难梭菌 革兰阳性大杆菌，有鞭毛，有芽孢，位于次极端。是肠道 的正常菌群，长期使用抗生素，耐 药的艰难梭菌可导致抗生素相关性腹泻和假膜性结肠炎。 第二节 无芽孢厌氧菌 是人类的正常菌群。 常见有的有： 1、 革兰阳性球菌：主要是消化链球菌属 2、 革兰阴性球菌：韦荣菌属 3、 革兰阳性杆菌：丙酸杆菌、双歧杆菌 4、 革兰阴性杆菌：类杆菌属 致病条件（厌氧菌感染因素） 厌氧微环境：血管损伤，肿瘤压迫等导致氧化还原电势降低。 机体免疫功能下降或菌群失调 寄居部位改变 感染特征 内源性感染，部位广泛，多呈慢性过程 无特定病型，多为化脓性感染（局部、全身） 分泌物粘稠，有色，恶臭 常用抗生素无效 普通培养不长，涂片可见细菌 所致疾病遍布全身各组织器官：腹腔、生殖盆腔、口腔、呼吸道、脑感染，败血症。 病原学检查厌氧培养与鉴定 第二节 耶尔森菌属 一、鼠疫耶尔森菌 属肠杆菌科耶尔森菌属，俗称鼠疫杆菌，是我国法定烈性传染病鼠疫的病原体 历史：三次世界性大流行 目前：仍有散在及爆发（死亡率 10-30%） 监控：是我国重点监控的自然疫源性传染病 （一）生物学性状 1、形态染色：G球杆菌，两极浓染，有荚膜，无鞭毛，无芽胞，慢性病灶，陈旧培养物，高 盐培养基上呈多形性 2、培养特性：在普通培养基上生长形成细小的、粘稠的粗糙型菌落，在液体培养基中于 48 小 时可形成菌膜， 轻摇可呈“钟乳石”状下沉，有诊断意义。 3、抗原构造：较复杂，至少有 18 种， F1 抗原：荚膜抗原抗吞噬，与毒力有关。 V/W 抗原：抗吞噬，与毒力有关 外膜抗原：突破防御 鼠毒素：对鼠类有剧毒 内毒素：与细菌内毒素相似 4、抵抗力：对理化因素抵抗力弱， 但在自然环境中存活时间很长。 （二）致病性与免疫性 致病物质 F1、V/W、外膜抗原、鼠毒素、内毒素等，实质器官出血性炎症、组织坏死及全身 中毒症状，该菌毒力强，少量细菌即可致病 所致疾病 烈性传染病鼠疫（黑死病） 传播媒介：鼠蚤 传播途径：鼠蚤叮咬、呼吸道 临床类型：腺鼠疫急性淋巴结炎，多在腹股沟和腋下。 肺鼠疫吸入染菌的尘埃，病人高热、胸部症状如咯血、呼吸困难。死亡患者皮肤 呈黑紫色，故有“黑死病”之称。 败血症鼠疫主要是败血症的表现，如高热、休克、全身出血等，死亡率高。 免疫力牢固。 （三）微生物学检查与防治 专用实验室检测 警惕生物武器 检测动物鼠疫动态 灭鼠灭蚤 接种疫苗 抗菌素治疗 第三节 芽孢杆菌属 一、炭疽芽孢杆菌 炭疽芽胞杆菌是人类历史上第一个被发现的病原菌，为芽胞杆菌属主要致病菌。 （一）生物学特性 1、形态与染色 G+ 粗大杆菌，为致病菌中最大者，两端平齐，呈竹节状排列。有芽胞，小于菌体，椭圆 形，位于菌体中央，有氧条件下形成（空气中） 。有荚膜本菌特征（其它芽胞杆菌无荚膜） 。 2、培养特性 需氧或兼性厌氧（厌氧几乎不长） ，营养要求不高，典型菌落为 R 型卷发样菌落。 串珠试验（+） ，在含微量青霉素培养基上，发生形态变异，为大而均匀圆球形，呈串珠状（以 区别其它芽胞杆菌） 3、抗原构造 结构抗原 荚膜多肽抗原 菌体多糖抗原 芽孢抗原 炭疽毒素三种不同成分蛋白质组成复合毒素 4、 抵抗力很强：在干燥的土壤或皮毛中可存活数年至 20 年，对化学消毒剂的抵抗力也比较 强，对青霉素敏感。 （二）致病性与免疫性 1、致病物质：荚膜和炭疽毒素，荚膜抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散。炭疽毒素直接 损伤微血管内皮细胞组织水肿、微循环障碍、血液呈高凝状态、引起休克、DIC、死亡。 2、所致疾病：炭疽（人和食草动物牛、羊、马等） 传染源：病畜、死畜 传播途径：多途径传播 临床类型 皮肤炭疽微小伤口侵入，接触患病动物或毛发，皮肤黑色凝固样坏死、焦 痂，故名，最多见 肠炭疽经口感染，食入未煮熟的病畜的肉、奶等，呕吐、肠麻痹、血便。 肺炭疽吸入芽胞，血痰等 三种类型均可引起败血症，炭疽性脑膜炎，死亡率高 病后可获得牢固免疫 （三）微生物学检查与防治 1、标本采集 皮肤炭疽病灶渗出液 肠炭疽粪便 均取血液 肺炭疽痰 动物尸体严禁室外解剖，避免形成芽胞，取少量组织送检 2、 检验 炭疽为烈性传染病属国际检疫范围，病原学诊断极为重要 直接涂片G+竹节状大杆菌，有荚膜 分离培养卷发样菌落，串珠试验阳性等 3、 防治 a)死畜焚毁或深埋 2m 以下 b)预防接种 疫区 易感人群 第十四章 分枝杆菌属 细长或稍弯的杆菌，因有分枝生长趋势而得名。 一般不易着色，加温或延长染色时间着色后能抵抗盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌（acid- fast bacillus） 。 分类 结核分枝杆菌复合群：结核分枝杆菌、牛分枝杆菌 非结核分枝杆菌：鸟分枝杆菌复合群等 麻风分枝杆菌 特点特点 1 、细胞壁含有大量的脂类。、细胞壁含有大量的脂类。 2 、菌体不易着色，不易脱色，故采用抗酸染色，故又称抗酸杆菌。、菌体不易着色，不易脱色，故采用抗酸染色，故又称抗酸杆菌。 3 、无特殊结构，也不产生内外毒素。、无特殊结构，也不产生内外毒素。 4、 所致感染多为慢性过程，破坏性病变。所致感染多为慢性过程，破坏性病变。 5、 种类多，对人致病的主要有结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌。种类多，对人致病的主要有结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌。 第一节 结核分枝杆菌 俗称结核杆菌，引起结核病结核病 世界防治结核病日：3 月 24 日 结核病：最多见的一种机会性感染，HIV 阳性者死亡的主要原因，全球重大公共卫生问题。 生物学性状 1、形态染色：菌体细长微弯，有分枝，排列不规则，多单个散在，易发生 L 型，抗酸染色阳 性。 2、培养特性 专性需氧，温度 37，pH 偏酸 6.5-6.8 营养要求高，罗氏培养基，液体培养基，呈菌膜生长 生长缓慢，18h 分裂一次，2-4W 形成 R 型菌落， “菜花样菌落”，乳白色干燥不透明，表面 呈颗粒结节，边缘不整 3、 生化反应：不发酵糖类 触酶试验阳性，热触酶试验阴性；（非结核分枝杆菌均为阳性） 结核分枝杆菌可合成烟酸和还原硝酸盐 4、 抵抗力强：抗干燥，抗酸碱，抗化学消毒剂，对湿热和紫外线敏感，对抗结核药（链霉素、 异烟肼、利福平等）敏感，但易产生耐药性。 四怕：乙醇、湿热、紫外线、抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等）四怕：乙醇、湿热、紫外线、抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等） 四不怕：干燥、酸、碱、碱性染料、青霉素等抗生素四不怕：干燥、酸、碱、碱性染料、青霉素等抗生素 6、变异性： 形态结构变异 L 型：颗粒状、丝状、Much 颗粒 毒力变异 卡介苗 BCG：Calmette 和 Gurin 将牛分枝杆菌经 13 年 230 次传代而获得的减毒活疫苗 株 耐药性变异 耐异烟肼及其他抗结核药物菌株增多 二、致病性 结核杆菌无侵袭性酶，不产生内、外毒素，其致病性主要由于细菌繁殖引起炎症；菌体成分； 代谢产物毒性作用；抗体对菌体成分产生免疫病理损伤。 致病物质：菌体成分。 1、脂、脂质质存在存在细细胞壁，占菌胞壁，占菌体体干重的干重的 20-40%， ， （ （1） ）磷磷脂：脂：促使单核细胞增生，并使炎症灶中的巨噬细胞转化为类上皮细胞，形成结核结节促使单核细胞增生，并使炎症灶中的巨噬细胞转化为类上皮细胞，形成结核结节 （ （2）脂肪酸（索）脂肪酸（索状状因子）因子）：破坏细胞线粒体膜、影响细胞呼吸、抑制白细胞游走和引起慢性肉芽：破坏细胞线粒体膜、影响细胞呼吸、抑制白细胞游走和引起慢性肉芽 肿，去除后，丧失毒性。肿，去除后，丧失毒性。 （ （3） ）蜡质蜡质 D（分枝菌酸（分枝菌酸+肽肽糖脂）糖脂） （ （4）硫酸）硫酸脑苷脑苷脂和硫酸多脂和硫酸多酰酰基化海藻糖基化海藻糖：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合。：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合。 作用：引起结核结节，慢性肉芽肿及组织细胞干酪样坏死等病变 2、 蛋白质 重要的是结核菌素，结核菌素+蜡质 D迟发型变态反应。 3、多糖、核酸和荚膜，抗吞噬。 所致疾病：结核病 传染途径：呼吸道、消化道和破损的皮肤粘膜。 （一）肺部感染 1、原发感染：常见于儿童，也称外源性感染。 结局：机体抵抗力强：形成结核结节纤维化钙化自愈（但病灶内常有细菌的潜伏） 机体抵抗力差：活动性肺结核干酪样坏死 全身播散粟粒样结核 （2）继发感染常见成人（原发病灶内源性感染） 特点：局部病变重，但不易扩散 一般局限于肺部，易发生干酪样坏死，可形成空洞和开放性肺结核 （二）肺外感染 部分肺结核患者体内的结核分枝杆菌可经