瑞舒伐他汀钙uv溶出度检查毕业设计实习报告

学校代码学校代码 10126 学号学号 00810003 分分 类类 号号 密级密级 本科毕业实习报告 瑞舒伐他汀钙瑞舒伐他汀钙 UV 溶出度检查溶出度检查 方法学研究方法学研究 学院、系学院、系 化学化工学院、化学系 专业名称专业名称 应用化学专业 年年 级级 2008 级 学生姓名学生姓名 倪移 指导教师指导教师 胡瑞生 教授 实习单位实习单位 北京天衡药物研究院 2012 年 5 月 28 日 2 2 瑞舒伐他汀钙 UV 溶出度检查方法学研究 摘 要：瑞舒伐他汀钙是一种新型全合成单一对映异构体他汀类药物，化学 品溶出度是指在规定的溶剂和条件下，药物从片剂、胶囊剂、颗粒剂等固体制 剂中溶出的速度和程度。本报告以(+) (3R, 5S)-双7-4-(4-氟苯基)-6-异苯基-2- (N-甲基-N-甲磺酰基氨基) 嘧啶-5-基-3, 5-二羟基-6-(E)-庚烯酸钙为原料药，对 其进行 UV 溶出度检查方法学研究试验。通过本试验，确定了瑞舒伐他汀钙的 溶出试验条件和紫外检测条件，符合瑞舒伐他汀钙国家药监局药品注册标准。 关键词：关键词：瑞舒伐他汀钙 溶出度 方法学 UV 内蒙古大学本科毕业实习报告 Methodology Study on Dissolution Test and UV Detection of Rosuvastatin Calcium Student: Ni Yi Tutor: Hu Ruisheng Abstract: Rosuvastatin Calcium is a novel drug of HMG-CoA reductase inhibitors, and Dissolution rate is the rate and extent of drugs dissolve from solid formulations of tablets, capsules, granules etc. in specified conditions. In this report, (+)-(3R,5S) bis(E)-7-4-(4-fluorophenyl)-6-isopropyl-2- methyl(methylsulfonyl)aminopyrimidin-5-yl(3,5-dihydroxyhept-6- enoicacid)calcium, as the raw material, was researched. Through this experiment, the condition of dissolution test and UV detection of Rosuvastatin Calcium were identified, which conform the SFDA drug registration standards. Key Words: Rosuvastatin Calcium, Dissolution rate, Methodology, UV 4 4 目录目录 第一章 绪论1 1.1 瑞舒伐他汀钙药物简介.1 1.1.1 他汀类药物简介他汀类药物简介.1 1.1.2 瑞舒伐他汀钙简介瑞舒伐他汀钙简介.1 1.1.3 瑞舒伐他汀钙药理作用瑞舒伐他汀钙药理作用.2 1.2 化学药品 UV 溶出度检查试验2 1.2.1 紫外紫外-可见分光光度计法可见分光光度计法(UV).2 1.2.2 化学药品溶出度方法研究化学药品溶出度方法研究.4 第二章 瑞舒伐他汀钙 UV 溶出度检查试验6 2.1 试验样品、试剂和仪器.6 2.1.1 主要试验样品主要试验样品.6 2.1.2 主要试验试剂主要试验试剂.6 2.1.3 主要试验仪器主要试验仪器.6 2.2 UV 溶出度检查研究试验7 2.2.1 样品检测波长的确定样品检测波长的确定.7 2.2.2 空白辅料对原料药吸收波长的影响空白辅料对原料药吸收波长的影响.8 2.2.3 工作曲线的绘制工作曲线的绘制.8 2.2.4 仪器精密度的确定仪器精密度的确定.9 2.2.5 回收率试验回收率试验.9 2.2.6 原料稳定性试验原料稳定性试验.11 2.2.5 两批样品（素片和包衣片）溶出度检查两批样品（素片和包衣片）溶出度检查.12 2.3 溶出度检查方法比较试验（包衣片）.15 2.3.1 方法及转速比较方法及转速比较.15 2.3.2 溶出介质比较溶出介质比较.16 第三章 结论18 致谢19 参考文献20 0 0 第一章 绪论 1.1 瑞舒伐他汀钙药物简介 1.1.1 他汀类药物简介他汀类药物简介 他汀类药物是 20 世纪 80 年代后期开发的羟甲戊二酰辅酶 A(HMG-CoA)还 原酶抑制剂。该类药物的问世是降脂药治疗史上的重大进展，其除具有调脂作 用强、耐受性好等优点外，在冠心病的一级和二级预防中也发挥着重要作用， 即可降低心血管事件发生率和心血管疾病死亡率。 目前，已经上市的他汀类药物包括：洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、阿 托伐他汀、瑞舒伐他汀钙等。其中瑞舒伐他汀钙的疗效和安全性最好，匹伐他 汀是潜在的“超级他汀” 。1 1.1.2 瑞舒伐他汀钙简介瑞舒伐他汀钙简介 瑞舒伐他汀钙(Rosuvastatin Calcium) 化学名：(+) (3R, 5S)-双7-4-(4-氟苯 基)-6-异苯基-2-(N-甲基-N-甲磺酰基氨基) 嘧啶-5-基-3, 5-二羟基-6-(E)-庚烯酸 钙，分子式：(C22H27FN3O6S)2Ca，分子量：1001.15。是日本盐野义制药公司研 发的一种新型全合成单一对映异构体他汀类药物。其结构式如图 1.1。瑞舒伐他 汀钙片于 2002 年 11 月在荷兰批准上市，2003 年在美国正式获准上市，其商品 名为 Crestor。瑞舒伐他汀钙适用于经饮食控制和其它非药物治疗（如：运动治 疗、减轻体重）仍不能适当控制血脂异常的原发性高胆固醇血症（IIa 型，包括 杂合子家族性高胆固醇血症）或混合型血脂异常症（IIb 型） 。本品对光灵敏， 需遮光，密封，在阴凉（不超过 20干燥处保存。 2 瑞舒伐他汀钙具有强 力的 HMG-CoA 还原酶抑制活性，并具有肝细胞作用选择性，且其药动力学性 质优异，半衰期长，安全性好，符合理想的他汀类药物的必备条件。经过大量 临床试验确认，其降低 LDL-C，升高 HDL-C 的作用优良。瑞舒伐他汀钙临床 耐受性好，无肝毒性和肌毒性。只需 1 日 1 次用药，早、晚服用均可，患者顺 应性好。3-5 内蒙古大学本科毕业实习报告 第 1 页 1 图 1.1 瑞舒伐他汀钙结构式 1.1.3 瑞舒伐他汀钙药理作用瑞舒伐他汀钙药理作用 瑞舒伐他汀钙与 HMG-CoA 还原酶有相似结构，能竞争性抑制 HMG-CoA 还原酶（该酶是胆固醇生物合成中的限制酶） ，导致干细胞内胆固醇含量降低， 因而刺激肝细胞表面 LDL 受体表达增加，促进 LDL 和 LDL 前体从循环中清除。 瑞舒伐他汀钙还可以抑制肝脏合成载脂蛋白 -100 和减少富含甘油三酯脂蛋白 的合成与分泌。6 瑞舒伐他汀钙有典型的他汀钙药效集团，通过独有的甲基磺 胺基(methyl sulfonamide) 与 HMG-CoA 还原酶结合，甲基磺胺基使瑞舒伐他汀 相对亲水。不同于其他他汀类药物相对亲脂，制剂在脂质中溶解增加，不加鉴 别地进入所有细胞，瑞舒伐他汀钙对肝细胞有高度选择性，通过特异转运蛋白 进 入肝细胞，明显抑制肝细胞胆固醇合成，但不抑制肝以外细胞的胆固醇合成。7 1.2 化学药品 UV 溶出度检查试验 1.2.1 紫外紫外-可见分光光度计法可见分光光度计法(UV) 紫外-可见分光光度计法指通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围 内的吸光度，进行定量或定性分析的方法。200400nm 为紫外光区， 400760nm 为可见光区。 一、原理 OH F 3 H3C 2 2 单色（单波长）光穿过被测物质溶液时，在一定浓度范围内，吸光度与溶 液的浓度和吸收池厚度成正比。 即 A=Ecl （比尔定律） 其中 A 为吸光度；c 为浓度(g/100ml)；E 为吸收系数，指当溶液浓度为 1%(g/ml)、液层厚度为 1cm 时的吸光度；l 为吸收池厚度，cm。通常使用 1cm 吸收池（当浓度太小时可使用 2 或 5cm 吸收池） ，用对照品比较法测定。 E、l 为常数，则 A1/A2=c1/c2，c1=A1c2/A2 二、溶剂的选择 在样品能溶解的前提下，选无毒且便宜的溶剂。首选水；其次常用 0.1MHCl、Ph6.8 磷酸盐缓冲液；水溶液不溶时选用有机溶剂如甲醇、乙醇等。 三、波长的选择 方法：原料按 1030ug/ml 配制溶液，测定吸光度，根据 A 值找出恰当浓度 后，在 200400nm 范围内扫图，并用与之匹配浓度的辅料扫图。 判断标准：在检测波长处，原料有最大吸收值，且空白辅料无明显吸收。 四、工作曲线 原理：在一定范围内，吸收值 A 与浓度 c 呈线性关系。 方法：取原料药适量，精密称定，配制浓溶液，移取不同体积稀释成 6 个 浓度（检测浓度为中心） ，测定吸收值，计算 r。 判断标准：r0.998（通常要求0.999） 五、精密度 取工作曲线项下浓溶液稀释成 6 份相同浓度的稀溶液，测定吸收值，A 值 的 RSD75%。12 2.3 溶出度检查方法比较试验（包衣片） 试验方案如表 2.6，试验结果如表 2.7 和图 2.5。 表表 2.6 溶出度检查方法比较试验方案溶出度检查方法比较试验方案 方法介质转速 rpm取样时间 h检测波长 nm 一法（篮法） 方法比较 二法（桨法） pH6.6 枸橼酸缓冲溶液50 30min 取样 10ml，补液 100 转速比较二法（桨法）pH6.6 枸橼酸缓冲溶液 75 同上 0.1mol/L 盐酸溶液 pH6.6 枸橼酸缓冲溶液 pH4.0 缓冲液 介质比较二法（桨法） 水 50 分别 5、10、15、30 、45、60min 取样 10ml，补 液 242nm 2.3.1 方法及转速比较方法及转速比较 表表 2.7.1 方法及转速比较试验对照品相对方法及转速比较试验对照品相对 A A 值值 称样量/mgAA相对均值 20.790.3920.436 对照 20.280.3860.44 0.438 16 16 表表 2.7.2 方法及转速比较试验结果方法及转速比较试验结果 一法-50rpm二法-50rpm二法-75rpm二法-75rpm方法及转速比 较30min30min30min30min 0.4380.4380.4380.441 0.4380.4430.4380.438 0.4390.4360.4390.438 0.4380.4410.4380.442 0.4410.4410.4360.438 A 0.4400.4380.4350.437 100.0100.0100.0100.7 100.0101.1100.0100.0 100.299.5100.2100.0 100.0100.7100.0100.9 100.7100.799.5100.0 溶出度% 100.5100.099.399.8 平均值%100.2100.399.8100.2 表 2.7 数据显示，一法、二法及相应的转速对瑞舒伐他汀钙的溶出试验无 明显影响。因此，本品的溶出试验选用一法（桨法） ，转速为 50rpm。 2.3.2 溶出介质比较溶出介质比较 内蒙古大学本科毕业实习报告 第 17 页 17 溶出曲线-pH6.6枸橼酸缓冲液 0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 120.0 010203040506070 时间min 溶出度% 溶出曲线-pH4.0缓冲液 0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 120.0 010203040506070 时间min 溶出度% 图 2.5.1 溶出曲线pH6.6 缓冲液 图 2.5.2 溶出曲线pH4.0 缓冲液 溶出曲线-0.1M HCl 0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 120.0 020406080 时间min 溶出度% 溶出曲线-水 0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 120.0 010203040506070 时间min 溶出度% 图 2.5.3 溶出曲线0.1M HCl 图 2.5.4 溶出曲线水 比较以上表 1、2、3、4 可知，瑞舒伐他汀钙片在四种介质中均能正常有效 的溶出。将上述结果分别与临床试验比较，确定溶出曲线与血药浓度试验的相 关性，从而选择最为合适的溶出介质。 18 18 第三章 结论 瑞舒伐他汀钙适用于经饮食控制和其它非药物治疗仍不能适当控制血脂异 常的原发性高胆固醇血症）或混合型血脂异常症。它具有强力的 HMG-CoA 还 原酶抑制活性，并具有肝细胞作用选择性，且其药动力学性质优异，半衰期长， 安全性好，是理想的他汀类药物。 通过以上试验可以得出，瑞舒伐他汀钙的溶出度检查试验条件为：以 50ml pH6.6 枸橼酸缓冲液为介质，利用二法（桨法） ，转速 50rpm。瑞舒伐他汀钙的 UV 检测条件为：以 242nm 为检测波长。并通过工作曲线、回收率试验可知， 紫外检测所产生的误差较小，检测结果具有良好的准确性。 瑞舒伐他汀钙在以上溶出度检查试验条件和 UV 检测条件下的试验结果符 合瑞舒伐他汀钙国家药监局药品注册标准中溶出度的规定范围。 内蒙古大学本科毕业实习报告 第 19 页 19 致 谢 本实验和论文是在胡瑞生教授的悉心指导下完成的。胡老师孜孜不倦的教 诲、严谨的治学态度、渊博的知识使我受益匪浅，胡老师不仅在学业上给了我 很多的指导，更是我生活中的向导，他待人友善、为人谦和、不求名利的高尚 情操永远是我们后辈学习的典范。在此谨向胡老师表达我由衷的谢意。 同时感谢北京天衡药物研究院给我这次实习的机会，王晓强老师和孔利平 老师在实习期给予我的帮助。在此期间，我学习到了许多专业知识和严谨的工 作态度。 对四年来教给我知识的老师们说一声谢谢，对我在完成本科论文时给予支 持的学长和同学致以敬意。 最后，感谢我的父母家人多年的养育、关心与支持，使我长大成人，得以 顺利完成学业。 20 20 参考文献 1 蔡正艳，宁奇 降血脂药物研究新进展期刊论文-世界临床药物 2004(1) 2 Davidision MH. Rosuvastatin: a highly efficacious statin for the treatment of dyslipidemia 2002 3 Jones PH. Davidision MH. Stein EA Comparison of the efficacy and safety of rosuvastatin versus atorvas