糖化血红蛋白a1c的测定与临床意义(单)

糖化血红蛋白 A1c 的测定与临床意义 糖化血红蛋白 A1c(glyocosylated HbA1,HbA1c)为已连接有巳糖的 HbA1c。HbA1c 可为糖 尿病（diabetes mellitus, DM）长期控制的良好指标，尤其对型 DM 和妊娠性 DM 的治疗有 监控作用。目前不主张单独用该指标来诊断 DM。 1 生化特性 成人红细胞内的血红蛋白主要是 HbA1c，糖化血红蛋白是血红蛋白在高血糖的作用下发 生缓慢连续的非酶促糖化反应的产物，其主要形式为 HbA1c，此外尚有 HbA1a1、HbA1a2 及 HbA1b 三种。HbA1c 的形成过程先由血红蛋白 链 N 末端缬氨酸的氨基与巳糖（主要为葡萄 糖）的醛基发生加成反应形成中间产物醛亚胺，称为前 HbA1c。此反应迅速且可逆，故又称 不稳定型 HbA1c；继而通过 Amadori 转位，分子重排形成酮胺，其速度缓慢但不可逆，称为 稳定型 HbA1c。 链 N 末端缬氨酸的糖基化并未影响与 2，3 二磷酸甘油酸的结合，但改变了 其复合的立体构象及正电荷的表面分布。正常生理条件下，非酶促糖化反应产物的生成量与 反应物的浓度呈正比。由于蛋白质浓度保持相对稳定，糖化水平主要决定于葡萄糖浓度，也 与蛋白质与葡萄糖接触的时间长短有关。由于葡萄糖可自由透过红细胞膜，血红蛋白的半衰 期为 60 天，故 HbA1c 的测定可反映测定前 6-10 周内的平均血糖水平。 2 标本 采用抗凝全血，用氟化钠（7-9mg/ml）、EDTA（1-2mg/ml）或肝素钠（0.1-0.2mg/ml） 抗凝,用时需要用溶解素溶解,抗凝全血于 4-8冰箱可保存 5 天。 3 测定方法 HbA1c 的测定方法主要有四类：色谱法、电泳法、免疫法和化学法。其中色谱法主要有 离子交换层析法、高效液相色谱法（HPLC）和亲和层析法等。免疫法主要包括放射免疫法 （radioimmunoassay,RIA）、酶免疫法（enzyme immunoassay,EIA）和胶乳免疫凝集法 （latex immunoassay aggluatination,LIAA）等。Halwachs-Baumann 等研究表明，贫血、 红细胞增多、类风湿因子和慢性血液透析等均对 HPLC、Hi-Auto 分析仪和免疫分析法测定 HbA1c 无明显干扰，但他们认为 HPLC 并非测定 HbA1c 的合适方法，而分析果糖胺则是更好的 检测糖尿病患者的方法。Doelman 等采用毛细管电泳法测定 HbA1c，不受不稳定 HbA1c 片段或 氨基甲酰化以及乙酰 Hb 变异体的影响。其它 Hb 变异体如 HbF、HbS 和 HbC 也不干扰本法。 Frantzen 等报道了一种利用硼酸亲和原理的过滤分析法，使用一种水溶性蓝色硼酸衍生物， 总 Hb 包括结合硼酸的 Hb 被沉淀，并被聚集在过滤层，Hb 和硼酸即被一种双波长反射比色分 2 析系统测定，结果可直接以糖化血红蛋白的百分率报告。这种方法简便、快速，其不精密性 在 3%-18%，HbA1c 范围内为 4%，线形范围可达 20%，与其它已确认的分析方法相比，具有良 好相关性。由于糖化血红蛋白的测定方法众多，还缺乏标准化参考方法，国际上正建立这类 参考方法。目前最常用的 HbA1c 测定方法是离子交换层析法和电泳法，前者精密度高、重复 性好且操作简单，已被临床广泛采用。国内主要采用 Bio-Rex70 阳离子树脂微柱层析法，其 微柱可重复使用多次。正常参考值：HbA1c：x2s=6.51.5%; 8.0%为 HbA1c 增高。 4 临床意义 4.1 HbA1c 在 DM 诊断上的应用 DM 是一组病因和发病机制尚未完全阐明的内分泌代谢 疾病，以高血糖为其主要标志。DM 患者 HbA1c 值空腹血糖呈正相关，但 HbA1c 用于 DM 的诊 断不如 OGTT（口服葡萄糖耐量试验）敏感。健康人 HbA1c 为 4.0%-7.7%(6.51.5%), 未控制 的 DM 病人 HbA1c 可高达 10%-20%; 新发生的 DM 病人,虽有血糖水平增高,但可不见 HbA1c 明 显增多。随机检测 HbA1c，若9%，预报 DM 的标准度约为 78%，灵 敏度为 68%，特异性 94%；HbA1c10%，则有 80%以上为 DM，灵敏度 43%，特异性 99%，有效率 86%。所以，目前并不主张单独用 HbA1c 来诊断 DM，原因是精确度不高，有时造成临床解释 困难。在型糖尿病患者中，糖化血红蛋白 A1c 并不是反映平均血糖水平的灵敏指标。 4.2 HbA1c 用于估计 DM 临床治疗效果和监测治疗适应性在临床上，HbA1c 可作为 DM 患 者血糖控制的一个指标。HbA1c 下降缓慢，由于 Hb 的半衰期长达 60 天，所以 HbA1c 不能反 映近期的血糖控制水平，不能提供治疗的近期效果，但 HbA1c 可作为 DM 长期控制的良好指标， 可反映测定前 1-2 个月的平均血糖水平。用 HbA1c 来监测 DM 病情控制程度，根据监测结果， 临床医师可以采用饮食控制或有效药物等方法来制订一个控制患者血糖值在正常范围的治疗 方案。尤其对 IDDM 和妊娠 DM 的治疗监控有用。 4.3 HbA1c 的测定可协助判断预后 DM 合并视网膜病的病人，其 HbA1c 为 8%-10%，表 示病变中等程度，可用激光进行治疗； 若大于 10%则为严重病损，预后差。对妊娠性 DM，判 断是否致畸、死胎和子痫前期则更有意义，故测定 HbA1c 是妊娠 DM 控制的重要参数。 4.4 其它方面 蛋白质的非酶促糖化作用可致 DM 病人一系列病理生理变化，成为 DM 各 种并发症的重要基础。HbA1c 可使红细胞粘度升高，流动性变小，变形能力明显降低。HbA1c 可造成氧合 Hb 的离解速度减慢，红细胞对氧亲和力增加，红细胞 2，3 二磷酸甘油酸（2，3- DPG）量显著下降，成为 DM 组织缺氧的重要因素。伴有 G-6-PD 缺乏的 DM 患者，由于其红细 胞平均寿命仅为正常人的 1/4，大大降低了 HbA1c 的形成，故伴有 G-6-PD 缺乏的 DM 患者中， 3 用 HbA1c 作为 DM 监控指标可能会造成偏差，宜用空腹血糖监控。急性脑血管病（AC