乳腺癌her2基因fish检测的意义

乳腺癌HER2基因 FISH检测的意义 乳腺癌在我国的发病情况1 HER2作为乳腺癌预后和预测的指标2 HER2状态的测定3 赫赛汀的应用4 内容 我国女性的乳腺癌发病率为20.1/10万 近数十年来，国内、外在治疗方法上虽 然经过了多方面的改进，但其病死率迄今 并未见明显降低，可手术患者总的10 年生 存率在40% 50% 左右，若手术时已经发 生淋巴转移，则降为25% 左右 早发现、早治疗，以及采取正确、有效的检测 、治疗方式是治疗乳腺癌的关键 HER2人表皮生长因子受体2 细胞膜 细胞质 细胞外配体结合区 (632 氨基酸) 跨膜区 (22氨基酸) 细胞内区 (580氨基酸) 具有酪氨酸激酶活性 HER2 受体跨膜二聚体的信号传导途 径 信号传导 至细胞核 细胞核 接合部 酪氨酸激酶 活性部分 细胞浆 细胞膜 生长因子 癌基因活化细胞分裂 HER2过度表达 1 = 基因拷贝数 2 = mRNA 转录 3 = 细胞表面受体蛋白表达 4 = 细胞外受体功能域释放 A = HER2 DNA B = HER2 mRNA C = HER2 receptor protein 正常扩增/过度表达 细胞核 细胞质 细胞膜 1 2 3 4 C B A HER2 状态: 预示肿瘤对治疗的反应 ! HER2阳性状态与乳腺肿瘤的预后差相关 ! HER2是肿瘤复发和总生存期长短的独立预后因子 ! HER2是有别于肿瘤大小、淋巴结及激素受体外的重要预后因子 HER2阳性状态的患者无病生存期亦 缩短 1.00 0.75 0.50 0.25 0 0 24 48 72 96 120 144 无扩增 扩增 基因扩增: 10 拷贝数 无基因扩增: 3拷贝数 临界值: 不包括 死亡时间 (月数) Log rank p0.001 100 80 60 40 20 0 无病生存概率 死亡时间 (月数) HER2 基因 3 拷贝数 HER2基因 3 拷贝数 对数秩检验 p=0.001 淋巴结阴性淋巴结阳性 HER2检测的准确性非常重要 检测方法包括：免疫组织化学（IHC）、荧光原位 杂交（FISH）、酶联免疫分析（EIA）、酶联免疫 吸附分析（ELISA）、聚合酶链反应（PCR）等。 在上面提到的检测方法中FISH是其中一种比较 可靠的检测方法。 vHER2状态测定方法的比较 方法IHC 冰冻/新鲜 组织 IHC 石蜡包埋 组织 FISHELISA (血清) 定量 PCR 测定异常目标蛋白过度表达蛋白过度表达基因扩增蛋白过度表达基因扩增 可在切片上完成是是是否否 受储存影响是是否否否 可在穿刺活检标本 中完成 困难是是否是 有商业化试剂盒尚无是是是否 FDA批准不能针对治疗可针对治疗可针对治疗及预后否是 荧光原位杂交 Fluorescence In Situ Hybridization 是一种分子细胞遗传学技术，通过 荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂 交。在荧光显微镜下，与细胞和（或）组织原位 观察并分析细胞核内杂交于DNA靶序列的多种猜 测探针信号，以获得细胞内多条染色体（或染色 体片段）或多种基因状态的信息。 运用FISH方法检测基因扩增 FISH显示乳腺癌HER2基因的扩增数（桔红色信号 为HER2基因，绿色信号为17号染色体的着色颗粒 ） 目前HER2测定中的推荐意见 FISH 重新检测 FISH 3+0/1+ 2+ IHC FISH 重新检测 - + - + 肿瘤标本 （石蜡包埋） 赫赛汀 治疗 赫赛汀 治疗 赫赛汀 治疗 + Fish信号计数指导表 IHC/FISH检测HER2基因 正常正常HER2基因低度表 达 HER2基因高度表 达 01+2+3+ 赫赛汀靶向HER2的人源化单抗 95% 人源化, 5% 鼠抗，具有高度亲和性 (Kd=0.1nM) 和 特异性，显著降低免疫原性(HAMA) 用于治疗HER2阳性乳腺癌 MBCMBC：生存率提高达生存率提高达45%45% EBCEBC：复发风险降低复发风险降低5050 赫赛汀作用机制 HER2 过度表达细胞 赫赛汀与 HER2受体结合 生长信号 被 阻断 抑制肿瘤 细胞生长 赫赛汀与过度表 达HER2受体的细 胞表面结合 诱导NK细胞和巨 噬细胞攻击肿瘤 细胞 NK细胞和巨噬细胞 释放各种活性因子 溶解肿瘤细胞 巨噬细胞 NK细胞 赫赛汀一线联合多西紫杉醇延缓疾病进 展时间 生存概率 赫赛汀