自身抗体的检测及其临床意义 ppt课件

自身抗体的检测 及其临床意义 自身抗体是诊断自身免疫性疾病的 重要依据 自身免疫泛指机体免疫系统受某些内因、外因或遗 传等因素作用产生针对自身正常或变性的组织、器 官、细胞、蛋白质或酶类等自身抗原发生的免疫应 答反应，出现自身抗体或自身致敏淋巴细胞的现象 。 因自身免疫招致组织器官损伤或功能障碍所致疾病 称自身免疫性疾病。自身免疫性疾病患者血循环中 针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体，称 自身抗体。自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志 。 自身免疫性疾病的共同特征 1.可以有诱因，也可以无诱因，但多数病因不清。无 诱因者多称为“自发”性或“特发”性。 2.患者以女性居多，并随年龄增加发病率有所增加。 3.有遗传趋向。 4.血清中有自身抗体或体内有针对自身组织细胞的致 敏淋巴细胞。自身抗体在不同的自身免疫病中有交 叉和重叠现象。即在不同的自身免疫病患者中查到 相同的自身抗体;在同一自身免疫病患者体内可查到 多种自身免疫抗体。 5.疾病的重叠现象,即一个病人可同时患一种以上自身 免疫病。 6.自身免疫病一般病程较长,病情发展和缓解呈反复交 替现象,易成为终生痼疾。免疫抑制剂治疗可取得一 定疗效。 自身免疫性疾病患者大多数体内均可查出 较高滴度的自身抗体，因此自身抗体的检 测可帮助临床诊断，评价疗效，估计预后 。自身免疫性疾病以血清中出现大量自身 抗体为特征，其中与某种疾病密切相关的 自身抗体称为该疾病的标志抗体，标志抗 体的检出有助于临床医生确诊疾病，具有 重要的价值。通过大量的研究及临床资料 统计，目前比较公认的部分标志抗体： 标志抗体相关疾病 抗Sm抗体系统性红斑狼疮（SLE） 抗dsDNA抗体系统性红斑狼疮（SLE） 高滴度抗RNP抗体混合性结缔组织病（MCTD） 抗SSB抗体干燥综合征（SS） 抗着丝点抗体进行性系统性硬化症局限型 抗Scl-70抗体进行性系统性硬化症弥漫型 抗Jo-1抗体多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM） 抗肾小球基底膜抗体（GBM）肺出血肾炎综合征（Goodpasture） 抗平滑肌抗体（ASMA）型自身免疫性肝病 抗肝肾微粒体抗体（LKM-1） 型自身免疫性肝病 抗可溶性肝抗原抗体（SLA） 型自身免疫性肝病 抗线粒体抗体2型（AMA-2）原发性胆汁性肝硬化（PBC） 抗角蛋白抗体（AKA）类风湿性关节炎（RA） 欧蒙印迹法试剂盒用于体外定性检测血清 或血浆中的人抗nRNP、Sm、SS-A（天然 SS-A和Ro-52）、SS-B、Scl-70、Jo-1、 CENP B、dsDNA、核小体、组蛋白和核糖 体P蛋白等14种不同抗原lgG类抗体。 免疫印迹技术（IBT） 免疫印迹技术属于膜载体酶免疫技术，其 固相载体为吸附有抗原的硝酸纤维膜。 基本原理是将从小牛或兔胸腔提取的抗原, 经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按分子量大小分 离成区带,经参照对应分子量标准物质确定每 一抗原区带的分子量。然后将各抗原区带转 印至硝酸纤维膜上制成抗原吸附载体膜。 将待测血清加在已切成细条的硝酸纤维膜上, 待测血清中存在的抗体分别与硝酸纤维膜上 的相应抗原区带结合,当再加入酶标记抗人 IgG抗体后形成抗原-抗体-酶标记抗体复合物, 再加入酶的底物,出现显色反应。凡有抗体与 膜上抗原结合的位置,均会因酶促反应而显色 。 参照此时抗原区带的分子量及各区带的相应 位置,可辨读出各特异性抗体. 抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标志抗该 抗体阳性为SLE的重要诊断标准之一。 抗dsDNA抗体在SLE的发病机制中起重要作 用，SLE并发的狼疮性肾炎是由该抗体介导 的免疫复合物病，抗dsDNA抗体可形成多 种冷沉淀而致血管炎，SLE肾炎及典型的蝶 形红斑均与该抗体有关。 抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达95% 100%，但其敏感性仅为30%50%，因此 抗dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。 抗RNP抗体 高滴度是混合性结缔组织病(MCTD,夏普综 合征)的特异性标志（阳性率为95-100%） ，抗体滴度与疾病活动性相关；低滴度可 见于SLE（15-40%，常伴Sm抗体阳性） 。 抗Sm抗体 SLE的标志性抗体（5-30%），与dsDNA 一起是SLE的诊断指标，与疾病活动性无 关，一般伴有U1-RNP抗体阳性。 抗核小体抗体 SLE标志性抗体（85%），可用于SLE的 早期诊断，与狼疮肾炎相关 抗SS-A抗体 与各类自身免疫性疾病相关，最常见于干 燥综合征（40-80%）。SLE（20-60%）； 新生儿红斑狼疮（100%），可引起先天性 新生儿心脏传导阻滞。与狼疮肾病的发生 相关。抗天然SS-A（60kDa）抗体对SS和 SLE的特异性高。该抗体的产生与HLA有关 。 抗Ro-52抗体 不具有疾病特异性，而且还可与抗Jo-1和 RNP抗体发生交叉反应。 抗SS-B抗体 干燥综合征（40-95%）；SLE（10-20%） ；亚急性皮肤狼疮（25-35%）。 抗Scl-70抗体 进行性系统性硬化症（25-75%），与皮肤 硬化、肺部受累及肿瘤有关；抗体滴度与 疾病活动性无关。 抗PM- Scl抗体 多肌炎/皮肌炎（8%），弥散性硬皮病（ 3%）；50% PM- Scl抗体阳性见于皮肌炎 与硬化症的重叠综合征。 抗Jo-1抗体 多肌炎特异性抗体（25-35%），伴肺间质 纤维化时可高达75%。高度提示抗合成酶 综合征。 抗PCNA 是增殖性细胞核抗原，是SLE的标志性抗体 （2-10%），与SLE弥散性肾小球肾炎相关 ，对激素治疗敏感。 抗组蛋白抗体 多种结缔组织病中均可出现，在药物诱导 的SLE中较常见（阳性率为95%）不具有疾 病特异性。仅有此抗体阳性，而不伴有其 他ANA，则强烈支持DIL的诊断。与SLE活 动性及狼疮肾病相关。 抗着丝点抗体 局限型弥散性硬皮病（30%）；CREST综 合征（50-80%）；原发性雷诺现象（25% ）；原发性胆汁性肝硬化（10-20%）。 抗M2抗体 原发性胆汁性肝硬化特异性抗体（96%） ；其它慢性肝病（30%）；进行性系统性 硬化症（7-25%）。 抗核糖体P蛋白 是SLE的特异性抗体（5-20%）。 系统性红斑狼疮(SLE) 靶抗原阳性率(%) dsDNA标志性抗体 30-90 Sm标志性抗体 5-30 核糖体P蛋白标志性抗体 5-15 核小体标志性抗体 50-95 PCNA标志性抗体 3 组蛋白 40-80 RNP 15-40 SS-A 20-60 SS-B 10-20 新生儿红斑狼疮（NEL） 靶抗原阳性率(%) SS-A 100 药物诱导的红斑狼疮（DIL） 靶抗原阳性率(%) 组蛋白 95 原发性干燥综合征（SS） 靶抗原阳性率(%) SS-A 40-95 SS-B 40-95 混合性结缔组织病（MCDT） 靶抗原阳性率