医学课件《医学免疫学》微生物学4厌氧菌

厌氧性细菌 （anaerobic bacteria） 学习要求：学习要求： 1 1、掌握破伤风杆菌的致病物质、致病条、掌握破伤风杆菌的致病物质、致病条 件与入侵途径，发病机理，防治原则。件与入侵途径，发病机理，防治原则。 2 2、掌握产气荚膜杆菌致病物质，所致疾、掌握产气荚膜杆菌致病物质，所致疾 病、临床特征，熟悉生物学性状。病、临床特征，熟悉生物学性状。 3 3、熟悉肉毒杆菌致病物质，所致疾病。、熟悉肉毒杆菌致病物质，所致疾病。 概述 n必须在无氧环境下，才能生长繁殖 n根据能否形成芽胞，可分为 u厌氧芽胞梭菌 F破伤风梭菌 F产气荚膜梭菌 F肉毒梭菌 u无芽胞厌氧菌正常肠道优势菌群 第一节第一节 厌氧芽孢梭菌厌氧芽孢梭菌 （ClostridiumClostridium） n一群专性厌氧、革兰阳性的粗大杆菌 n形成芽胞，细菌膨胀呈梭形 n产生外毒素 n广泛分布于自然界 u破伤风梭菌破伤风 u产气荚膜梭菌气性坏疽、食物中毒、坏 死性肠炎 u肉毒梭菌肉毒中毒 u艰难梭菌假膜性结肠炎 破伤风梭菌破伤风梭菌（Ctetani） n革兰阳性 n形成芽胞 n有鞭毛 n专性厌氧 n芽胞抵抗力很强 n疱肉培养基：肉渣 部分消化呈微黑色 破伤风（破伤风（tetanustetanus）的病原菌的病原菌 致病条件 n该菌无侵袭力，仅在局部繁殖，其致病 作用完全有赖于病菌所产生的外毒素 n条件具无氧环境的伤口 n致病物质破伤风痉挛毒素(外毒素) u属神经毒素(neurotoxin)，毒性极强(小 鼠LD50为0.015ng，对人致死量1g) u为蛋白质，不耐热；可被蛋白酶破坏 u经0.3%甲醛溶液作用四周后可脱毒成 类毒素 致病因子 n对氧敏感的破伤风溶血毒素(tetanolysin) n质粒编码的破伤风痉挛毒素(tetanospasmin) u属神经毒(neurotoxin)，毒性极强(对人致死量 1g) u蛋白质，不耐热 破伤风痉挛毒素 n 结构 u菌体：一条多肽 u释出菌体：轻链（A链）-S-S-重链（B链） uB链：神经节苷脂结合的单位 uA链：毒性作用 破伤风痉挛毒素对脑干神经和脊髓前角细破伤风痉挛毒素对脑干神经和脊髓前角细 胞有高度亲和力胞有高度亲和力 局部局部 感染感染 毒毒 素素 脊髓前角神经细胞脊髓前角神经细胞 与与神经节苷脂结合神经节苷脂结合封闭抑制性突触封闭抑制性突触 阻止抑制突阻止抑制突 触释放介质触释放介质 伸、屈肌同 时强烈收缩 全身肌全身肌 肉痉挛肉痉挛 血、淋巴血、淋巴 外周神经间隙外周神经间隙 阻断上下神经元间正常抑制性神经冲动传递阻断上下神经元间正常抑制性神经冲动传递 致病机制致病机制 破伤风痉挛毒素作用破伤风痉挛毒素作用 所致疾病 n潜伏期 u可从几天至几周，平均1-2周 n典型的症状 u苦笑面容 u角弓反张 u牙关紧闭 u其它：呼吸肌痉挛、窒息、死亡 - -破伤风破伤风 C. C. tetanitetani破伤风破伤风 This baby has neonatal tetanus. It is completely rigid. Tetanus kills most of the babies who get it. Infection usually happens when newly cut umbilical cord is exposed to dirt CDC 小鼠注射破伤风外毒素 本图片由微生物学教研室提供 本图片由微生物学教研室提供 正常小鼠 注射破伤风 外毒素小鼠 免疫性 n破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素发 挥中和作用（毒素与中枢神经组织结合非常 牢固，一旦结合即非抗毒素所能中和） n不能有效地刺激免疫系统引起免疫应答，病 后不会获得牢固免疫力 n有效地获得抗毒素的途径是： F主动免疫，注射类毒素 F被动免疫，通过注入大剂量抗毒素 微生物学检查法 n临床诊断主要结合创伤史和特有体征 n微生物学检查对早期诊断意义不大 n必要时可取伤口渗出物或坏死组织涂片染 色镜检及厌氧菌培养，并以培养物滤液做 动物试验，以确定有无毒素产生。 防治原则 n防止创口厌氧微环境的形成 n人工主动免疫白百破(DPT) u制剂：精制破伤风类毒素 u对象：婴幼儿、部队战士、建筑工人及其 他易受外伤的人群 u方法：基础免疫加强免疫 u对36个月儿童可采用白百破（DPT ）三联疫苗 防治原则防治原则 n人工被动免疫 u制剂：注射破伤风抗毒素 u用途： F紧急预防：T.A.T 1500-3000U皮下或 肌内注射；同时给予类毒素自动免疫 F特异治疗：早期足量使用抗毒素 (T.A.T 1-2万U ivdrip 可维持7-14天 ，一次大量5-10万U可引起III型超敏反 应-初次注射血清病) u注意事项：注射前应做皮肤过敏试验。 n抗生素的使用：青霉素、甲硝唑等 产气荚膜梭菌 (Cperfringens ) 生物学性状 形态与染色 n两端平切粗大杆菌 n芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体 n无鞭毛 n体内有明显的荚膜 培养特性 n生长迅速，代谢活跃，45生长最好 n血琼脂平板：双层溶血环 内环完全溶血-毒素 外环不完全溶血- 毒素 n蛋黄琼脂平板：Nagler反应 n牛奶培养基：“汹涌发酵” （stormy fermentation） 分型 n分为5个毒素型 n对人致病的：A型 致病性 致病物质 n外毒素 产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型 致病物质 n毒素 u以A型产生量最大 u引起血管通透性增加伴大量溶血、组织坏死 、肝脏、心功能受损 u在气性坏疽的形成中起主要作用 n、毒素 u引起坏死损伤和血管通透性增加 n肠毒素 所致疾病 n气性坏疽 u主要由A型产气荚膜梭菌引起 u致病条件与破伤风梭菌相同 u潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高 ，以组织坏死，气肿和全身中毒为特征 组织坏死、血管内皮损伤，通透性上升 出血、水肿、局部坏死 分解糖产气，压迫软组织、血管 加重组织坏死（捻发音） 分解组织，病变迅速扩散，引起全身中毒症状 n食物中毒 u食入被大量细菌污染的食物（多为肉类） u临床表现：腹痛、腹胀、水样腹泻；可自愈 微生物学检查法 n直接涂片镜检 u深部创口取材涂片 F革兰阳性大杆菌 F白细胞少且不典型 F伴有其它杂菌 u早期诊断能避免病人最终截肢或死亡 n分离培养及动物实验 u接种血平板或庖肉培养基，镜检及生化 反应鉴定 u动物实验 u如怀疑食物中毒，在发病后一日内，检 出大于105病菌/克食品或106病菌/克粪便 可确立诊断 防治原则 n预防 u及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境 u预防性的使用抗生素 n治疗 u局部感染的处理 u抗生素 u抗毒素 u高压氧舱法 肉毒梭菌 （Cbotulinum） 生物学特性 n芽胞呈椭圆形，粗 于菌体，位于次极 端，使细胞呈汤匙 状或网球拍状 n根据神经毒素的抗 原性分AG 7个型， 各型毒素只能被同 型抗毒素中和 n肉毒毒素不耐热， 煮沸1分钟即可被破 坏 致病性 n致病物质 u肉毒毒素 F剧毒（对人致死量为0.1g) u功能和致病机制与破伤风外毒素相似 作用机制 n作用于外周神经肌肉接头处，抑制外周 神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性 麻痹 n前体分子存在，可稳定存在于外环境和 胃肠道。复合物进入小肠后，在碱性情 况下解离，被吸收进入血循环 所致疾病 n食物中毒 u进食污染食物（多为罐头、肉制品、豆制品 ）发生食物中毒-食入毒素 u临床表现：少见胃肠道症状，主要为神经末 梢麻痹（松驰型） F乏力、头痛眼肌麻痹：复视、斜视、眼睑下垂 咽部肌肉麻痹：吞咽、咀嚼困难、口齿不清 膈肌麻痹，呼吸困难窒息死亡 F神志清楚 F病死率高 所致疾病 n婴儿肉毒病 u细菌进入肠道，繁殖，产生毒素而致病 u以6个月以内的小婴儿居多 u症状与肉毒食物中毒类似，便闭、吸乳、 啼哭无力 u病死率不高 微生物学检查法 n标本 u食物中毒患者：食物 u婴儿肉毒病患者：粪便 u粪便、食物等标本可先80C加热10分钟，再 厌氧培养 u毒素检查 防治原则 n加强食品卫生管理和监督，提高防范意识 （低温保存食物，高温破坏毒素） n尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E 三型多价抗毒素，同时加强护理和对症治 疗 艰难梭菌 （ Cdifficile） 概述 n新生儿肠道中正常菌群 n因长期使用抗生素引起 致病性 n产生A、B两种毒素，即肠毒素和细胞毒素 n因长期使用抗生素导致菌群失调后可引起 内源性感染或院内交叉感染 n临床表现：假膜性肠炎 第二节 无芽胞厌氧菌 概述 n属人体内的正常菌群，包括革兰阳性和革 兰阴性的球菌和杆菌 n在某些特定状态下，这些厌氧菌作为条件 致病菌可导致内源性感染 一、主要种类、性状和在感染中的作用 与人类疾病相关的主要无芽胞厌氧菌 常见的致病菌 nG-杆菌：脆弱类杆菌(Bfragilis) u临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株 nG-球菌：韦荣菌属 u咽喉部主要厌氧菌 常见的致病菌 nG+球菌：消化链球菌属 u仅次于脆弱类杆菌 u主要寄居于阴道 nG+杆菌： u丙酸杆菌属：痤疮丙酸杆菌 u双歧杆菌属 u真杆菌属 二、 致病性 致病条件 n属正常菌群，在成为条件致病菌后，可引 起内源性感染 n感染条件 u寄居部位改变 u宿主免疫力下降 u菌群失调 u厌氧微环境 感染特征 n内源性感染，可及全身，多呈慢性 n无特定病型，大多为化脓性感染 n分泌物或脓液粘稠，乳白色、粉红色、血 色或棕黑色，有恶臭，有时有气体 n使用氨基糖苷类抗生素长期无效 n分泌物直接涂片可见细菌，但普通培养法 无细菌生长 临床上遇到以下情况，应考虑有无厌氧菌感染 所致疾病 n败血症 n中枢神经系统感染 n呼吸道感染 n口腔牙齿感染 n腹部会阴部感染 n女性生殖道感染 三、 微生物学检查法 n标本采取 n直接涂片