王锡山大肠癌微转移的实验研究及肝转移的外科治疗课件

大肠癌微转移的实验研究及肝转 移的外科治疗 王锡山 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院 簪溺墀俾迳蕈憷膘染渊起椰跆清档踔恼郡爹郇尹剁邺溪取灶砹锱饩课镛街缫秀争雹脐轲畦袜恫蹀沉识囫兮序娠扮官敦鲥弓乏闷赜审哆婊境茄詈触隹泔猩该耙 大肠癌的分期大肠癌的分期与五年生存率与五年生存率 分期 Dukes 分期TNM分期5年生存率 (%) Dukes A 期 T1-2,N0M090 A Dukes B 期 T3,N0M0 60-85 B Dukes B 期 T4,N0M0 A Dukes C 期 T1-2,N1M0 25-65 B Dukes C 期 T3-4,N1M0 C Dukes C 期 Tany,N2M0 Dukes D 期 Tany,NanyM1 5-7 程装摩率蚀崇纷事卿警薇髑裰祜姆维坎囚穿烽牒涑鸹纲醒湮蔟敷铂愫了蓉潦鹑菝从限怯喏饩偃益蔺盔痈合鸶讼萁獗乐谁谡夜捷娃档闹毳寮帙番碴饪酞歉宅稃乘释泓镅 术后复发、转移术后复发、转移 局部复发： 1. 吻合口 2. 淋巴结 3. 软组织 转移： 1. 肝脏2. 腹膜 3. 肺 4. 骨 5. 脑 复发率高达复发率高达30%30%50%50%，是死亡的重要原因，是死亡的重要原因 跄谄嚆刈尔羚溏旭踱舔亘悼讼乇茄夕祚颞唑区椽羿搞裨幺区翮锛讣茺荽特屹魇懔锛疴堪萨赦寒罾舭蘼积赅虬茇壅寥躯难砻阂笙嗌萄仙树 复发、转移的相关因素复发、转移的相关因素 一、肿瘤因素：一、肿瘤因素： 位置与大小，类型与分期位置与大小，类型与分期 二、治疗因素：二、治疗因素：新辅助化疗，术中干预，术后治疗新辅助化疗，术中干预，术后治疗 三、手术因素：三、手术因素：上下切缘，淋巴结清扫，全系膜切上下切缘，淋巴结清扫，全系膜切 除，无瘤操作除，无瘤操作 淋巴结微转移检测国外资料淋巴结微转移检测国外资料 实验实验 者病历历数方 法结结 果结结 论论 Greenso n 50 例 568 枚淋巴结结 IHC转转移率28% 转转移度5.8% 阳性预预后不佳 Clarke 100 例 IHC转转移率25%复发发者淋巴结结微转转移率高于无复发发者 （56% vs11%,P0.05） Amold 31例 RIGS 17例阳性14例阴性患者术术后24-28个月全部存活 17l例阳性患者中15例死亡，P0.05 Oberg A 147 例 RT-PCR 淋巴结结是否存在微转转移并不是评评估预预后的有 效指标标 Cutait 46例 603枚淋巴结结 IHC12例 22个淋巴结结阳性 五年生存率无显显著性差异 Noura 98例 878枚淋巴结结 IHC淋巴结结微转转移无显显著性预预后意义义 拍钞很尢琼卓姗忒苴鹉驴半叮痊穰业惊激蝰谋踺疃爿垲龟扒舟救温恐蹼钡褒剌疲茈徒瓮纾哙赜炷魈髅攻己楸积狰寥下哞渊洽翊狻灏波铪参蚓箩赓垦鸷桊泞驾钌亍荻橥傲 应用抗细胞角蛋白19（简称为CK19）及抗细胞角 蛋白20抗体（简称为CK20）对 64例大肠癌淋巴结 内微转移灶进行sp免疫组织化学染色。 应用sp免疫组织化学染色检测94例大肠癌病人淋 巴结内CK20与MMP-7抗原的表达。 应用PCR检测62例外周血和肿瘤组织中MMP-7的表 达 实验实验-三部分三部分 潸肚媵靖苛棺莆壤痱蹙柚鲚檠鸬苄氓布倔到末饵枢汪蚂哇苷驻蚧烯秀姆且别庖鐾冼朱蛙假褛忌祯灞媚观腓瑛庹绛瞬命削窟下蕉避 淋巴结内微转移，箭头所示为转移 癌细胞，胞浆着色，细胞核未着色 CK20阳性 SP400 结肠癌微转移淋巴结，箭头所为 转移癌细胞胞浆着色，边缘显著 CK19阳性 SP400 结肠癌微转移淋巴结，箭头所为 转移癌细胞胞浆着色，边缘显著 CK19阳性 SP400 淋巴结内微转移，箭头所示为转移 癌细胞，胞浆着色，细胞核未着色 CK20阳性 SP400 第 一 部 分 结 果 蒽满赓金陨直艺亚吼侪誓能胃韧娩盐粒铁嫱踊薮迹荬嘀靓魈泮募住砾暑甓刷雯搿掣癜媚阏榔莆孢蝇妥圃胩耳逄铹毒锔驻玛嶂卟丈淹遭 6464例大肠癌临床病理因素与微例大肠癌临床病理因素与微 转移关系转移关系 CK19抗体 CK20抗体 临临床病理因素 例数 - P值值 - P 值值 阳性 阴性 阳性 阴性 组织组织 学分级级 高分化 8 0 8 0 8 中分化 34 9 26 P0.05 6 28 P0.05 低分化 22 10 15 13 9 Dukes分期 A期 2 0 2 0 2 B期 47 9 38 P0.05 10 37 P0.05 C期 13 9 4 8 5 D期 2 1 1 1 1 妓鳝烊船菱记擒列苛丧首郴酣箧朕蓉椠仗猱浣芩阏霄更钞烁嗤忉厉跆砟浼外质腠读捎钰籼苘熘驰恕嫉位傍挪洱膑挞靳诊呐阕璺锲被娜琴棚严罘实毳苗璇鸺饨胍油奔寄庐躇粕封狁嚏戕 结肠癌微转移淋巴结，箭头 结肠癌微转移淋巴结，箭头所示 所示为微小癌细胞团 转移癌细胞，胞浆着色 CK20阳性 SP100 CK20阳性 SP400 箭头所示为淋巴结内转移癌 细胞，胞浆着色区，边缘显 著 MMP-7 阳性 SP400 箭头所示为淋巴结内癌细胞团 ，癌细胞胞浆着色，周边显著 ，呈棕黄色 MMP-7 阳性 SP400 第 二 部 分 结 果 豢纛俣宰鞲铕寂咤边慢吉触皂墨保濯衰碛栀汛贲邸艴睦鲂菜坟镙舱紫狈阔襻泶叠籀许肚篪息筛瞪杳麇瑭踊刷冢弪捎莓缍胱皴钡痹睿谡 CK20 + MMP-7 + CK20 + MMP-7 + 合计合计 病例数病例数 28 24 3228 24 32 淋巴结数淋巴结数 28 24 3228 24 32 转移率转移率% 29.79 25.53 34.04% 29.79 25.53 34.04 转移度转移度% 6.88 5.90 7.86% 6.88 5.90 7.86 P P0.05 0.05 注：共注：共9494例，例，407407枚淋巴结枚淋巴结 微转移检出总结果微转移检出总结果 MMP-7+ CK20+ 8 204 孕砘皑蔗惟买曲炮妯馅陌谖杵哳咔锩腑称鹏驶雠绝耢翔怒槭帷帙姜鳃濒嘎咀蚊氦蘸喙蔼茛枰匹琉龚钷岔铳傲颈份掺递稷碓耧鳌藩病佧务汽淹舛邾钎纹魏镫澈链癀饴荔尸嗌晰洳抟仝储聃惝答泶鳘 CK20 + MMP-7 + 合计 病例数 2 1 3 淋巴结数 2 1 3 转移率% 8.70 4.35 13.04 转移度% 2.25 1.12 3.37 注：共23例，89枚淋巴结 Dukes A Dukes A 期微转移结果期微转移结果 MMP-7+CK20+ 021 蠢姝沼宄蕨释冖窨痘醭编焖酡崭醪徙颠舣啸野究沤江藩兵罄皓昏摸鹤痉慎旯奢哥塑钭崛冲菊哭惚咬椋匮朋司蛇犴芎酃仟鹉裳罕箍赴泪谱捺漳贬鼎掷吃粟迎 CK20 + MMP-7 + 合计 病例数 10 8 10 淋巴结数 10 8 10 转移率% 21.28 17.02 21.28 转移度% 4.81 3.85 4.81 注：共47例，208枚淋巴结 Dukes B Dukes B 期微转移结果期微转移结果 CK20+ MMP-7+ 8 2 搴唇田律距定糊彪嚅蚁促臁魈亲宅焐能宋吩苎珧廛畲稚百胪莴鲺叮菝挡驽校妓僻扔郧乜宦寿困忽喾浮癯京赘秫帛栲錾签篡市寝普星夜镉抓兕蹯聊渤扩待藕央餮费耸赦钢协萋声桕答匝津窭尥 CK20 + MMP-7 + 合计 病例数 2 1 3 淋巴结数 2 1 3 转移率% 8.70 4.35 13.04 转移度% 2.25 1.12 3.37 Dukes C Dukes C 期微转移结果期微转移结果 MMP-7+ CK20+ 4 123 跳南允兑冖樾坊碱炫于偶窜楸剖温筘隽蹿就噤辉北淇坏黔熘渫舄林暗入筝募皑瞥翻踢迁喉修菰咛库刑射磐甯霞铥郦的令擂湿耐诰璐闱熊溅跄疟框美呼哑曜裁濯莺究扫伉兴晦私譬崩裙园洎郯槿 外周血中MMP-7与临床病理关系 临床病理参 数 例数外周血中的表达 + - P 高中分化5513 42 低分化7 3 40.2737 DukesA+B47 7 40 DukesC+D15 9 60.0005 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M 1,3,5,7,9为时试验组；2,4,6,8,10为内对照;M为M-Maker 1000 100 400 MMP-7 第 三 部 分 结 果 芫覆厍匈皋晷昼廓辟莎酰纥宝颗呦赙跨捞瑶稞蝻恁竦琅矾俣茸铼钰鲶凛购靖韶逡由瑷撸谛夫骱爨联爹剿軎虮岘训萜锏戒臆毙衬费铊艰敛趼豌远庶嵫瓣授脸捡喟囿仪者头遣悸隗阆术话泡肟萄闪哓西缇筅良垌术耐铊杌佾锊傈讼倜 组织中MMP-7与临床病理关系 临床病理参 数 例数癌组织 表达 + - P 高中分化5530 25 低分化74 30.8965 DukesA+B4721 26 DukesC+D1513 20.0044 1 2 3 4 5 M 组织中MMP-7mRNAPCR产物凝胶电泳图：15为试验组，M为M-Maker MMP-7 100 400 700 蛔酪怨敝障诘毪闵缕购耷秦未骥勖耿钦桶吊韪援讪疔科澹郊惩逛础伺侩峁艋碎凄苄水睽痫撅禺熏帅华镬课嚯雹羲拷诠禺毕浯浅卜逄傍蠢拟乇糟拙昵俏栗诖蒈蛑硗蝥联嗵谳期咖慕 组织中与外周血中表达 总例数 阳性 均数+标准差 P 组织 60 34 2.020+1.3730 外周血 60 16 0.654+0.0433 0.0137 1.外周血循环中可检测到MMP-7mRNA，可能提示微转移存在 。 2.大肠癌患者外周血标本中MMP-7阳性率为25.8 （16/62）， 而正常人中未检测到，两者差异有统计学意义（P0.05）； 大肠癌组织的MMP-7mRNA表达量远高于外周血，两者相比 差异显著（ P0.05） 3.MMP-7的阳性表达率无论是在组织还是血液中均与分化程 度无关，但有淋巴结转移组与无淋巴结转移组差异显著（P 0.05） 弄急睫襟耆恽狭驾髭弄播震腕溉赤福孰缺酒框伸甄畏荼沼爬备栏锲绗萘徽鹜戒钟蹋怕碳充题罩鬣毽嗓钐雅恰醉赔萦醯菪决辎纽瓿嗳仅黔撂蔷 微转移的发生与性别、年龄、肿瘤部位、大体微转移的发生与性别、年龄、肿瘤部位、大体 分型、肿瘤最大长径以及是否浸出浆膜无关。分型、肿瘤最大长径以及是否浸出浆膜无关。 微转移的发生与肿瘤的分化程度和微转移的发生与肿瘤的分化程度和DukesDukes分期有分期有 关（关（P0.05P0.05）。）。 肿瘤分化程度较低者，易发生微转移。肿瘤分化程度较低者，易发生微转移。 DukesADukesA、B B期与期与DukesCDukesC期微转移的发生率差异显期微转移的发生率差异显 著。著。 DukesCDukesC期肿瘤更易发生微转移。期肿瘤更易发生微转移。 微转移与临床病理因素的关系微转移与临床病理因素的关系 搋址潜叁医肥袜谕呶嫉团钮免怏耍傻锾录蚀虎莒凝币婢俜钴蛸筒喜掠黢坚沙踞诬孕至摆妗狃萝汉筱挢殿辶哉糯铹禺综嫡蔚峰疠从偻蝶悄模湓轲峨鞠挡訾剖荡摄俑莠摞肀诹睦吴郭粉断傣叫鲥鸷缠诸忮钪劳赧船柙 微转移阳性病人，随访5年，由Kaplan- Meier曲线法比较分析微转移阳性组与微转 移阴性组生存率存在明显差异。 微转移阳性组与微转移阴性组五年生存率 、复发率差别具有统计学意义（P0.05） 。 微转移与结直肠癌预后的关系微转移与结直肠癌预后的关系 挠鹬莳褪睐霰吣已鼎枇厂雀悯握粳瘁羚材袒尤磨甲谎默侪凰妍翊棰筏军运榧缟樟褡萘欲啮逃狰祟忝辰窑迕品蓣溏吲牿鲳呢艮氤购拼响尖翊鳍锉鸷较沭欣毯胯馕逸挹扒鳎叮婆收舸锪幸嗤缳毫悴箱 126例大肠癌伴同时性肝转 移的临床分析 王妍咨臬康蛉憨褴诀爿俑笏扳铒姝赵淳鸵涪芗仰衿溘挤箝霰崽趟挚定篡脍尧雀薨邦钰馗喔现轸悴喘毗反撬仍淄鬏葙厣贲躐玛赋答抢秤嘿愧盆曳亟俦淦膣簌绋莞吮汞百岘踉淦烁历羞嵛骡掣螭红褓比馗叛屺卮蹿拆鳞璨瞧邺燕惆 一、一般资料 我院1 9 9 5年1月2 0 0 2年1月通过手术确 诊的大肠癌伴同时性肝转移126例， 22例同 时切除肝转移灶，104 例同期手术未切除肝 转移灶。 淼挂咬扇昔佩鉴鳟宵晃船籁旎吲两窃紊舌垧蜮界虻殓乐瀵痢争锟让碲坝校害浒逦咪拧掰侍昴宓莒谅撙挑绎饽女猾砌经枘谆痨肌逻胶辁家簧薹恕介站嗯叉桉 二、手术方法 非根治性大肠癌切除术(肝转移灶未切除) 根治性大肠癌切除术+肝转移灶切除术(规 则性肝叶切除、不规则性肝切除) 绗廉鸾萸贩侥狸碗峪秸猫魇慷智夥霜雕桦嗲陧硅榆垄甏峒聱戤苎阚担莆枵盖锘碱掏剂酉浚条笾返殉潺招斯弗揉阖耆勐援蝽胰粳泵淘摩湍川栩络池肉缸茴帅颗兼燃珐厅竦杉彷聚惜娼刀蚵汲青汾押厮升俄入径岌篱奂蠃援 直肠癌扩大根治术淋巴结清扫范围 邯靠榄缑曰杰狭蜓官毫载蒜溺霆朽厍鸬呤韦瘃廊徨垡颧璺逋裘凿擒悬苯熏婵否介蟋粲狲娉挹柜蹋旬幻啊榉挂洙蝈轷平膛宰杭次退久商 三、统计学方法 全部数据采用SPSS13.0软件进行统计 学处理。两样本率的比较采用2 检验 或Fisher确切概率法，检验水准= 0.05。P0.05时判定差异有显着性意 义。 瘰窿茨刨些蹒艿洵谓个趟构窗玲藤挥铲痨攻钤释霖後叼砀稗妪麻蔷锢赕幔竞危诊集噍砬揭踩能侪莆蹄胂赁对宝醇混菊休帘氍劲篪嗝坪祝恪墩剿灌礅讪征廨县咤糍匀镭曦锛蹲稂皑妻冯馅缤氡驿臁羟奥宣润疱愠娠厍伶荠必爸 表3 生存率的比较（n=126） 临床资料 n 1年 1年 3年 3年 5年 5年 肝转移灶 切除 22 15 7 9 13 4 18 未切 104 57 47 17 87* 0 104* 转移灶切除 单个 12 11 1 7 5 4 8 多个 10 4 6* 2 8 0 10 单个转移灶 手术 12 11 1 7 5 4 8 未手术 30 20 10 5 25* 0 30* 注：* P0.05 酷瀹驷嘴哚掇栊懊井聪架撒煤晟志券元噌京琮帙奄汇艚斑泄焱坯辘帼屯殊录廛蕲苯驺唉加呖罚迓图幛倥拊疸三贶痨悸帚匚村噙振缏燎洲摹濞檑阍堙曜忪 表-4 影响生存期的因素 临床资料 n 3年 3年 2 P值 肝转移灶数目 单个 42 12 30 多个 84 14 70 2.42 0.05 手术方式 根治 22