医药家族性青少年高尿酸肾病致病基因研究魏昕课件

家族性青少年高尿酸肾病致病基 因研究 魏昕 南昌大学第一附属医院 研究背景 家族性青少年高尿酸肾病又称为家族幼发性高尿酸肾病（ familial juvenile hyperuricaemic nephropathy,FJHN）， 是一种罕见的常染色体显性遗传性疾病，其临床特点为青 年发病，高尿酸血症，肾小管尿酸排泄障碍及进行性发展 的间质性肾炎 以往的研究发现染色体16p12上的UMOD基因与该病的发 生密切相关，但其具体突变位点在不同的人种中存在较大 异质性 研究背景 已报道了UMOD基因上的42个突变位点与家族幼发性高尿酸肾 病相关，但这些突变位点主要集中在3号和4号外显子区域，该区 段编码3个表皮生长因子样区域和1个光氨酸富足区域 研究背景 UMOD基因包含2315个碱基，11个外显子，编码的蛋白 质为uromodulin 蛋白（又称Tamm-Horsfall蛋白） uromodulin在正常人的尿液中含量丰富，该蛋白虽已被发 现有一个多世纪了（1895），但其生物学功能尚不明确 研究目的 本研究的目的在于通过对一例较完整的中国南部的家族幼 发性高尿酸肾病家系进行遗传学分析，定位中国家族幼发 性高尿酸肾病的致病位点并探讨其致病机制 诊断标准 FJHN家系诊断标准： 家族患病成员表现为常染色体显性遗传方式的慢性肾脏病 痛风或高尿酸血症发生在肾功能损害之前 家族中有两例或以上成员为经肾活检证实的慢性间质性肾炎 患病成员诊断标准： 出现肾损害（血肌酐水平1.4mg/dl） 尿酸排泄分数（FEUA%）：男性5.5%; 女性7.8% FEUA%计算公式：（血肌酐尿尿酸）/（尿肌酐血尿酸）100% 研究方法 FJHN家系的采集 患病成员健康成员普通人群对照 DNA 尿液肾组织 外显子测序，定 位突变位点 免疫荧光测定肾组织 中uromodulin表达 ELISA测定尿液中 uromodulin浓度 研究结果 FJHN家系图谱：4代，13例患者(10男，3女)，36例健康成员 研究结果 ID年龄性别高血压血肌酐 (mg/dl) 血尿酸 (mg/dl) eGFR* (ml/min/1.7 3m2) 尿酸排 泄分数 (%) 双肾B超肾活检痛风死亡年 龄 :1-maleyesNANAESRDNANANAnot clear not clear :1-maleyesNANAESRDNANANAno48 :3-maleyesNANAESRDNANANAyes50 :5-femalyesNANAESRDNANANAno48 :1-maleyesNANAESRDNANANAyes46 :5-maleyesNANAESRDNANANAyes51 :1332maleyes1.4313.3257.622.86normal size of kidney, multiple renal calculus in both kidney NAyes- :1532maleyes1.5813.4251.851.15normal size of kidney, multiple renal calculus in both kidney NAyes- :1945maleyes3.349.7220.514.58small kidney with decreased renal parenchyma Chronic interstitial nephritis yes- :2139femaleyes1.529.4741.137.04small kidney with decreased renal parenchyma Chronic interstitial nephritis no- :121maleyes1.258.4070.764.54NANAno- :416maleno0.947.99109.073.04NANAno- :1112femaleno0.618.90119.473.12NANAno- 13例患病成员临床资料 研究结果 患病成员(A)UMOD基因在1815号碱基的位置上发生了突变（c.1815 A G， 见图二），该突变导致UMOD编码蛋白uromodulin的第605号氨基酸由苏氨 酸变成甘氨酸,该突变在对照组（B,家族中的健康成员和100例无血缘关系的 健康对照）中未出现。 A. B. 研究结果 比较7例健存的患病成 员和15例未发病成员， 15例无血缘关系的健康 对照尿液中uromodulin浓 度： 患病成员，未患病成员和 健康对照尿uromodulin/ 尿肌酐分别为0.62mg/g ，3.40 mg/g和3.10 mg/g ，P0.05 研究结果 比较健康对照（A）,非家族性痛风肾患者（B），FJHN患者肾组织 中uromodulin的表达：FJHN患者肾小管上皮细胞内uromodulin成团 块状聚集且表达明显高于其他两组。 讨 论 以往研究报道的突变位点主要集中在3号和4号外显子，这 两个外显子所编码的区域（EGF-like，D&C）与蛋白的折 叠和转运相关，这些位点的突变使uromodulin蛋白在内质 网聚集或在胞浆内的转运能力下降，最终导致蛋白的分泌 减少。 本研究所发现的新突变位点位于UMOD基因的9号外显子 （ c.1815 A G，p.605 T G），该区域编码uromodulin 蛋白的糖基磷脂酰肌醇锚定区（GPI -anchor），主要功 能为将蛋白锚定在包膜上，然后通过酶解作用释放到胞浆 或细胞外。 因此，该位