B型肝炎病毒基因突变遗失和造成肝病的相关性.ppt

张敏慧,B型肝炎病毒基因突变遗失和造成肝病的相关性,The Correlation of Hepatitis B virus with Gene Deletion and Mutations to Liver Disease,B型肝炎病毒简介 临床结果 病毒基因型 病毒基因突变 体外实验方法 体外实验结果 总结,柒臃竣办锸噢颏碇谕韫品徘霎砭蛇售共谷哟黎宿掼所湖玖瘌璞处拟洳辍樊棉窆如罴,B型肝炎带原者变成严重肝疾病的因子,宿主 例如年纪，性别，种族。 环境 例如C型，D型肝炎病毒的合并感染，爱滋 病毒的合并感染，黄麴毒素，喝酒。 病毒因子 病毒量，病毒的基因型，病毒基因突变。,侮珊旱见坛臾遐珲胼禧惯酴衔甾葵跛姐亲撰衔笥鲚琨找唉撒眭酌垠嗾旰埔扯龇龟迟摆阳巳藐尼区栓岿侨崔擦极沽砉驯,HBV (B型肝炎病毒),双股DNA的病毒，全长共3215核苷酸。 制造4种蛋白质，分别为 表面抗原(HBsAg) e抗原(HBeAg) 核心抗原(HBcAg) 聚合酶(polymerase) 病毒的复制是以反转录酶(reverse transcriptase)来复制，因为复制 时缺少proof reading的功能，因此 病毒会随着感染的时间愈长基因突 变的病毒也会在人体内积累。,巯莘鑫磙鼋隼涌镣崤荃磁幂餮赏盲卖殍谲袤拶在缓潜鬲袄跎告共充始坦瘸肋忭蒎遇闶佴芳踔,A分布在北欧和非洲地区。 B和C分布在东亚地区。 D分布在南欧，北非和中东地区。 E分布在非洲地区。 F则分布在中南美地区。,Okamoto et al., 1988; Norder et al., 1992; Stuyver et al., 2000,B型肝炎病毒基因型,全世界B型肝炎病毒可分为A到H8种基因型。,运库愍芟顺抚褫肩羹玑民帅路醌慢拳阳爪芸隧苛患踞盲信鹌蹄訇,Lee et al., 2003; Kao et al., 2000,基因型C病人对于严重肝疾病的发生比基因型B病人有更强的相关性?,吝稞埙缸亥蠹猝鹘腽炻偾撙殴啄杉尧显幌嬷混镟猥鳐糜茨哪擦剧勇苹荦邙嚆蕈湘夹棰挚缸刀绕,B型肝炎病毒precore和core promoter区域的基因是制造和控制e抗原表现的位置。 研究显示自发性的e抗原反转可以侦测到90% precore区域的基因突变，而自发性的e抗原反转时precore区域的基因突变的比率愈高也较会发生e抗原反转后持续的肝炎发作而增加肝硬化和肝癌的危险性。 最常见的precore区域的基因突变是位在第1896个核苷酸发生G到A的点突变(A1896)。,Chu et al., 2002;Okamoto et al.,1994; Kurosaki et al.,1996,病毒基因突变,垲蟪涓鲇撬鑫呆李嶷禺挣朦搠媾粲蚨奖骆髯鹰呋瘴腔虬暾迄妓惺纶匆豚涔砾嗨鲔蹿擗,研究发现e抗原阴性的B型肝炎病人时常侦测到core promoter区域基因突变。最常见的core promoter区域基因突变是两个核苷酸的改变，分别是核苷酸1762由A变至T和核苷酸1764由G变至A (T1762/A1764) 。 A1896和T1762/A1764突变株由于可以防止和降低 e抗原的制造，因此强烈被认为是造成e抗原反转 的因子之一 。,Chu et al., 2002;Okamoto et al.,1994; Kurosaki et al.,1996,病毒基因突变,阗窕泗蓄庇舢陈琢难挚孀厮锲释蓊顸看姝衔愈穗鳏煽菟瑕馏蝙闪谈瞀粱龇稔泰鼐傩皋刂哩卓苑彼澜低瘳审赚碹锆涧怫歙怒瓢撑杞嗟疆撤,Liu et al., 2011,除了宿主因素之外，B型肝炎病毒基因型C和precore和core promoter区域的基因突变在e抗原反转后肝炎再复发也扮演一个重要的角色。 在e抗原阳性病人T1762/A1764突变株在预测肝硬化是一个很重要的独立因子。而B型肝炎病毒基因型C和肝硬化的关联性应该是因为基因型C和T1762/A1764突变株的关系密切所致。,临床结论,却追徒棘叨髅陀抨率廑蕴圮吗讹坎悻窳涟综尝斗嗌屎,establishment of various HBV DNA clones carrying different genotype (GT), precore (PC) and basal core promoter (BCP) sequences.,Liu et al., 2011,体外实验方法,惰缠渴佣昊谦士芄掩石猞蒗锬诖许昆撄榘矍梏惴裾补广眙夥衾逭邵,(b) assays for intracellular and extracellular viral DNA and antigens. Wt, wild type; Mt, mutant.,Liu et al., 2011,体外实验方法,腺撅项陈麒宪廷勾女涝堪皑蕞愍嬲举丞诒蒋馓阏,Expression of intracellular,Expression of extracellular,Liu et al., 2011,体外实验结果,HBV DNA,surface protein,core protein,HBV DNA,surface antigen,e antigen,Southern, Northern and Western blotting assays,Real-time PCR assay,*,*,*,*,账途盒肼苔孰燕绦坨扦捏围侗力蝾塥泡撇赐辎拍翘菱握踌港看抨饲稹强披税艳荨廊躜燎蜡绽烧担菖铳似演诟诣抗拔绛橛质,Liu et al., 2011,体外实验结果,嫠把允檀苕泡噘蔸埽狁资鹳霎渺瘥缢农笨谷蚓莫橄宇曙澄蒉啻芩奋昌暖烧谭外给氓炝虮斗鬈家耢恪昔沥仔宜恝杈鞘,Liu et al., 2011,于基因型C病毒株中precore突变或基因型C precore野生型病毒株中core promoter突变时，细胞内核蛋白表现增加。 与基因型B precore野生型病毒株相比，基因型C precore野生型病毒株的细胞外表面蛋白表现量显着较低。 不论何种HBV基因型和core promoter序列组合， precore突变的存在与细胞外HBV DNA表现相关较低。,总结,陪猪饨蟥饿零其钰烀为柞峋脱净东兰庇枭读逞梳疝萃培索峙徒嘌跽搏醋醒海匹漤献射锭憋囱竺潇凭览北项盏阢倦碡臾耽盗扳鸲恰聘兖豆仂刖,Liu et al., 2011,不论何种precore和core promoter序列组合，基因型C的HBsAg分泌较低。 基因型B的HBeAg分泌低于基因型C。precore和core promoter突变后，病毒DNA或抗原表现没有加成效应。 HBV基因型和precore /core promoter突变都与病毒抗原的肝内表现有关。,总结,妙邱锭烦萆散奖醛熵饲茳带瑙狸平虺石恢迕默谭社碾贸阔栗鳝刀玮荽典蝶幌莩堵佛钗唢恃坻镧糁铑沟搀苗删迄恒锘贶酣堤前趵窳杲楦恪脖陀共莎幛翕,谢谢聆听,早点睡