曲马多在小鼠体内的时间药理学.doc

曲马多在小鼠体内的时间药理学药学ketaVhataceutlcaSinica2001,36(8):561564曲马多在小鼠体内的时间药理学刘晓平,宋建国(皖南医学院药理教研室,安徽芜湖241001)摘要:目的研究曲马多对小鼠的急性毒性,药教学及药代动力学的昼夜节律性.方法小鼠在08:00.12:00,16:00.2O:00,24:00和04:O0i口曲马多后,观察其急性死亡率,对热板和压尾刺激的反应及药代动力学的变化.结果曲马多对小鼠的急性毒性有明显的昼夜节律,且血药浓度的昼夜节律晕正相关.毒性作峰值在暗中期;曲马多对小鼠的镇痛作用存在昼夜节律性差异,作用峰值在暗后期;曲马多在小鼠体内的药代动力学有用药时间依较性结论曲马多对小鼠的急性毒性,镇痛作用及药动学均存在昼夜节律性.美键词:曲马多;镇痛药物;时间药理学中图分类号:R965;R969.1文献标识码:A文章编号:05134870(2001)08056I一04研究表明,人及动物对疼痛的敏感性有时间节律性,且体内镇痛介质也呈时问节律性变化时问药理学研究证明,许多镇痛药的毒性,药效学及药代动力学均有时间节律性.若能根据疼痛反应及镇痛药毒性,药效的时间节律特点择时用药,可能进一步发挥药物的镇痛效果,降低不良反应曲马多是一种新型镇痛药,有弱的阿片受体激动作用,并能通过去甲肾上腺素(NE)和5一羟色胺(5一lit)等单胺类递质对疼痛缓解起协同调控作用.NE与5-HT等递质参与脊髓水平以下伤害性刺激的调控,阻抗伤害性冲动的传导从而降低疼痛敏感性曲马多可抑制中枢神经元对NE和5-HT的回摄而发挥作用.与其他镇痛药相比,曲马多成瘾性及耐受性均较小,对心血管及呼吸系统影响不明显,近年来应用日趋广泛至今,尚未见有关曲马多的时间药理学研究报道.本文初步研究了曲马多的急性毒性,药效学及药代动力学的昼夜节律及其可能的机制,以期对本品的临床安全,合理用药提供参考.材料与方法动物昆明种小鼠,4周龄,体重(2O3)g,自收稿H期:2000-tt一06作者简介:刘晓平(I968一).男.讲师.硬士宋建国(I949一).男.教授.博Tel:(0553)3832468.F缸:(0553)3811994.E-mall-iuSxSaoping实验前2周,置于标准的明一暗周期下饲养(明期o6:0018:00,明期:暗期为12:12h),自由进水进食,维持室温(153)oC.药品曲马多(批号9904211):针剂100mg?2mL,石家庄华盛制药集团生产.急性毒性试验小鼠120只,均分6组,旱舍各半,分别于O8:0o.12:o0,16:OO,2O:0o,24:00及04:00相应给予一组动物曲马多185nag?kg.(ip),观察并记录各时间用药组动物48h内死亡率.药效学试验旱小鼠72只,均分6组,各组动物分别于以上相同时问ip给予曲马多33mg,kg,记录用药前,后小鼠对热板法反应的潜伏期.另取小鼠按同样方法处理,记录用药前,后小鼠对压尾法的反应,以小鼠挣扎时的汞柱高度为指标.试验结束后,即刻断头处死动物,取血低温保存,留待测定血浆曲马多浓度(两只小鼠的血合成一个血样).药代动力学试验小鼠100只,均分为两组,旱含各半,每组分别于16:(】(】和04:00给予曲马多52mg?kg,于用药后2O,30,45,6O和120mln处死小鼠,取血,低温保存,测定血药浓度,按一室开放模型计算药代动力学参数.血药浓度的测定Waters高效液相色谱仪(waters515泵,PerkinElmerLC一240荧光检测器)测定血药浓度.数据分析生物时问序列资料的昼夜节律以余弦法(singleccinormethod)分析,计量资料及计数资料组问差异分别用检验及T检验分析药学AetaPharmaceutieaSinica2001,36(8i:561584结果1急性毒性的昼夜变化相同剂量F,因用药时间不同,曲马多对小鼠的急性毒性有明显昼夜差异.暗期(动物活动期)用药毒性大于明期(动物休息期),24:00用药死亡率最高(95%);16:00用药,死亡率最低(65%),两组问有显着性差异(P<0.05).余弦法分析表明,曲马多对小鼠的急性毒性有明显昼夜节律(P<0.O1),最佳拟台曲线=77.50+13.02cos(O.26t046?),峰值时()l:45(图1).100如舯70艺盏6050CIocldhFigure1Circadianvariatlotlofmicemortalityobsenedin48haftertramadol185mg.kgip.P<005comparedwiththegroupvethedrugat24:00(=20)2药效的昼夜变化曲马多对小鼠的镇痛作用也存在昼夜节律热板法及压尾法均证实,曲马多在暗后期用药作用较明后期强.16:o0用药动物对热板反应的潜伏期增加值最小】5412.7)s,o4:o0用药潜伏期增加值最大(35.824,8)s,最佳拟台曲线为y=2378+9.26cos(0.26t一1.4O),峰值时为O5:21;l6:00用药小鼠耐受压尾汞柱高度增加值最低(9j4.2j1/1111Hg,o4:o0用药汞柱增加值最高(16.6162)nmalfg,最佳拟台曲线为r=12.15+3.77cos(0.26t一144),峰值时为05:28(图2).3血药浓度昼夜节律药效学试验结束后,所测得的各时间点曲马多的血药浓度也有明显昼夜差异,暗期用药血药浓度高于明期,峰值时为24:00(9.251.20)g?mL,谷值时为12:00(5.631.25)g?mL.血药浓度的最佳拟台曲线为y=6.60+1.55cos(O.26t一0.002)(图3)r1丁.詈dk,hFigure2Cinadianvariationofmicereactiontopainstimulationbeforeand,fitel-tramadol33nag.kgipatdifferenttimeoftheday.representsthereactiontohotplatetest;:一一represettsthereactiontotailpressingtestP<005.P<0Olcomparedwiththegroupgiventhedrugat04:00【,=I2)器812162244CtoehFigure3Circadtanvariationofbloodtramadolconcentrationinmiceaftertramadol33ragkg一ipatdifferenttime0ftheday.P<0.05comparedwiththegmupadministratedat24:00(s,n=6J对血药浓度与急性毒性做相关性分析,得方程y=28.44+7.22X,(=090,n=6,P<0.05),表明两者有正相关性.血药浓度与药效的相关性研究表明,两者无明显相关性.4药代力动学昼夜变化曲马多在小鼠体内的药代力动学呈用药时间依赖性.16:00用药后2O,30min的血药浓度明显低于o4:OO用药组.16:肿用药甥K和删大于o4:o0用药组,r和AUC则小于04:o0用药组,各参数差别均有显着性意义(表1)E=0El0;EJ0盛Hn一药学AtaIlarmaceaticaSinlca2001.36(8):56l一564?563-Table1Pbarmacokineficparametersoftramadolinmiceafterasingledoseof52mg-kgipat16:00and04:00l6.:rm,hAUC/thmL.c(Z0rain),?lc(30rainj,-mll0100D20a90030】41003ll80l5O590憾0090【)3I54l74100:22讨论研究证明,曲马多对小鼠的急性毒性有明显的昼夜差异,暗期(小鼠活动期)毒性大于明期(休息期).小鼠中毒死亡多发生在用药后20rain以内,中毒症状为躁动抽搐,举尾,大小便失禁等:尸体解剖各脏器未见明显异常.故初步认为急性毒性以中枢神经毒性为主.对各时间组动物血药浓度与急性毒性相关性分析表明,曲马多急性毒性的昼夜差异主要由血药浓度的昼夜节律所致.药效学试验发现,曲马多对小鼠的镇痛作用也有明显昼夜节律,暗期作用强于明期一同等剂量的药物在不同时间药效不同,一般有两个原因:一是机体对药物的敏感性存在时间差异,其次是药代动力学存在时间性差异由于曲马多在小鼠体内的血药浓度与其镇痛效应无明显相关性,提示药效的昼夜变化由血药浓度昼夜变化引起的町能性较小一PuglisiAllegra等证明,动物对疼痛反应的昼夜差异与体内吗啡样肽分泌的昼夜节律性有关,内啡肽分泌高峰期,即是疼痛敏感性的低谷期71.Wesche还报道小鼠脑啡肽浓度在休息期较活动期高两倍以上.由于小鼠活动期(暗期)脑啡肽浓度低于休息期(明期),既暗期内源性镇痛物质水平偏低,此时动物耐受疼痛的能力较弱,因而对外源性镇痛物质的敏感性相对较强,使得曲马多的药教呈现昼夜差异药动学研究证实,小鼠对曲马多药动学有用药时间依赣性,明期的.和cl比暗期大,而AUC和r小.由于无明显差异,所曲马多曲动学的昼夜差异主要是由其消除的昼夜差异所致.文献报营曲马多主要经肝代谢,且小鼠肝中细胞色素P一450含量在明后期最高.说明此时肝微粒体酶活性最大,这可能是曲马多在明期消除多于暗期的原.本研究首次证实.曲马多对小鼠的急性毒性,镇痛效应及药动学均存在昼夜节律性.前人对疼痛的时间生物学研究也证实,人及动物对疼痛敏感性,体内镇痛介质也存在昼夜节律性差异这就为曲马多临床择时用药提供了可行性,在制定用药方案时,若能根据时间药理学原理,选择合适的用药时间及剂量,可望提高曲马多的疗效,降低其不良反应.就本试验而言,曲马多对小鼠的药效及毒性的峰值均在暗期,若夜间片药时酌减剂量,既可获得满意疗效,又可减少毒性反应应当指出,小鼠是夜行性动物,活动规律与人类相反,所以人类对曲马多的反应可能是白昼活动期毒性较大,药效较强.但是,临床患者对疼痛及药物的反应会受到更多复杂因素的影响.实现对曲马多的择时用药或时间治疗,尚有待更深入的基础及临床药理学研究.致谢:率实骑得到皖南医学院杨解人,桂常青,冒国光曾照密和陈波等同志的帮助REFERENOES:1jHesxChrompharmorologyaM(hronother:M1Tianjin:TianjinTechniquePublishingHouse.1994l5】一l52【2JllaffaRBOpinidandnonopioidofactionsoftramadol0.natypicalopioidanalgesicJJJPharmacy1ExpThe,-,1992.2603):275一73NatlhiesenTTheexperimentaltoxicolngyoftramadol:Eln0lewJLett199895(1:63664jxusYMetho&ofPharmacologicalExpeflmentsM.Beljing:PeoplesMedicalPuhlishingttouse1982509l2l5JChenBPharmacokineticsandrelativehioavailablll【T0ftramadolhvdrochlaridetablelinChinesehealthyv0lL山teJChinJClinPharma,:olThe,-(inChinese).1999,4(4):2922956.HesxChronopharmacologyandChronoherapyM.Tianjin:TianiinTechnique,PuhliingI-louse,19943744.【7JPuglisiAllegraS.Casfilar,wc.CircadianvariationsinstressinducedanalgiaJJBrainRes,1982,252(4):373377L8We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