研究黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血尿酸的影响

1 / 7 研究黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血尿酸的影响 摘要：目的研究黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响。方法选择小鼠腹腔注射尿酸生成的前体物质次黄嘌呤 (Hypoxanthine)的方法制备高尿酸血症动物模型 , 给予黄柏、苍术提取物灌胃（含生药 18.75 g/kgd ） ,连续1 周 ,采用改良尿酸酶 Trinders 法测定小鼠血清尿酸值。结果黄柏与苍术提取物组与别嘌呤醇组均能显著地降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平 (P关键词： 黄柏 苍术 提取物 高尿酸血症 血尿酸 高尿酸血症可导致痛风、尿 酸性肾病与肾功能不全等疾病的发生 ,且与脂代谢紊乱、糖尿病及心脑血管疾病关系密切 1， 2。近年来 ,痛风和高尿酸血症的发病率呈上升趋势 ,发病年龄呈现低龄化 ,给社会带来巨大的负担 ,是当今世界尤其是中老年男性的常见病、多发病。目前痛风和高尿酸血症的治疗仍然需要使用抗炎药及排尿酸药物、黄嘌呤氧化酶抑制剂以缓解高尿酸血症 , 控制病情发展，其中尤以别嘌呤醇最为常用 3，但别嘌呤醇所致的如皮肤过敏、药物性肝损害、威胁生命的超敏变态反应综合症等毒副作用限制了其安全使用 4 6。 2 / 7 近年来，从天然资源中寻找新型抗 痛风和高尿酸血症药物已成为药学研究的一个热点。临床上以黄柏、苍术为主药组成的方剂如二妙系列方治疗痛风取得了明显的效果 7 9。本研究以血清尿酸水平为指标 ,探讨黄柏 Cortex Phellodendri）与苍术 Atractylodes lancea 提取物 (ECPAL)对高尿酸血症小鼠血尿酸的影响。 1 器材与方法 1.1 动物 健康 SPF级昆明种小鼠 ,雌雄各半，（ 202 ）g，由北京大学医学部实验动物科学部提供合格证号： SCXK（京） 2002-0001，在整个实验过程中动物自然饮水和供给饲料 。 1.2 药品与试剂黄柏与苍术中药饮片（北京同仁堂药店提供）；次黄嘌呤（ Hypoxanthine，中国医药集团上海化学试剂公司产品批号， 991027）；别嘌呤醇片（ Allopurinol，上海延安制药厂产品 ,批号 2000201）；尿酸试剂盒（ 上海科华 -东菱诊断用品公司出品 ,批号 XX0601 ） ;其它均为国产分析纯试剂。 1.3 仪器 HH-6 数显恒温水浴锅， SHZ-CA 型循环水式真空泵， 20B型万能粉碎机， VP真空抽滤装置。台式高速离心机 (TGL-16G)； Lisa300型全自动生化分析仪。 1.4 黄柏与苍术提取物制备黄柏与苍术饮片 (500 g)，3 / 7 清洗、干燥、粉碎； 80%乙醇浸泡 12 h, 80%乙醇热回流 (85)提取 3次， 2 h/次、合并 3次提取液，过滤，减压回收乙醇，浓缩得清膏配制成 500 g/L混悬液备用。 1.5 高尿酸血症模型的建立复制小鼠高尿酸血症模型 10。取昆明种小鼠 20只 ,体重（ 202 ） g , 适应性喂养1 周后，随机分为 2 组 ,每组 10 只。模型组腹腔注射次黄嘌呤（ 0.63 g/ kg）造成小鼠高尿酸血症模型。正常对照组给以等体积生理盐水腹腔注射。造模后于 30 min， 1， 2， 4， 6 h 和 8 h六个时间点从小鼠眼眶取血 ,离心（ 3 000 r/ min）分离血清 , 采用改良尿酸酶 Trinders法测定小鼠血清尿酸值 11。结果见图 1。 1.6 黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响取昆明种小鼠 40 只 ,体重（ 202 ） g , 适应性喂养 1 周后，随机分为 4 组 ,即正常对照组、高尿酸血症模型组、黄柏与苍术提取物组和别嘌呤醇组 ,每组 10 只。灌胃给药，给药剂量分别为：黄柏与苍术提取物组（含生药 18.75 g kg -1d -1)；别嘌呤醇组（ 0.01 g kg-1d -1)。正常对照组高尿酸血症模型组每天灌胃等体积生理盐水。连续给药 7 d。于给药第 8 天灌后 0.5 h ,每只鼠按 0.63 g/ kg 腹腔注射次黄嘌呤 ,正常对照组腹腔注射等体积生理盐水，30min后从眼眶取血 ,分离血清测定血清尿酸值。结果见表 1。 4 / 7 1.7 黄柏与苍术提取物对正常小鼠血清尿酸水平的影响取昆明种小鼠 30 只 ,体重（ 202 ） g , 适应性喂养 1周后，随机分为 3 组 ,即正常对照组、黄柏与苍术提取物 (含生药 18.75 g kg -1d -1) 及 别 嘌 呤 醇 组 (0.01 g kg -1d -1），每组 10 只，按以上给药剂量灌胃给药，正常对照组灌胃等体积生理盐水 ,连用 7 d。于给药第 8 天灌胃后 0.5 h ,药物组腹腔注射次黄嘌呤， 30 min后从眼眶取血 ,分离血清测定血清尿酸值。结果见表 2。 1.8 统计学处理所有数据经 Spss 软件处理，采用单因素方差分析，用均数 标准差 (s) 表示。 2 结果 2.1 次黄嘌呤对小鼠血清尿酸水平的影响次黄嘌呤对小鼠血清尿酸水平的影响见图 1。由图 1 可看出次黄嘌呤能显著地提高小鼠血清尿酸水平 ,造成小鼠高尿酸血症模型 ,腹腔注射次黄嘌呤 30 min 后血清尿酸值达到高峰 ,4 h 后降低到一半，模型组小鼠血清尿酸水平在 8 h仍然处于较高的水平。 图 1 次黄嘌呤对小鼠血清尿酸水平的影响（ n=10）（略） 2.2 黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响小鼠腹腔注射次黄嘌呤后，血尿酸含量显著高于正常对照组 ,有极显著性差异 ( P 2 Sundstrom 5 / 7 J,Sullivan L,DAgostino RB,et al.Relations of serum uric acid to longitudinal blood pressure tracking and hypertention incidence J .Hypertention,XX,45(1):18. 3 叶任高，陆再英，谢 毅，等 . 内科学，第 6版 M .北京：人民卫生出版社 . XX： 865. 4 Markel A. Allopurinol-induced DRESS syndrome J .Isr Med Assoc J. XX,7(10)： 656. 5 Urban T,Maquarre E,Housset C,et al. Allopurinol hypersensitivity. A possible cause of hepatitis and mucocutaneous eruptions in a patient undergoing antitubercular treatment J .Rev Mal Respir， 1995, 12( 3)： 314. 6 赵 迎 ,孙福成 .别嘌呤醇致药物性肝损害 2 例 J .中国新药杂志， XX,12（ 7）： 570 7 劳献宁，李运兰，刘宝英 .四妙散加减治疗药物性尿酸增高症的疗效 观察 J .XX,22(4)： 273. 8 史学军 ,张立群 . 二妙丸与四妙丸的组方及临床合理应用 J .药物不良反应杂志 ,XX,6： 427. 9 彭述宪 . 二妙散的临床运用 J .湖南中医药导报， XX,9(7)： 10. 10 陈光亮，徐叔云 .高尿酸血症动物模型研究进6 / 7 展 J .中国药理学通报， XX ,20 (4) ： 369. 11 刘洪光 .氯硝安定对改良 Trinders 法测定尿酸的干扰 J .实用医技杂志， XX， 11（ 6）： 1004. 12 Akkasilpa S,Avihingsanon Y, Hanvivadhanakul P, et al. Clinicalmanifestations of patients with hyperuricemia J .J Med Assoc Thai,XX, 87 ( Suppl 2) : S41 . 13 唐 灿 ,杨 奎 .高尿酸血症动物模型初探 J .中药新药与临床药理 ,2000,11 (5) ： 292. 14 Mori H,Fuchigami M,Inoue N,et al.Principle of the bark of phellodendron amurense to suppress the cellular immune response:effect of phellodendrine on cellular and humoral immune responses J . Planta Med ,1995 ,61(1)： 45. 15 Lee YM,Kim H,Hong EK,et al. Water extract of 1:1 mixture of Phellodendron cortex and Aralia cortex has inhibitory effects on oxidative stress in kidney of diabetic rats J .J Ethnopharmacol, 2000,73 (3)： 429. 16 孔令东 ,杨 澄 ,仇 熙 ,等 .黄柏炮制品清除氧自由基和抗脂质过氧化作用 J . 中 国 中 药 杂志 ,2001 ,26(4) ： 245. 7 / 7 17 Keiichi Suto,Shinichi Kakinuma,Yuji Ito,et al.Determination of atra